Перечень условных обозначений (сокращений) 3
Введение 4
Глава I. Обзор литературы
1.1.Этиология заболеваний органов дыхания 6
1.2.Эпидемиология заболеваний органов дыхания 12
1.3. Род Streptococcus, семейство Streptococcaciae 14
1.4. Род Haemophilus, семейство Pasteurellaceae 16
1.5 Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 18
Глава II. Материалы и методы исследования
2.1. Объекты исследования 23
2.2. Выделение ДНК 23
2.3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 26
2.4. Электрофорез ДНК в агарозном геле 28
Глава III. Результаты исследования и их обсуждение
3.1. Детекция Streptococcus pneumoniae в клиническом материале
методом ПЦР 32
3.2. Детекция Haemophilus influenzae в клиническом материале
методом ПЦР 33
3.4. Статистическая обработка полученных результатов 35
Выводы 38
Список литературы 39
Приложение 48
Актуальность
Инфекционная патология органов дыхательной системы занимает одно из ведущих мест в структуре заболеваемости населения большинства регионов мира.Болезни органов дыхания - наиболее широко распространенная причина ухудшения здоровья у детей и взрослых, которая зависит как от организации качества медицинской помощи, так и от социальных условий жизни [Баранов А.А., 2008].
Среди неспецифических инфекций нижних дыхательных путей высокиепозиции по заболеваемости, смертности, длительности периода нетрудоспособности занимают внебольничная пневмония (ВП) и
хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ)[Чучалин
А.Г.,2010;БелевскийА.С., 2012].
Инфекции органов дыхания могут быть вызваны различными видами бактерий и вирусов, колонизирующими верхние и нижние дыхательные пути. Наряду с традиционными этиологическими агентами (Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, вирусами гриппа) большую роль приобретают редкие и труднокультивируемые микроорганизмы, такие как Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, бактерии рода Legionella [Чучалин А.Г., Синопальников А.И., 2006;Вишнякова Л.А., Никитина М.А., 2005].
К наиболее распространенным возбудителям заболеваний органов дыхания относятся Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae, что и предопределило цель нашего исследования.
Цель исследования:
Оценка частоты встречаемости Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae при различных формах патологии органов дыхательной системы человека.
Задачи исследования:
1. Сбор клинического материала у больных с различными формами легочной патологии.
2. Выделение ДНК из собранного материала
3. ПЦР исследование образцов на наличие ДНК Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae.
4. Статистическая обработка полученных результатов.
1. По данным ПЦР - анализа при исследовании мокроты, взятой у 200 больных пульмонологических отделений клинических больниц г. Уфы в зимнее-весенний период 2015-2016 года с различной патологией органов дыхания было выявлено
-ДНК Streptococcus pneumoniae в 126 образцах из них: с диагнозом ВП в 30,2%, БА - 23%, ХОБЛ-24,6%, бронхит - 22,2% случаев.
-ДНК Haemophilus influenzae в 79 образцахиз них: с диагнозом ВП в 21,5%, БА - 25,3%, ХОБЛ-24,1%, бронхит - 29,1% случаев.
2. Расчет достоверности различий частоты обнаружения видоспецифических фрагментов ДНК (ген 168рРНК) Haemophilus influenzae и Streptococcus pneumoniae при различных формах патологии органов дыхательной системы показал, что при ПЦР исследовании фрагменты ДНК Streptococcus pneumoniae достоверно чаще обнаруживались в образцах пациентов с диагнозами «внебольничная пневмония», и «бронхиальная астма», чем фрагменты ДНК Haemophilu sinfluenzae.
3. В мокроте больных, где была детектирована ДНК Haemophilus influenzae заболевание характеризовалось более тяжелым клиническим течением.