Список сокращений и условных обозначений 2
ВВЕДЕНИЕ 4
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 7
1.1. Пробиотики и пребиотики как средство поддержания физиологического состояния полости рта 7
1.2. Механизмы действия пробиотиков и пребиотиков 9
1.3. Оксидативные процессы и окислительный стресс 12
1.4. Регистрация хемилюминесценции как метод исследования
оксидативных процессов и антиоксидантной активности препаратов 21
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 25
2.1. Объекты исследования 25
2.2. Модельные системы для оценки антиоксидантной активности .. 25
2.2. Методы исследования 27
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 29
3.1.Антиоксидантная активность пробиотических комплексов
полости рта по отношению к генерации активных форм кислорода 29
3.2. Оценка антиоксидантной активности пробиотиков для полости рта по отношению к реакциям перекисного окисления модельных липидов 31
3.3. Оценка антиоксидантной активности пробиотических
комплексов в сыворотке крови 34
3.4. Оценка антиоксидантной активности пробиотических
комплексов для полости рта в цельной крови 35
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 37
ВЫВОДЫ 39
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 40
Актуальность исследования. Пробиотики являются одними из наиболее часто применяемых продуктов биотехнологии и промышленной биотехнологии, и выступают инструментом в поддержании здоровья человека. Исследования показывают, что они могут помочь в укреплении иммунной системы, улучшении работы пищеварительной системы, предотвращении различных заболеваний. Активное применение пробиотики находят и для восстановления микробиома полости рта, лечения воспалительных заболеваний. Интенсивное применение пробиотиков обусловливает проведение исследований, направленных на более глубокое понимание их механизма действия
Одним из механизмов действия пробиотиков может являться их антиоксидантная активность - способность подавлять образование свободных радикалов: активных форм кислорода (АФК) и пероксидных липидных радикалов [11]. Чрезмерное образование свободных радикалов лежит в основе феномена окислительного стресса [10,11]. Окислительный стресс является универсальным звеном повреждения молекул и структур клеток, и кроме того, он является причиной апоптоза и некроза. Увеличение выработки свободных радикалов свидетельствовать о развитии окислительного стресса, снижении активности защитных ферментных систем клеток, активной выработки окислительных метаболитов.
Среди методов определения антиокислительной активности субстратов, одним из наиболее чувствительных является метод регистрации хемилюминесценции. Хемилюминесценция (ХЛ) - это свечение, которое возникает при взаимодействии свободных радикалов, которое может быть избирательно усилено при добавлении различных веществ, в частности, люциногена и люминола [10, 57].
Разные противогрибковые средства характеризуются своими особенностями действия, и потенциально, могут обладать разной прооксидантной активностью. Оценка антиоксидантных свойств
противогрибковых препаратов отражает одну из сторон их эффективности - относительно окислительного повреждения, связанного с активацией оксидативного стресса.
В прикладном плане, применение хемилюминесцентных методов позволит разработать экспресс-методы определения антиоксидантных свойств пробиотиков. Сказанным и предопределен выбор темы дипломной работы.
Цель исследования: исследовать антиоксидантную активность
пробиотических комплексов для полости рта.
Задачи исследования.
1. Исследовать антиоксидантную активность пробиотических комплексов для полости рта по отношению к генерации активных форм кислорода;
2. Исследовать антиоксидантную активность пробиотических комплексов для полости рта по отношению к реакциям перекисного окисления модельных липидов;
3. Исследовать антиоксидантную активность пробиотических комплексов для полости рта в сыворотке крови;
4. Исследовать антиоксидантную активность пробиотических комплексов для полости рта в цельной крови;
5. Сравнение антиоксидантного действия пробиотического комплекса Бифистим с Бактоблиссом во всех модельных системах.
Научная новизна исследования заключается в том, что впервые изучены комплексные антиоксидантные свойства пробиотических комплексов для полости рта по отношению к широкому спектру свободнорадикальных агентов.
Теоретическая значимость исследования заключается в выявлении антиоксидантных свойств пробиотических комплексов для полости рта относительно свободнорадикальных агентов различного типа.
Научно-практическое значение исследования заключается в разработке основанных на регистрации хемилюминесценции экспресс- методов определения антиоксидантных свойств пробиотиков и пребиотиков.
При выполнении дипломной работы были изучены фундаментальные аспекты микробиологии и биофизики и освоены отдельные методы: метод оценки антиоксидантной активности методом регистрации
хемилюминесценции, проанализированы источники литературы по теме работы, в первую очередь для обзора литературы.
В данной работе оценивалась антиоксидантная активность пробиотиков для полости рта. Исследование проводилось в модельных системах, каждая из которых отражала один из аспектов антиоксидантной активности. В дипломной работе были поставлены следующие задачи:
1) Оценка антиоксидантной активности пробиотических комплексов для полости рта по отношению к генерации активных форм кислорода;
2) Оценка антиоксидантной активности пробиотических комплексов по отношению к реакциям перекисного окисления модельных липидов;
3) Оценка антиоксидантной активности пробиотических комплексов в сыворотке крови;
4) Оценка антиоксидантной активности пробиотических комплексов в цельной крови.
Исследование показало, что пробиотические комплексы для полости рта обладают антиоксидантной активностью. Они подавляют выработку активных форм кислорода и липидных радикалов. Кроме того, проявляют антиоксидантные свойства в цельной крови и сыворотки крови. Результаты исследования показали, что пробиотик Бифистим обладает большей антиоксидантной активностью, чем Бактоблисс. Это, очевидно обсуловлено входящим в его состав Коэнзима Q10.
Пробиотические комплексы для полости рта имеют потенциальную возможность защиты организма от окислительного стресса. Дальнейшие исследования позволят более точно определить механизмы данного действия и разработать рекомендации по использованию пробиотиков для профилактики и лечения окислительного стресса в ротовой полости.
Проведенные исследования создают предпосылки для практического применения используемых в данной работе методик, а именно разработки основанных на регистрации хемилюминесценции экспресс-методов определения антиоксидантных свойств пробиотиков.
