📄Работа №181893
Тема: АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ УРОВНЯ ФОКУСОВ у Н2АХ НА ФОРМИРОВАНИЕ РАДИАЦИОННО-ИНДУЦИРОВАННЫХ МИКРОЯДЕР В ФИБРОБЛАСТАХ ЭКСТРАЭМБРИОНАЛЬНОЙ МЕЗОДЕРМЫ ЧЕЛОВЕКА И КЛЕТКАХ ОПУХОЛЕВЫХ ЛИНИЙ
Тип работы
Бакалаврская работа
Предмет
биология
Объем:
40 листов
Год:
2016
Просмотров:
55
4600
руб.
🛒 Купить работу
Не подходит эта работа?
Закажите новую по вашим требованиям
Узнать цену на написание
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
📋 Содержание
ВВЕДЕНИЕ 3
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1 Общие принципы воздействия ионизирующего излучения на биологические
объекты 5
1.1.1 Механизмы биологического действия ионизирующего излучения 5
1.1.2 Действие больших доз ионизирующего излучения 8
1.1.3 Действие малых доз ионизирующего излучения 9
1.2 Влияние ионизирующего излучения на разные типы клеток 10
1.2.1 Фибробласты экстраэмбриональной мезодермы человека как объект
исследования воздействия ионизирующего излучения 11
1.2.2 Опухолевые клетки как объект исследования воздействия ионизирующего
излучения 12
1.3 Индивидуальная чувствительность к действию ионизирующего излучения 14
1.4 Методы регистрации цитогенетических эффектов радиации 15
1.4.1 Фокусы белков репарации двунитевых разрывов ДНК 15
1.4.2 Микроядра 16
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 18
2.1 Материал 18
2.2 Методы 18
2.2.1 Культивирование фибробластов экстраэмбриональной мезодермы человека 18
2.2.2 Культивирование опухолевых линий в прикрепленных культурах 19
2.2.3 Культивирование опухолевых линий в суспензионных культурах 20
2.2.4 Воздействие ионизирующим излучением 20
2.2.5 Фиксация клеток для анализа флуоресцентных фокусов белков репарации ДНК 21
2.2.6 Иммуноокрашивание препаратов для анализа флуоресцентных фокусов белков
репарации ДНК 21
2.2.7 Фиксация клеток для анализа уровня микроядер 23
2.2.8 Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH) 24
2.2.9 Оценка частоты микроядер 24
2.2.10 Статистическая обработка результатов 25
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 26
ВЫВОДЫ 35
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ И ЛИТЕРАТУРЫ 36
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1 Общие принципы воздействия ионизирующего излучения на биологические
объекты 5
1.1.1 Механизмы биологического действия ионизирующего излучения 5
1.1.2 Действие больших доз ионизирующего излучения 8
1.1.3 Действие малых доз ионизирующего излучения 9
1.2 Влияние ионизирующего излучения на разные типы клеток 10
1.2.1 Фибробласты экстраэмбриональной мезодермы человека как объект
исследования воздействия ионизирующего излучения 11
1.2.2 Опухолевые клетки как объект исследования воздействия ионизирующего
излучения 12
1.3 Индивидуальная чувствительность к действию ионизирующего излучения 14
1.4 Методы регистрации цитогенетических эффектов радиации 15
1.4.1 Фокусы белков репарации двунитевых разрывов ДНК 15
1.4.2 Микроядра 16
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 18
2.1 Материал 18
2.2 Методы 18
2.2.1 Культивирование фибробластов экстраэмбриональной мезодермы человека 18
2.2.2 Культивирование опухолевых линий в прикрепленных культурах 19
2.2.3 Культивирование опухолевых линий в суспензионных культурах 20
2.2.4 Воздействие ионизирующим излучением 20
2.2.5 Фиксация клеток для анализа флуоресцентных фокусов белков репарации ДНК 21
2.2.6 Иммуноокрашивание препаратов для анализа флуоресцентных фокусов белков
репарации ДНК 21
2.2.7 Фиксация клеток для анализа уровня микроядер 23
2.2.8 Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH) 24
2.2.9 Оценка частоты микроядер 24
2.2.10 Статистическая обработка результатов 25
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 26
ВЫВОДЫ 35
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ И ЛИТЕРАТУРЫ 36
📖 Введение
Действие ионизирующего излучения на биологические объекты вызывает формирование у них ряда специфичных ответных реакций. Важную роль в эффективности устранения негативных последствий действия ионизирующих излучений играют индивидуальные особенности самих биологических объектов. Известно, что индивидуальная радиочувствительность, как феномен ответа клетки на действие радиации, зависит от многих факторов, например длительности и дозы облучения, индивидуальных особенностей генома, наличия в клетке определенных продуктов клеточного метаболизма, а также скорости активации и эффективности системы репарации. В свою очередь, активация системы репарации также является одним из факторов, влияющих на формирование радиационно-индуцированного ответа, который направлен на уменьшение повреждающего действия ионизирующего излучения. Уровень радиационно-индуцированных нарушений может быть во многом обусловлен способностью биологических систем к репарации исходных повреждений.
Оценка индивидуальной радиочувствительности организма и возможность ее прогнозирования является одной из актуальных проблем радиобиологии и онкологии. Прогнозирование индивидуальной радиочувствительности может применяться при коррекции курса лучевой терапии, а также при отборе лиц для работ в условиях радиационной опасности. Развитие современной радиационной онкологии базируется не только на накоплении знаний об индивидуальной радиочувствительности пациента, но и сравнении ответов опухолевых и нормальных тканей организма на различные виды и дозы ионизирующих излучений. В настоящий момент решению проблемы совершенствования лучевой терапии опухолей посвящены многие научные исследования [24, 26].
