ПЕРЕЧЕНЬ ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ 3
ВВЕДЕНИЕ 5
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1 Процессы пролиферации и дифференцировки нервных клеток 7
1.2 Влияние ишемии мозга на постнатальный нейрогенез 9
1.3 Влияние флуоксетина на постнатальный нейрогенез 12
1.4 Иммуногистохимия 14
1.5 Специфические маркеры нейрогенеза 15
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 17
2.1 Объект исследования 17
2.2 Схема эксперимента 17
2.3 Моделирование тотальной ишемии головного мозга 20
2.4 Приготовление препаратов срезов головного мозга крыс 21
2.5 Протокол иммуноокрашивания 22
2.6 Статистическая обработка данных 23
3 РЕЗУЛЬТАТЫ 25
3.1 Оценка влияния ТИГМ на изменения уровня пролиферации (BrdU) и количества
новых зрелых нейронов (NeuN+BrdU) в зубчатой извилине гиппокампа 27
3.2 Оценка влияния ТИГМ на изменения уровня пролиферации (BrdU) и количества
новых зрелых нейронов (NeuN+BrdU) вне пролиферативной зоны гиппокампа 29
3.3 Оценка влияния флуоксетина на изменения уровня пролиферации (BrdU) и
количества новых зрелых нейронов (NeuN+BrdU) в зубчатой извилине гиппокампа 34
3.4 Оценка влияния флуоксетина на изменения уровня пролиферации (BrdU) и
количества новых зрелых нейронов (NeuN+BrdU) вне пролиферативной зоны гиппокампа.
36 ВЫВОДЫ 43
ЛИТЕРАТУРА 44
Вплоть до 90-х годов ХХ века во всем мире существовало стойкое убеждение, что нейрональные сети взрослого мозга статичны и неспособны к регенерации. Хотя еще в 1962 году американский нейробиолог Джозеф Альтман обнаружил, что в гиппокампе крысы происходит образование новых нейронов [10], постнатальный нейрогенез как факт был признан гораздо позже. Открытие этого процесса дало новый толчок в исследованиях заболеваний мозга.
Церебральная ишемия поражает преимущественно пожилых людей, однако в последние годы наблюдается снижение возрастного порога заболевания до 35-40 лет. Такие острые формы, как мозговой инсульт, представляют серьезную угрозу жизни больных.
По статистике Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) смерть от ишемического инсульта мозга занимает второе или третье место среди всех причин смертей в России (данные варьируются по регионам), и второе место - в мире, уступая первенство ишемической болезни сердца [1].
Последствия ишемического инсульта невозможно полностью устранить, только предупредить или облегчить при своевременном вмешательстве. Однако эффективность реабилитации после инсульта может серьезно повлиять на восстановление мозговых функций и, в конечном итоге, на возврат человека к прежней жизни, и процессы нейрогенеза могут играть здесь ключевую роль. Поэтому существует необходимость в разработке эффективных препаратов с новыми механизмами действия, способных улучшить качество жизни больных. Одним из таких механизмов является стимуляция нейрогенеза.
Наиболее вероятным и действенным может оказаться применение лекарственных средств, прямо или опосредованно влияющих на центральную нервную систему, в частности на пролиферативные зоны мозга, где нейрогенез продолжается в течение всей жизни.
Цель работы:
Изучение влияния флуоксетина на нейрогенез у крыс в гиппокампе на экспериментальной модели тотальной ишемии головного мозга.
Задачи:
1. Изучить изменения уровня пролиферации нервных клеток и количества новых зрелых нейронов у крыс в зубчатой извилине гиппокампа через 10 и через 30 дней после моделирования тотальной ишемии головного мозга.
2. Изучить изменения уровня пролиферации нервных клеток и количества новых зрелых нейронов у крыс вне пролиферативной зоны гиппокампа через 10 и через 30 дней после моделирования тотальной ишемии головного мозга.
3. Изучить влияние флуоксетина на уровень пролиферации нервных клеток и количество новых зрелых нейронов у крыс в зубчатой извилине гиппокампа через 10 и 30 дней после моделирования тотальной ишемии головного мозга.
4. Изучить влияние флуоксетина на уровень пролиферации нервных клеток и количество новых зрелых нейронов у крыс вне пролиферативной зоны гиппокампа через 10 и 30 дней после моделирования тотальной ишемии головного мозга.
1. В зубчатой извилине гиппокампа тотальная ишемия головного мозга (ТИГМ) повышает уровень пролиферации нервных клеток через 10 дней после операции, однако через 30 дней после операции уровни пролиферации и нейрогенеза снижаются.
2. Вне нейрогенной зоны уровень пролиферации через 10 дней после операции увеличен, однако через 30 дней снижается. Уровень нейрогенеза через 30 дней после операции увеличивается.
3. Введение флуоксетина на фоне ТИГМ снижает уровень пролиферации нервных клеток в зубчатой извилине гиппокампа через 10 дней после операции и усиливает репаративный нейрогенез в этой зоне через 30 дней.
4. Введение флуоксетина на фоне ТИГМ снижает общий уровень пролиферации вне пролиферативной зоны через 10 дней после операции и усиливает репаративный нейрогенез вне пролиферативной зоны.
