ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Методы определения антибиотикоустойчивости 6
1.2. Общая характеристика исследуемого объекта. Морфологическая
характеристика кровохлебки лекарственной 16
1.2.1. Ареал и распространение 17
1.2.2. Химический состав 18
1.2.3. Применение в научной и народной медицине 18
1.3. Современные методы определения чувствительности микроорганизмов к
антибактериальным препаратам и их общая характеристика 20
1.3.1 Диско-диффузионный метод (ДДМ) 23
1.3.2. Метод серийных разведений 28
1.3.3. Е-тест 32
1.3.4. Метод «колодцев» 34
1.4. Ускоренные методы определения чувствительности микроорганизмов к
АБП 35
1.5. Экспресс-метод определения чувствительности микроорганизмов к
АБП 38
1.5.1. Полимеразная цепная реакция(ПЦР) 38
1.5.2. ДНК-ДНК гибридизация 42
1.5.3. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) 43
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования 45
2.2. Характеристика используемых тест-культур 45
2.2.1.Staphylococcus aureus 45
2.2.2. Enterococcus faecalis 47
2.2.3. Pseudomonas aeruginos 48
2.2.4. Klebsiella pneunoniae 50
2.2.5. Candida albicans 51
2.3. Методы исследования 52
ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Определение микробиологической активности сырья кровохлебки
лекарственной 54
3.1.1.Определение микробиологической активности травы и корневищ с корнями кровохлебки лекарственной в отношении Staphylococcu
aureus 54
3.1.2. Определение микробиологической активности травы и корневищ с
корнями кровохлебки лекарственной в отношенииЕ^егососсм
faecalis 55
3.1.3. Определение микробиологической активности травы и корневищ с
корнями кровохлебки лекарственной в отношенииPseudomonas
aeruginosa 57
3.1.4. Определение микробиологической активности травы и корневищ с
корнями кровохлебки лекарственной в отношении Klebsiella
pneunoniae 59
3.1.5. Определение микробиологической активности травы и корневищ с
корнями кровохлебки лекарственной в отношенииС-andida
albicans 60
ВЫВОДЫ 63
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 64
ПРИЛОЖЕНИЕ 68
Одной из важных задач фармацевтической науки является поиск, исследование и разработка новых эффективных средств растительного происхождения для лечения и профилактики острых и хронических заболеваний, особенно вызванных различными микроорганизмами.
В последние десятилетия, как в России, так и во всем мире наблюдается повышенный интерес к использованию лекарственного растительного сырья и препаратов на их основе. Это обусловлено тем, что в растениях содержатся ценные биологически активные вещества, оказывающие разностороннее влияние на организм человека. Потребность в заготовке сырья в естественных условиях год от года растет. Поэтому актуальным является более подробное изучение химического состава известных и уже используемых лекарственных растений с целью расширения возможностей их использования.
Жизнь человека теснейшим образом связана с растительным миром. В ходе своего эволюционного развития организм человека надежно приспосабливался к белкам, углеводам, жирам и самым разнообразным биологически активным веществам (витамины, макро- и микроэлементы, органические кислоты и др.) растительного происхождения, без которых невозможно нормальное течение жизненных процессов и развитие организма в целом. Изучение терапевтической активности лекарственных растений показало, что в лечебной практике целесообразно их применение без химической обработки в виде настоев, отваров, настоек и т. д., поэтому актуальным вопросом остается более подробное изучение химического состава водных извлечений из лекарственного растительного сырья и определение их активности. Перспективным растением в этом плане является кровохлебка лекарственная. Отвар и экстракт корневищ и корней кровохлебки применяют как вяжущее, противовоспалительное и кровоостанавливающее средство. Спиртовые и водные вытяжки корневищ и корней губительно действуют на различные микроорганизмы, возбудителей заболеваний.
Цель работы: Целью исследования является сравнительное изучение микробиологической активности травы и корневищ с корнями кровохлебки лекарственной из флоры Башкортостана в зависимости от использованной части растения и варианта извлечения действующих субстанций.
Для осуществления поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Осуществить постановку диско-диффузионного метода для оценки противомикробной активности травы и корневищ с корнями кровохлебки лекарственной.
2. Провести анализ антимикробной активности разных видов сырья кровохлебки, а также водных и спиртовых извлечений в отношении пяти микроорганизмов:57арЛу/ососсм5 aureus, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneunoniae, Candida albicans, Enterococcus faecalis.
3. Установить антимикробную активность разных видов сырья кровохлебки лекарственной.
1. Установлено, что антимикробная активность разных видов сырья кровохлебки различается в зависимости от использованной части растения и варианта извлечения действующих субстанций.
2. При анализе зон задержки роста микроорганизмов под влиянием кровохлебки антимикробная активность была наиболее выражена в отношении культуры Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis и Pseudomonas aeruginosa, менее значимым было влияние на Klebsiella pneunoniaeи Candida albicans.
3. Установлено, что наиболее выраженную антимикробную активность проявили экстракты из корневищ с корнями кровохлебки лекарственной в отличие от травы
4. При сравнении водных и спиртовых извлечений наиболее эффективными в противомикробном отношении были спиртовые экстракты.
