Введение 4-6
Глава I. Литературный обзор 7-27
1.1. Микроскопические грибы - их биология, физиология, экология,
участие в инфекционных процессах 7-11
1.2. Онихомикозы - распространенность, известные возбудители, патогенез, новые виды, вызывающие онихомикозы 11-17
1.3. Современные методы диагностики
онихомикозов 18-20
1.4. Вещества-антимикотики, механизмы их действия, развитие резистентности к ним и поиск новых эффективных фунгицидных соединений 20-27
Глава II. Материалы и методы 28-36
2.1.Объекты исследований 28-30
2.2. Соединения, использованные в экспериментальной работе 31-33
2.3. Методы исследований 34-35
2.3.1. Среды для культивирования микроскопических грибов 34
2.3.2. Выделение грибов из клинического
материала 35
2.3.3 Метод оценки фунгицидного действия новых соединений 35-36
Глава III. Результаты исследования и обсуждения 37-52
3.1. Выделение и идентификация изолятов из клинического материала 37-39
3.2. Оценка фунгицидной активности новых соединений in vitro 39-52
Заключение 53
Выводы 54
Список литературы 55-64
Приложение 65-76
Актуальность проблемы
Онихомикоз представляет собой грибковую инфекцию ногтевой пластинки, которая может вызываться различными видами патогенных грибков. При онихомикозе может поражаться одна или несколько ногтевых пластинок на руках, на стопах или одновременно на пальцах нижней и верхней конечности человека [Меньшикова, 2009]. В настоящее время согласно официальным данным онихомикозами страдают не менее 10-20% людей от общего количества населения Земли [Сергеев и др., 2000].
Основными возбудителями онихомикоза являются Trichophyton rubrum и Trichophyton mentagrophytes [Сергеев и др., 2008]. На их долю приходится до 90% всех грибковых инфекций ногтей. В РБ T. rubrum играет основную роль в этиологии микозов стоп и онихомикозов, уровень заболеваемости которыми остается высоким и в настоящее время [Сергеев, 2005]. Однако в последние десятилетия наметилась тенденция к расширению видового состава возбудителей онихомикозов [Carvalho et., 2014]. Среди них отмечено появление таких видов как Scopulariopsis brevicaulis, Aspergillus versicolor, A. flavus, A. niger, A. fumigatus, Fusarium solani, F. oxysporum и Scytalidium spp. [Moreno et al., 2010], Phoma herbarum, Chaetomium globosum и Microascus cinereus [Tullio et al., 2010], что свидетельствует о необходимости расширения тест-систем для оценки фунгицидного действия новых соединений.
Заболеваемость онихомикозами различна в странах с отличающимися климатическими условиями. Так, распространенность онихомикозов в Испании составила 1,7% (0,8% среди мужчин и 1,8% - у женщин), тогда как в Финляндии (практически тождественной по климату Северо-Западу России) при обследовании 800 человек в возрасте от 6 до 80 4
лет онихомикозы были выявлены в 8,4% случаев (13% мужчин и 4,3% женщин) [Медведева и др., 2012].
В России каждое десятое обращение к дерматологу связано с онихомикозом, при распространенности этого заболевания приблизительно у 5% населения. Наиболее частой причиной обращения к врачу является неудовлетворенность внешним видом ногтевых пластинок, а также снижение качества жизни [Медведева и др., 2012].
В мире нет идеального средства лечения онихомикозов, который подходил бы всем пациентам, не давал бы побочных эффектов и который обеспечивал бы полное их излечение. Это вынуждает совершенствовать существующие и создавать новые эффективные антимикотики с учетом новых возбудителей, что играет большую роль при лечении микотических инфекций у больных с сопутствующими хроническими заболеваниями. При лечении онихомикозов возникают две проблемы, связанные с длительностью применения антимикотических средств - это возникновение побочных эффектов у пациента и формирование резистентности у патогена, вызывающего данное заболевание [Pfaller et al., 2004]. Отсюда следует, что основной прогресс в создании
антимикотических средств связан с поиском соединений перспективных для применения в качестве лекарственных препаратов в медицине.
Особенность разработки средств борьбы с грибами заключается в постепенном развитии у них устойчивости к применяемым веществам, поэтому существует постоянная необходимость в поиске новых или модификации существующих антимикотических соединений.
Цель исследования. Оценить фунгицидное действие ряда новых соединений из групп у-(2,4-пентадион-3-ил) сульфидов и триазолов в условиях in vitro по отношению к микроскопическим грибам, в том числе и вызывающим поверхностные дерматомикозы.
Задачи исследования.
1. Выделить и идентифицировать микроскопические грибы из клинического материала.
2. Изучить влияние у-(2,4-пентадион-3-ил) сульфидов на развитие Bipolaris sorokiniana, Fusarium oxysporum, Rhizoctonia solani, Trichophiton terrestre, дерматомицетов Microsporum canis, T. mentagrophytes, T. rubrum, а также клинических изолятов.
3. Изучить влияние новых соединений триазолового ряда на развитие Bipolaris sorokiniana, Fusarium oxysporum, Trichophiton terrestre и клинических изолятов.
Научная новизна.
Впервые будет дана оценка фунгицидного действия новых соединений.
Поверхностные дерматомикозы (в том числе и онихомикозы) являются распространенным инфекционным заболеванием существенно ухудшающим качество жизни человека. В настоящее время существуют эффективные препараты для подавления развития дерматомицетов. Однако в связи с развитием у возбудителей микозов резистентости (в том числе и перекрестной) существует постоянная необходимость поиска новых и модификации существующих действующих веществ. Нами in vitro была изучена фунгицидная активность двух новых соединений класса у-(2,4-пентадион-3-ил) сульфидов по отношению к микроскопическим грибам, вызывающим различные заболевания. Показано, что оба соединения в концентрации 0,5% подавляли развитие Microsporum canis и T.rubrum. Полученные результаты свидетельствуют о принципиальной возможности использования этих соединений для разработки лекарственных средств для лечения дерматомикозов. Кроме того при изучении фунгицидной активности новых соединений триазолового ряда было показано, что два соединения были способны подавлять развитие Bipolaris sorokiniana (5-[1-(4-гидроксифенил) этилиден] гидразино-3-бром- 1-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол) и Chaetomium globosum (5-(5-Бром-2- гидроксифенил) метилиденгидразино-3-бром-1-(1,1-диоксотиетанил-3)-
1,2,4- триазол).
