Введение 3
Глава 1. Аналитический обзор литературных источников 6
1.1. Фолликулогенез и оогенез в яичниках 6
1.2. Классификация стадий развития фолликула 8
1.2.1. Этапы фолликулогенеза 10
1.2.2. Строение первичных и вторичных фолликулов 11
1.2.3. Строение третичных фолликулов 14
1.3. АМГ как маркер состояния овариального резерва 16
1.3.1. Овариальный резерв и его значение 16
1.3.2. Роль АМГ в женском и мужском организме 18
1.3.3. Молекулярно-биологические характеристики АМГ 19
1.3.4. Изменение уровня АМГ с возрастом женщины 22
1.3.5. Роль АМГ в определении овариального резерва 25
1.4. АМГ и синдром поликистозных яичников (СПКЯ) 30
1.5. Причины понижения или повышения уровня АМГ 33
Глава 2. Материалы и методы исследования 37
Глава 3. Результаты исследования 44
3.1. Оценка качества ооцита 44
Выводы 51
Список использованных источников
Актуальность исследования. Сниженный овариальный резерв у женщин репродуктивного возраста является одной из причин женского бесплодия и соответственно снижения рождаемости. Научно-практический поиск путей её повышения является актуальной и важнейшей проблемой в области современной репродуктивной биологии и медицины. Успешность её решения могла бы решить хотя бы часть актуальных и востребованных временем и обществом задач повышения рождаемости в нашей стране.
Многие современные достижения в сфере развития вспомогательных репродуктивных технологий направлены на активизацию функций яичников, как желез внешней секреции, у женщин репродуктивного возраста по пути повышения овариального резерва у женщин с низким репродуктивным потенциалом. Методика стимуляции суперовуляции с последующей возможностью селекционирования эмбрионов с целью выбора из них генетически и физически полноценных, позволяет повысить частоту оплодотворения и наступления беременности с рождением детей у женщин, которые до этого были лишены возможности родить ребенка в силу врожденных или приобретенных нарушений в области репродуктивной системы. Применение данной технологии изначально было направлено на решение медико-социальных проблемы - снижения процента бесплодных браков, существенно снижающих суммарный коэффициент рождаемости и доли повторных рождений, то есть возможности рождения более одного ребенка.
Ситуация усугубляется также за счет увеличивающегося количества пациенток старшего репродуктивного возраста. Данные обстоятельства приводят к снижению процента наступления беременности и количества родов у этой категории женщин, а также обусловливают низкую эффективность программ ЭКО. Основными причинами увеличения количества пациенток со сниженным овариальным резервом являются:
1. Социально-экономические (позднее формирование браков и отсрочка планирования рождения детей). Количество женщин старшего репродуктивного возраста (старше 35 лет), обращающихся в центры ЭКО, достигает почти 40%; а по данным РАРЧ за 2012-2018 гг. процент пациенток, проходящих лечение методом экстракорпорального оплодотворения 35-ти лет и старше, увеличился с 33,1% до 43,3%.
2. Медицинские (преждевременное истощение яичников, связанное с хромосомными, генетическими, аутоиммунными и другими причинами, оперативные вмешательства на органах малого таза, химиолучевая и другая гонадотоксичная терапия, эндометриоз и др.), включают в данную группу женщин молодого возраста.
Объектом выпускной квалификационной работы являются женщины репродуктивного возраста.
Предмет исследования - репродуктивные гормоны, овариальный резерв женщин репродуктивного возраста, стимуляция суперовуляции, технология ЭКО.
Цель выпускной квалификационной работы - изучить роль стимуляции суперовуляции у женщин репродуктивного возраста с низким овариальным резервом как современной технологии повышения эффективности ЭКО.
Исходя из цели работы, можно выделить следующие задачи:
- изучить роль прогностических критериев овариального резерва
яичников гормонов-маркеров (фолликулостимулирующего, лютеинизирующего, Антимюллерова гормонов и тестостерона);
- рассмотреть связь маркеров овариального резерва с процессом снижения андрогенсекретирующей функции яичников;
- сравнить влияние уровня АМГ у женщин с различными гинекологическими заболеваниями на процесс формирования количества ооцитов I порядка, извлекаемых при пункции из яичника.
Работа выполнена на базе Центра репродуктивного здоровья «За рождение», находящегося по адресу: г. Белгород, ул. Губкина, д. 44.
В работе были использованы следующие методы исследования:
1. По изучению развития и функционирования яичников.
2. По изучению строения первичных, вторичных и третичных фолликулов.
3. Метод определения Антимюллерова гормона в сыворотке крови женщин репродуктивного возраста.
4. Метод стимуляции суперовуляции с применением гормональных препаратов.
5. Методика получения ооцит-кумулюсных комплексов из фолликулярной жидкости при трансвагинальной пункции.
6. Метод оценки качества ооцитов.
7. Метод экстракорпорального оплодотворения.
Выпускная квалификационная работа изложена на 57 страницах. Она состоит из введения, трех основных глав, списка использованных источников, который насчитывает 71 наименование и выводов. В работе используются таблицы и рисунки.
1. Овариальный резерв женщины определяет функциональное состояние её репродуктивной системы, но с возрастом его потенциал снижается и для реализации репродуктивной функции женщины необходимо применять медицинские технологии стимуляции суперовуляции.
