Перечень условных обозначений (сокращений) 3
Введение 4
Глава I. Обзор литературы
1.1.Этиология заболеваний органов дыхания 6
1.2.Эпидемиология заболеваний органов дыхания 12
1.3. Род Streptococcus, семейство Streptococcaciae 14
1.4. Род Haemophilus, семейство Pasteurellaceae 16
1.5 Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 18
Глава II. Материалы и методы исследования
2.1. Объекты исследования 23
2.2. Выделение ДНК 23
2.3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 26
2.4. Электрофорез ДНК в агарозном геле 28
Глава III. Результаты исследования и их обсуждение
3.1. Детекция Streptococcus pneumoniae в клиническом материале
методом ПЦР 32
3.2. Детекция Haemophilus influenzae в клиническом материале
методом ПЦР 33
3.4. Статистическая обработка полученных результатов 35
Выводы 38
Список литературы 39
Приложение 48
Актуальность
Инфекционная патология органов дыхательной системы занимает одно из ведущих мест в структуре заболеваемости населения большинства регионов мира.Болезни органов дыхания - наиболее широко распространенная причина ухудшения здоровья у детей и взрослых, которая зависит как от организации качества медицинской помощи, так и от социальных условий жизни [Баранов А.А., 2008].
Среди неспецифических инфекций нижних дыхательных путей высокиепозиции по заболеваемости, смертности, длительности периода нетрудоспособности занимают внебольничная пневмония (ВП) и
хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ)[Чучалин
А.Г.,2010;БелевскийА.С., 2012].
Инфекции органов дыхания могут быть вызваны различными видами бактерий и вирусов, колонизирующими верхние и нижние дыхательные пути. Наряду с традиционными этиологическими агентами (Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, вирусами гриппа) большую роль приобретают редкие и труднокультивируемые микроорганизмы, такие как Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, бактерии рода Legionella [Чучалин А.Г., Синопальников А.И., 2006;Вишнякова Л.А., Никитина М.А., 2005].
К наиболее распространенным возбудителям заболеваний органов дыхания относятся Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae, что и предопределило цель нашего исследования.
Цель исследования:
Оценка частоты встречаемости Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae при различных формах патологии органов дыхательной системы человека.
Задачи исследования:
1. Сбор клинического материала у больных с различными формами легочной патологии.
2. Выделение ДНК из собранного материала
3. ПЦР исследование образцов на наличие ДНК Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae.
4. Статистическая обработка полученных результатов.
1. По данным ПЦР - анализа при исследовании мокроты, взятой у 200 больных пульмонологических отделений клинических больниц г. Уфы в зимнее-весенний период 2015-2016 года с различной патологией органов дыхания было выявлено
-ДНК Streptococcus pneumoniae в 126 образцах из них: с диагнозом ВП в 30,2%, БА - 23%, ХОБЛ-24,6%, бронхит - 22,2% случаев.
-ДНК Haemophilus influenzae в 79 образцахиз них: с диагнозом ВП в 21,5%, БА - 25,3%, ХОБЛ-24,1%, бронхит - 29,1% случаев.
2. Расчет достоверности различий частоты обнаружения видоспецифических фрагментов ДНК (ген 168рРНК) Haemophilus influenzae и Streptococcus pneumoniae при различных формах патологии органов дыхательной системы показал, что при ПЦР исследовании фрагменты ДНК Streptococcus pneumoniae достоверно чаще обнаруживались в образцах пациентов с диагнозами «внебольничная пневмония», и «бронхиальная астма», чем фрагменты ДНК Haemophilu sinfluenzae.
3. В мокроте больных, где была детектирована ДНК Haemophilus influenzae заболевание характеризовалось более тяжелым клиническим течением.
1. Авдеев, С. Н. Тяжелая внебольничная пневмония // Российский медицинский журнал. - 2005. - Т. 13, № 5. - С. 33 - 48.
2. Авдеев С. Н., Чучалин А. Г. Тяжелая внебольничная пневмония // Там же. 2001. Т. 9. № 5. С. 177-181
3. Авдеев С.Н. Аспирационная пневмония: современные подходы к диагностике и терапии / С.Н. Авдеев // Пульмонология. - 2009. - № 2. - С. 10¬16.
4. Белоцерковская Ю.Г. Роль Chlamydophila рпеншошае в бронхолегочной патологии человека /Ю.Г. Белоцерковская, А.И. Синопальников //Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. -2008. -Т. 10. -№1. -С.15-24.
5. Банержи А. Медицинская статистика понятным языком: вводный курс. - М.: Практическая медицина, 2007.
6. Белобородов В.Б. Антибактериальная терапия инвазивной пневмококковой инфекции и проблема резистентности пневмококков // Инф. и антимикр. терапия. 2006. №6. С.168-172.
7. Белевский А.С. , Глобальная стратегия диагностики, лечения ипрофилактики хронической обструктивной болезни легких (пересмотр 2011г.). //Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия,2010. Т. 12, № 3. //М.:Российское респираторноеобщество, 2012. 80 с.
8. Бисенова Н.М., Митус Н.М., Тулеубаева Э.А. и др. Мониторинг бактериального спектра мокроты больных с пневмонией и обострением ХОБЛ// Лабораторная диагностика. - 2011. - №1. - С.56-58
9. Баймиев Ан.Х., Баймиев Ал.Х., Мавзютов А.Р. Филогенетическая систематика прокариот: Методические рекомендации для студентов, обучающихся по специальности Микробиология. - Уфа. 2011. 19 с.
10. Барлетт .Д. Д. Инфекции дыхательных путей. М.: Бином. - 2000. -
192с.
11. Васильев Д.А, Щербаков А.А., Карпунина Л.В., Золотухин С.Н. Учебно-методическое пособие по методам частной бактериологии.-2004.
12. Вишнякова А. В. Бактериальный воспалительный процесс при различных острых и хронических заболеваниях бронхов и легких // Механизмы воспаления бронхов и легких и противовоспалительная терапия / Под ред. Г. Б. Федосеева. СПб., 1998. С. 67-82
13. Егоров А.М. Хламидии: Молекулярная организация клетки и некоторые особенности патогенеза инфекций /А.М. Егоров, Ю.О. Сазыкин //Антибиотики и химиотерапия. -2000. -Т. 45, №4. -С. 3-5.
14. Жестков А. В., Косарев В. В., Бабанов С. А. Хроническая обструктивная болезнь легких у жителей крупного промышленного центра: эпидемиология и факторы риска // Пульмонология. 2009. №6. С.53-57.
15. Зубков М.Н. Алгоритм терапии острых и хронических инфекций верхних и нижних дыхательных путей // РМЖ. - 2009. - т.17. - № 2.- С. 123-13... 85