Реферат
ВВЕДЕНИЕ 6
1 Литературный обзор 9
1.1 Основные принципы клонального микроразмножения растений 9
Е2 Факторы, влияющие на процессы регенерации и клональное
микроразмножение in vitro 14
1.2.1 Генетические и физиологические факторы 15
1.2.2 Состав питательной среды и кислотность 16
1.2.3 Физические факторы выращивания 24
1.3 Применение методов биотехнологии для микроразмножения и получения оздоровленного посадочного материала земляники крупноплодной 25
2 Материалы и методы исследований 32
2.1 Объект исследований 32
2.2 Методы исследования 33
2.2.1 Материалы и оборудование 33
2.2.2 Введение в культуру in vitro и микроразмножение 34
2.3 Исследование влияния тидиазурона на пролиферацию микропобегов
земляники крупноплодной in vitro на этапе микроразмножения 36
2.4 Статистическая обработка результатов 39
3 Результаты и обсуждения 40
3.1 Исследование влияния предкультивирования эксплантов на
индукционных средах с тидиазуроном на полиферацию микропобегов
земляники крупноплодной в культуре in vitro 40
3.2 Влияние различных типов питательных сред на рост и развитие
микропобегов земляники крупноплодной на основном этапе
микроразмножения 47
3.3 Использование кратковременной импульсной обработки тидиазуроном
для стимуляции пролиферации микропобегов земляники крупноплодной в культуре in vitro 48
Земляника крупноплодная {Fragaria х ananassa Duch.) по занимаемым площадям является одной из ведущих ягодных культур в мире. Земляника ценится за скороплодность, раннеспелость, богатый биохимический состав, питательные и лечебно-профилактические свойства плодов. Вид пластичен, может приспособиться к различным почвенно-климатическим условиям и вследствие этого землянику крупноплодную успешно выращивают в условиях Западной Сибири. В связи с расширением производства плодов земляники крупноплодной растет потребность в получении высококачественного посадочного материала. Однако длительное культивирование данного вида приводит к накоплению болезней и вредителей, которые угнетают рост и снижают урожайность культуры. В связи с этим рассада, полученная с помощью традиционного вегетативного размножения, не всегда удовлетворяет современным требованиям, предъявляемым к посадочному материалу. Главный недостаток этого способа размножения - невозможность получения оздоровленных растений, а также сравнительно низкий коэффициент размножения [1]. В настоящее время для размножения ягодных культур, в том числе и земляники крупноплодной, широко применяется клональное микроразмножение к преимуществам, которого относятся: возможность получения безвирусного посадочного материала, длительное (в течение 1-3 лет) сохранение растений в условиях in vitro, а также высокая экономическая эффективность метода. Обязательным условием клонального микроразмножения является использование материала, полностью сохраняющего генетическую стабильность на всех этапах процесса, от экспланта до растений в поле. Этим требованиям удовлетворяют апексы и пазушные почки органов стеблевого происхождения, то есть меристематические ткани. Однако морфогенетический потенциал культивируемых тканей во многом зависит от генотипа и условий культивирования. Поэтому, разработка эффективной и воспроизводимой системы регенерации растений в условиях in vitro для клонального микроразмножения сортов земляники крупноплодной, адаптированных к биотическим и абиотическим факторам Западной Сибири, является актуальным направлением.
Основным фактором, влияющим на процессы морфогенеза и интенсивность микроразмножения в культуре in vitro, являются экзогенные фитогормоны. Рядом авторов было показано, что новый синтетический аналог цитокининов - тидиазурон (ТДЗ) проявляет свойства мощного индуктора морфогенетических процессов у растений in vitro. Эффективность ТДЗ показана для ряда растительных объектов, в том числе и для видов рода Fragaria
В связи с этим нами было проведена экспериментальная работа по исследованию влияния ТДЗ на процессы индукции образования микропобегов земляники крупноплодной в культуре in vitro.
Цель работы: изучить влияние тидиазурона и различных типов питательных сред на процессы пролиферации и роста адвентивных микропобегов у земляники крупноплодной в культуре in vitro на этапе микроразмножения.
В связи с поставленной целью решались следующие задачи:
• Оценить влияние различных типов предварительной обработки эксплантов земляники крупноплодной тидиазуроном на пролиферацию микропобегов и их рост в культуре in vitro',
• Исследовать влияние различных типов питательных сред на процессы пролиферации и рост микропобегов земляники в ходе основного культивирования после предобработки тидиазуроном.
Работа выполнена в лаборатории Биотехнологии Центрального сибирского ботанического сада СО РАН с использованием оборудования ЦКП ЦСБС СО РАН в 2016 году. В лаборатории биотехнологии в культуре in vitro поддерживаются коллекции представителей рода Fragaria, включающая 15 сортов Fragaria х ananassa Duch.
Автор выражает благодарность заведующему лабораторией, д.б.н. Т.И. Новиковой, а также научному сотруднику, к.б.н. Е.В. Амброс за предоставленную возможность проведения экспериментальных работ, за помощь в проведении опытов и ценные консультации при обсуждении результатов.
