Список сокращений и условных обозначений 3
ВВЕДЕНИЕ 4
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 7
1.1. Противогрибковые препараты как важные средства терапии
микоза 7
1.2. Механизмы действия пробиотиков и пребиотиков 9
1.3. Оксидативные процессы и окислительный стресс 9
1.4. Регистрация хемилюминесценции как метод исследования оксидативных процессов и прооксидантной активности препаратов 18
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 23
2.1. Объекты исследования 23
2.2. Модельные системы для оценки антиоксидантной активности .. 23
2.3. Методы исследования 25
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 27
3.1. Прооксидантная активность противогрибковых препаратов по отношению к генерации активных форм кислорода методом регистрации
хемилюминесценции 27
3.2. Оценка прооксидантной активности противогрибковых препаратов по отношению к реакциям перекисного окисления модельных
липидов методом регистрации хемилюминесценции 29
3.3. Оценка прооксидантной активности противогрибковых препаратов в сыворотке крови методом регистрации хемилюминесценции 31
3.4. Оценка прооксидантной активности противогрибковых препаратов в цельной крови методом регистрации хемилюминесценции . 33
3АКЛЮЧЕНИЕ 35
ВЫВОДЫ 37
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 38
Актуальность исследования. Применение противогрибковых средств имеет высокую актуальность, поскольку грибковые инфекции являются одними из наиболее распространенных заболеваний в мире. Интенсивное применение противогрибковых средств обусловливает проведение исследований, направленных на более глубокое понимание их механизма действия.
Противогрибковые препараты оказывают свой эффект, в том числе, через усиление выработки свободных радикалов - активных форм кислорода и пероксидных липидных радикалов, благодаря их прооксидантной активности. Ряд исследований указывают на окислительное повреждение как на дополнительный способ действия противогрибковых препаратов [66,67,67]. Чрезмерное образование свободных радикалов лежит в основе феномена окислительного стресса [10,11]. Окислительный стресс является неотъемлемой частью повреждения молекул и структур клеток. Он возникает в результате увеличения выработки свободных радикалов и снижения защитных ферментных систем, что ведет к развитию апоптоза и некроза. Но не только это - окислительный стресс может также активировать окислительные метаболиты. Реализация свободно-радикальных процессов может способствовать нейтрализации чужеродных агентов и лежать в основе действия противобактериальных и противогрибковых средств. Свободнорадикальные реакции могут выступать в качестве средства деструкции и элиминации чужеродных антигенов, например вырабатываемые фагоцитами активные формы кислорода обеспечивают киллинг бактериальных клеток.
Среди многих методов для определения антиоксидантной активности веществ, наиболее эффективный - регистрация хемилюминесценции. Хемилюминесценция (ХЛ) - это сияние, возникающее при столкновении 4
свободных радикалов, которое может быть улучшено при использовании определенных веществ, таких как люциноген и люминол [10, 57].
Разные противогрибковые средства характеризуются своими особенностями действия, и потенциально, могут обладать разной прооксидантной активностью. Оценка прооксидантных свойств
противогрибковых препаратов отражает одну из сторон их эффективности - относительно окислительного повреждения, связанного с активацией оксидативного стресса.
В прикладном плане, применение хемилюминесцентных методов позволит разработать экспресс-методы определения прооксидантных свойств противогрибковых препаратов. Сказанным и предопределен выбор темы дипломной работы.
Цель исследования: оценка методом хемилюминесценции
прооксидантной активности противогрибковых препаратов.
Задачи исследования:
1. Исследовать прооксидантную активность противогрибковых препаратов в отношении выработки активных форм кислорода методом регистрации хемилюминесценции
2. Исследовать прооксидантную активность противогрибковых препаратов в отношении выработки активных форм кислорода методом регистрации хемилюминесценции
3. Исследовать прооксидантную активность противогрибковых
препаратов в цельной крови методом регистрации хемилюминесценции
4. Исследовать прооксидантную активность противогрибковых
препаратов в сыворотке крови методом регистрации хемилюминесценции
Научная новизна исследования заключается в том, что впервые проведена оценка прооксидантных свойств противогрибковых препаратов, которые потенциально составляют важный компонент действия данных средств. Дана сравнительная оценка противогрибковых препаратов разных видов.
Теоретическая значимость исследования заключается в выявлении и уточнении механизма действия противогрибковых препаратов относительно их способности вызывать оксидативные процессы
Научно практическое значение диссертационного исследования заключается в разработке основанных на регистрации хемилюминесценции экспресс-методов определения прооксидантных свойств противогрибковых препаратов.
1. Противогрибковые препараты обладают прооксидантной активностью по отношению к активным формам кислорода по данным хемилюминесценции. Наибольшей прооксидантной активностью обладал Клотримазол, далее следовали Нистатин и Флуконазол. Наименьшими прооксидантыми эффектами обладал Тербинафин.
2. Противогрибковые препараты обладают прооксидантной по отношению к липидным радикалам по данным регистрации хемилюминесценции. Наибольшей прооксидантной активностью обладал, Нистатин, далее Клотримазол и Флуконазол в равной мере. Для препарата Тербинафин не было выявлено достоверных статистических различий.
3. Противогрибковые препараты обладают прооксидантной
активностью в сыворотке крови по данным регистрации хемилюминесценции. Нистатин обладал наиболее выраженной прооксидантной активностью, далее следовали Тербинафин и Флуконазол, Клотримазол обладал наименьшей прооксидантной активностью.
4. Противогрибковые препараты обладают прооксидантной активностью в системе цельной крови по данным регистрации хемилюминесценции. Нистатин обладал наиболее выраженной прооксидантной активностью, далее следовали Тербинафин и Флуконазол, Клотримазол обладал наименьшей прооксидантной активностью.
