Список сокращений и условных обозначений 3
ВВЕДЕНИЕ 5
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 7
1.1 Представители условно-патогенной микрофлоры ротовой полости .... 7
1.2 Регистрация хемилюминесценции как метод исследования
оксидативных процессов 11
1.3 Оксидативные процессы и окислительный стресс при культивировании
микроорганизмов 13
1.4 Антисептики как окислители 15
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 17
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ 25
3.1 Культивирование микроорганизмов 25
3.2 Исследования хемилюминесценции антисептиков при добавлении в
тест-систему активных форм кислорода 28
3.3 Тест на антибактериальное действие антисептических препаратов 37
ВЫВОДЫ 40
Список литературы 41
ПРИЛОЖЕНИЕ 47
Актуальность исследования. Антисептик - современное антимикробное средство, предназначенное для обеззараживания кожи и слизистых оболочек. В настоящее время данные препараты являются очень востребованными благодаря широкому спектру антимикробной активности, простоте использования и разнообразным формам выпуска. При выборе антисептика необходимо учитывать его состав и широту антимикробного действия. По механизму действия антисептики разнообразны: микробостатические, микробицидные, денатурирующие белок микробной стенки и подвергающие оксидативному стрессу. При последнем процессе образуются свободные радикалы, особенность которых - высокая химическая активность. Они способны влиять и на скорость клеточного деления, и на рост микроорганизмов. Однако негативному влиянию оксидативного действия подвергаются не только патогены, но и клетки организма человека, так что нашей целью является обнаружение состава антисептика, уместного для лечения того или иного патологического процесса, исследуя их оксидативной активности.
Свободные радикалы имеют непродолжительное время жизни, что затрудняет их обнаружение. Однако, метод записи регистрации хемилюминесценции является предпочтительной и преимущественной техникой для изучения свободно-радикального окисления. Этот метод позволяет обнаружить самые реакционноспособные радикалы, которые не могут быть зарегистрированы другими методами .
Цель исследования: сравнить характеры оксидативного воздействия и эффективность антисептических препаратов на условно патогенные микроорганизмы ротовой полости.
Задачи исследования.
1. Изучить окислительные свойства антисептических препаратов при добавлении в тест-систему АФК (активных форм кислорода);
2. Исследовать рост микроорганизмов при предварительном анализе воздействия антисептического препарата на плотной питательной среде;
3. Исследовать изменения интенсивности хемилюминесценции при добавлении антисептических препаратов в среду культивирования микроорганизмов;
4. Проанализировать результаты полученных исследований влияния антисептических препаратов на среду культивирования микроорганизмов.
Научная новизна.
Впервые были оценены изменения показателей хемилюминесценции в питательных средах для культивирования условно-патогенных
микроорганизмов ротовой полости с содержанием антисептических средств в модельной системе генерации активных форм кислорода с целью рекомендации лечения инфекционных заболеваний и патологических процессов ротовой полости, обусловленные бактериальной активностью.
1. Антисептическим препаратом с наиболее выраженной прооксидантной активностью при взаимодействии с условно-патогенной микрофлорой является АСЕПТА. При оценке оксидативных процессов препаратов без присутствия микроорганизмов АСЕПТА уступает по показателям хлоргексидину.
2. Антисептическим препаратом с наиболее выраженной антиоксидантной активностью при оценке оксидативных процессов в присутствии микроорганизмов и без является стоматофит.
3. Антисептическим препаратом с наиболее выраженной противомикробной активностью является АСЕПТА. В четырёх тестах на антибактериальное действие зона ингибирования роста препаратом АСЕПТА характеризуется наибольшим диаметром, в трёх из которых разница в диаметрах с другими препаратами значительна.
4. В отношении к каталазоположительным S. aureus, которые также
продуцируют каротиноиды, обеспечивающие защиту микроорганизма от АФК, уместнее использовать препарат с антиоксидантным действием. Однако, в силу того, что тест на антибактериальное действие показал отрицательный результат в отношении антиоксидантного стоматофита на культуру S. aureus, среди
исследуемых антисептических препаратов возможна рекомендация прооксидантных препаратов. При необширных повреждениях тканей, не сопровождающихся естественными окислительными процессами, возможна рекомендация препарата АСЕПТА, в иных случаях уместна рекомендация более щадящих, но менее прооксидантных препаратов.
