Аннотация 2
ВВЕДЕНИЕ 5
1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 7
1.1 Лекарственные растения 7
1.2 Основной химический состав лекарственных растений 9
1.3 Алкалоиды 13
1.4 Флавоноиды 15
1.5 Сапонины 18
1.6 Экстракция лекарственных соединений 20
1.7 Общая характеристика Родиолы розовой (Rhodiola rosea) 23
1.6 Исследование и применение родиолы розовой в медицине и
косметологии 26
2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 27
2.1 Техника безопасности 27
2.2 Реактивы и оборудование 28
2.3 Материалы и методы 29
2.4 УФ - спектроскопия 30
2.5 Исследование антирадикальной активности 32
2.6 Спектрофотометрическое определение полифенольных соединений
33
2.7 Спектрофотометрический метод определения содержания суммы
флавоноидов 35
2.8 Антибактериальная активность 36
2.9 Оценка жизнеспособности клеток 38
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 43
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 52
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 54
Поиск и исследование перспективных природных источников веществ, обладающих антирадикальной (АРА) и антиоксидантной (АОА) активностью, является весьма актуальной задачей. В последние десятилетия наблюдается повышенный интерес к изучению лечебных свойств традиционных трав и их химического состава. Травяное сырье содержит богатый комплекс биологически активных веществ, многие из которых проявляют специфическую фармакологическую активность наряду с высокой антиоксидантной активностью.
Лекарственные растения являются доступным и приемлемым с культурной точки зрения источником медицинской помощи для многих людей во всем мире. В последние годы растущая осведомленность потребителей о долгосрочной пользе для здоровья привела к растущему предпочтению косметики на основе трав во всем мире. Адаптогены успешно применяются в медицинской практике, а основным источником их производства являются лекарственные растения. Адаптогенные фармакологические свойства выражены у целого ряда лекарственных растений: женьшень настоящий, элеутерококк колючий, левзея сафлоровидная, родиола розовая и другие, которые обусловлены фенилпропаноидами, сапонинами и экдистероидами.
В структуре современного фармацевтического рынка доля препаратов на основе лекарственного растительного сырья неуклонно растет. Их широкий спектр действия объясняется многокомпонентным составом биологически активных веществ и одновременным присутствием соединений с разными свойствами. Мягкий терапевтический эффект, низкая токсичность, редкое возникновение побочных эффектов, доступность - вот некоторые преимущества растительных препаратов.
Растительные экстракты с антиоксидантными свойствами помогают защитить клетки от вредного воздействия окислительного стресса. Окислительный стресс связан с повышением уровня активных соединений кислорода и азота в организме человека, в том числе. свободный радикал. Растения содержат ценные биологически активные вещества, такие как алкалоиды, флавоноиды, дубильные вещества и эфирные масла, обладающие хорошей антиоксидантной активностью.
Цель работы: сравнительный анализ экстрактов родиолы розовой, полученных методом сверхкритической флюидной экстракции и водно - этанольной экстракции.
Основными задачами исследования для достижения поставленной цели являются:
1. Проведение литературного обзора.
2. Приготовление экстрактов родиолы розовой.
3. Исследование состава методом УФ-спектроскопии.
4. Исследование антиоксидантной активности.
5. Оценка влияния экстрактов на жизнеспособность клеток иммунной системы.
6. Оценка антибактериальной активности экстрактов.
Объекты исследования - экстракты родиолы розовой (Rhodiola rosea).
В результате выполнения научной работы были исследованы экстракты родиолы розовой, полученные методом водно-этанольной и сверхкритической флюидной экстракций.
Методом УФ спектроскопии было установлено, что экстракты родиолы розовой содержат такие соединения как: кемпферол, розин, розавин, розарин, коричный спирт, гликозиды, салидрозид, что совпадает с литературными данными.
Установлено, что экстракты родиолы розовой (Rhodiola rosea) проявляют антирадикальную активность. Наибольшей активностью обладает экстракт родиолы розовой (90,9 % по аскорбиновой кислоте), полученный водно-этанольной экстракцией при концентрации 800 мкг/мл.
Проведен анализ суммарного содержания полифенольных соединений. Установлено, что у экстракта, полученного сверхкритическим методом наибольшее содержание полифенольных соединений 641,1325 мг/мл, в то время образец, полученный водно-этанольной экстракцией, содержит 365,3069 мг/мл, соответственно.
Исследовано суммарное содержание флавоноидов. Установлено, что водно-этанольный экстракт родиолы розовой (Rhodiola rosea) по содержанию суммы флавоноидов превышает в 11,5 раз содержания в СКФ-экстракте, 81,1342 мг/мл и 7,0338 мг/мл соответственно.
Луночно-диффузионным методом было установлено, что экстракты, полученные водно-этанольной экстракцией и сверхкритической флюидной экстракцией антибактериальной активности не проявили.
Было исследовано влияние экстрактов на жизнеспособность клеток иммунной системы. Установлено, что экстракт, полученный сверхкритической флюидной экстракцией, не оказывает негативного влияния (жизнеспособность клеток составляет 75-90 % относительно контроля).
Работа была выполнена на базе НОЦ ПИШ "Агробиотек" и кафедры природных соединений, фармацевтической и медицинской химии химического факультета Томского государственного университета. Данное исследование может быть применимо в интересах биотехнологической отрасли агропромышленного комплекса при переработке растительного сырья, выделения компонентов для создания биологически активных добавок и косметических средств.