Ранее, в лаборатории цитогенетики, НИИ медицинской генетики, были проведены исследования на лимфоцитах периферической крови работников радиохимического производства и онкологических больных с опухолями головы и шеи, а также опухолями молочной железы. В ходе работы была обнаружена обратная зависимость формирования радиационно-индуцированных микроядер от спонтанного уровня фокусов yH2AX (маркера двунитевых разрывов ДНК). Было показано, что увеличение исходного уровня фокусов yH2AX в контрольных образцах приводит к снижению уровня микроядер в культивированных лимфоцитах периферической крови тех же индивидов после облучения в условиях in vitro. Однако остается неизвестным, является ли данный феномен общим для всех типов клеток или же он специфичен только для лимфоцитов периферической крови человека. Поэтому необходимо проверить обнаруженную закономерность на других типах клеток.
Таким образом, целью настоящей работы являлся анализ влияния спонтанного уровня фокусов yH2AX на формирование радиационно-индуцированных микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий различного происхождения.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. Оценить спонтанные уровни фокусов yH2AX и микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий.
2. Оценить радиационно-индуцированные уровни фокусов yH2AX и микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы и клетках опухолевых линий.
3. Провести анализ связей между уровнями фокусов yH2AX и частотами микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий.
Работа выполнена на базе НИИ медицинской генетики в лаборатории цитогенетики под руководством кандидата биологических наук Васильева Станислава Анатольевича и кандидата биологических наук Беленко Андрея Александровича при поддержке гранта РФФИ № 14-04-31867.
Оценка индивидуальной радиочувствительности организма и возможность ее прогнозирования является одной из актуальных проблем радиобиологии и онкологии. Прогнозирование индивидуальной радиочувствительности может применяться при коррекции курса лучевой терапии, а также при отборе лиц для работ в условиях радиационной опасности. Развитие современной радиационной онкологии базируется не только на накоплении знаний об индивидуальной радиочувствительности пациента, но и сравнении ответов опухолевых и нормальных тканей организма на различные виды и дозы ионизирующих излучений. В настоящий момент решению проблемы совершенствования лучевой терапии опухолей посвящены многие научные исследования [24, 26].
Ранее, в лаборатории цитогенетики, НИИ медицинской генетики, были проведены исследования на лимфоцитах периферической крови работников радиохимического производства и онкологических больных с опухолями головы и шеи, а также опухолями молочной железы. В ходе работы была обнаружена обратная зависимость формирования радиационно-индуцированных микроядер от спонтанного уровня фокусов yH2AX (маркера двунитевых разрывов ДНК). Было показано, что увеличение исходного уровня фокусов yH2AX в контрольных образцах приводит к снижению уровня микроядер в культивированных лимфоцитах периферической крови тех же индивидов после облучения в условиях in vitro. Однако остается неизвестным, является ли данный феномен общим для всех типов клеток или же он специфичен только для лимфоцитов периферической крови человека. Поэтому необходимо проверить обнаруженную закономерность на других типах клеток.
Таким образом, целью настоящей работы являлся анализ влияния спонтанного уровня фокусов yH2AX на формирование радиационно-индуцированных микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий различного происхождения.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. Оценить спонтанные уровни фокусов yH2AX и микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий.
2. Оценить радиационно-индуцированные уровни фокусов yH2AX и микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы и клетках опухолевых линий.
3. Провести анализ связей между уровнями фокусов yH2AX и частотами микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий.
Работа выполнена на базе НИИ медицинской генетики в лаборатории цитогенетики под руководством кандидата биологических наук Васильева Станислава Анатольевича и кандидата биологических наук Беленко Андрея Александровича при поддержке гранта РФФИ № 14-04-31867.
✅ Заключение
1. Обнаружена статистически значимая положительная корреляция между спонтанными и радиационно-индуцированными уровнями фокусов yH2AX и центромеро-негативных микроядер в фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека.
2. Статистически значимой корреляции между спонтанными и радиационно- индуцированными уровнями фокусов yH2AX и центромеро-негативных микроядер в опухолевых линиях не выявлено.
3. В фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий, в отличие от лимфоцитов периферической крови, обратной корреляции частоты центромеро-негативных микроядер от спонтанного уровня фокусов yH2AX не выявлено.
4. В фибробластах экстраэмбриональной мезодермы обнаружена значимая положительная корреляция частоты центромеро-позитивных микроядер со спонтанным уровнем фокусов yH2AX.
2. Статистически значимой корреляции между спонтанными и радиационно- индуцированными уровнями фокусов yH2AX и центромеро-негативных микроядер в опухолевых линиях не выявлено.
3. В фибробластах экстраэмбриональной мезодермы человека и клетках опухолевых линий, в отличие от лимфоцитов периферической крови, обратной корреляции частоты центромеро-негативных микроядер от спонтанного уровня фокусов yH2AX не выявлено.
4. В фибробластах экстраэмбриональной мезодермы обнаружена значимая положительная корреляция частоты центромеро-позитивных микроядер со спонтанным уровнем фокусов yH2AX.
ИЛИ
Поиск аналога
📕 Список литературы
🖼 Скриншоты
🛒 Оформить заказ
⚡ Работу высылаем в течении 5 минут после оплаты.