Список сокращений и условных обозначений 2
ВВЕДЕНИЕ 5
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 7
1.1 Процессы культивирования микроорганизмов 7
1.2 Регистрация хемилюминесценции как метод исследования
оксидативных процессов 12
1.3 Оксидативные процессы и окислительный стресс при
культивировании микроорганизмов 16
1.4 Антисептики как окислители 20
1.5 ГРМ-бульон (Питательный бульон для культивирования
микроорганизмов) 23
1.6 Стандарт мутности МакФарланда 25
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 27
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ 31
3.1 Культивирование микроорганизмов 31
3.2 Исследования хемилюминесценции антисептиков при добавлении
в тест-систему активных форм кислорода 34
3.3 Динамика параметров хемилюминесценции питательных сред с
добавлением антисептических средств в разные сроки
культивирования микроорганизмов 37
3.4 Стандарт мутности МакФарланда 49
ВЫВОДЫ 52
Список литературы 53
ПРИЛОЖЕНИЕ 64
Актуальность исследования. Антисептик - современное антимикробное средство, предназначенное для обработки кожи. В настоящее время данные препараты являются очень востребованными, благодаря широкому спектру антимикробной активности, простоте использования и разнообразным формам выпуска. При выборе антисептика необходимо учитывать его состав и широту антимикробного действия [5].
Антисептики снижают активность множества бактериальных ферментов. Под воздействием антисептиков останавливается процесс разделения клеток и наступают морфологические изменения, которые сопровождаются нарушением клеточной структуры .
В качестве антисептиков применяют также вещества из группы окислителей, к которым относятся перекись водорода, хлоргексидин, мирамистин, калий перманганат. Они обладают слабым антисептическим и дезодорирующим эффектами, связанными с освобождением кислорода [7].
Влияние компонентов питательных сред на образование свободных радикалов остается не изученной. Во многом это связано с малым временем жизни свободных радикалов, что затрудняет их обнаружение. Многообещающей методикой изучения свободно-радикального окисления представляется запись регистрация хемилюминесценции, свечения, возникающего при взаимодействии радикалов. Благодаря этому методу удается обнаружить самые реакционноспособные радикалы, которые другими методами не регистрируются [8].
Главная отличительная особенность свободных радикалов - высокая химическая активность. Они способны влиять и на скорость клеточного деления, и на рост микроорганизмов.
Так как, в литературе встречаются данные о том, что питательные среды культивирования мо оказывают влияние на параметры ХЛ, представляет интерес оценить влияние воздействия антисептиков на оксидативные процессы в средах культивирования микроорганизмов. Это было целью нашей работы.
Цель исследования: оценка влияния антисептических средств на оксидативные процессы в средах культивирования микроорганизмов.
Задачи исследования.
1. Изучить окислительные свойства антисептиков при добавлении в тест-систему генерации АФК.
2. Определить изменения интенсивности хемилюминесценции при добавлении антисептиков в среду культивирования микроорганизмов.
3. Исследовать изменения концентрации бактерий в среде культивирования микроорганизмов при добавлении антисептиков набором стандартов мутности McFarland (Test tubes standard set).
4. Проанализировать результаты полученных исследований влияния антисептических средств на среду культивирования микроорганизмов.
Научная новизна.
Впервые была дана оценка изменений показателей
хемилюминесценции питательных сред культивирования микроорганизмов в модельной системе генерации активных форм кислорода при добавлении антисептических средств: перекись водорода, хлоргексидин, мирамистин, раствор перманганата калия.
1. Исследуемые антисептики: перекись водорода, мирамистин, хлоргексидин, раствор перманганата калия обладают прооксидантной активностью, усиливая показатели светосуммы свечения в модельной системе генерации АФК.
2. При добавлении антисептиков в среду культивирования микроорганизмов они также проявили прооксидантные свойства. Наиболее выраженные оксидативные свойства были выявлены у перекиси водорода, которая увеличила интенсивность ХЛ на 30%, добавление мирамистина увеличило интенсивность ХЛ на 20%, перманганат калия и хлоргексидин усилили свечение на 15%.
3. Исследование действия всех исследуемых антисептиков на среду культивирования микроорганизмов визуальным методом стандарта мутности МакФарланда выявило одинаковую степень воздействия их на количество бактерий. Мутность в средах культивирования не визуализировалась, что свидетельствует о антибактериальном характере действия препаратов.
4. Изменение интенсивности ХЛ в тест системе генерации АФК может использоваться для оценки эффективности антисептиков и поиска новых препаратов, обладающих прооксидантной активностью.