2. Концентрация в плазме крови АМГ, как основного маркера овариального резерва, превышала у женщин норму в 3 раза, проявляясь в пределах от 0,26 до 10,1 Нг/мл.
3. У женщин в процессе стимуляции оогенеза средний уровень концентрации ФСГ проявлялся в пределах верхних границ нормы, обеспечивая процесс созревания фолликулов в яичниках.
4. Концентрации ЛГ, эстрадиола и тестостерона способствовали созреванию у женщин полноценных фолликул.
5. Успешность получения после овуляции и процесса осеменения из антральных фолликулов ооцитов II порядка составляет 82,2%.
1. Адамян Л. В., Курило Л. Ф., Арсланян К. Н., Шуляк И. Ю. Фолликулогенез при некоторых формах эндометриоза // Проблемы репродукции. 2009. №1. C. 78-85.
2. Бебия З. Н., Орлов В. М. Антимюллеровый фактор // Журнал акушерства и женских болезней. 1999. № 2. С. 66-70.
3. Бебия З. Н., Орлов В. М., Гаджиева Т. С. Новый взгляд на патогенез синдрома поликистозных яичников // Новые подходы к решению проблем женского здоровья. СПб.: Изд-во СПБМАПО, 2000. С 11-18.
4. Бесплодный брак. Современные подходы к диагностике и лечению: руководство / под ред. Г. Т. Сухих, Т. А. Назаренко. 2-е изд., испр. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 784 с.
5. Бесплодный брак: версии и конраверсии / под ред. В. Е. Радзинского. М.: ГЕОТАР-Медиа, 2018. 305 с.
6. Боярский К. Ю Фолликулогенез и современная овариальная стимуляция // Проблемы Репродукции. 2002. Т. 8, № 3. С. 43-49.
7. Боярский К. Ю. Молекулярные основы формирования фетального яичника и получение гамет из стволовых клеток // Проблемы репродукции. 2004. № 5. - C. 15-21.
8. Боярский К. Ю. Роль показателей овариального резерва при
лечении бесплодия методом ЭКО-ПЭ // Лечение женского и мужского бесплодия (вспомогательные репродуктивные технологии) / под ред. В. И. Кулакова, Б. В. Леонова, Л. Н. Кузьмичева. М.: Медицинское
информационное агентство, 2005. С. 53-60.
9. Боярский К. Ю., Гайдуков С. Н., Чинчаладзе А. С. Факторы, определяющие овариальный резерв // Журнал акушерства и женских болезней. 2009. № 58 (2). С. 65-71.
10. Буренкова Н. Б., Комличенко Э. В., Иванов А. В. Проблема выбора тактики лечения женщин со сниженным овариальным резервом // Репродуктивная медицина. 2014. № 3-4. С. 28-33.
11. Вестник РГМУ. Периодическое медицинское издание. М.: ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, 2013. Специальный выпуск № 2. 208 с.
12. Виноградова Л. В., Мишиева Н. Г., Сорвачева М. В., Абубакиров А. Н. Влияние преждевременной лютеинизации фолликулов на исходы программ ВРТ в циклах с антагонистами гонадотропин-рилизинг гормона // Акушерство и гинекология. 2013. № 3. С. 21-25.
13. Гармашева Н. Л., Константинова Н. Н. Патофизиологические основы охраны внутриутробного развития человека. Л.: Медицина, 1985. 158 с.
14. Гюльмамедова И. Д., Доценко О. С. Антимюллеров гормон как прогностический маркер конролированной овариальной стимуляции. 4-е изд., перераб. и доп. М.: ГЕОТАР-Медиа, 2017. 145 с.
15. Дедов И. И., Мельниченко Г. А. Синдром поликистозных яичников: Руководство для врачей. М.: МИА, 2007. 361 с.
16. Довгань А. А. Особенности клинической характеристики женщин с репродуктивными потерями в анамнезе // Всеукраинский научно¬практический журнал «Здоровье женщины». 2014. № 2 (88). С. 127-128.
17. Довгань А. А. Роль медико-социальных и психологических факторов в отягощенном репродуктивном анамнезе // Всеукраинский научно-практический журнал «Здоровье женщины». 2016. № 8 (114). С. 98.
18. Дыбан А. П., Баранов В. С. Оогенез млекопитающих //
Современные проблемы оогенеза. М.: Наука, 1977. С. 200-233.
19. Захарова Н. Н., Дворянский С. А. Синдром поликистозных
яичников // Вятский медицинский вестник. 2010. № 2. C. 3-8.
20. Иванов И. И., Попова-Петросян Е. В., Довгань А. А. Изменение овариального резерва при эндокринном бесплодии // Таврический медико-биологический вестник. 2017. № 2. С. 46-50.
21. Коган И. Ю., Гзгзян А. М., Лесик Е. А. Протоколы стимуляции яичников в циклах ЭКО: руководство для врачей. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2017. 128 с.
22. Крстич Е. В., Краснопольская К. В., Кабанова Д. И. Новые подходы к повышению эффективности ЭКО у женщин старшего репродуктивного возраста // Акушерство и гинекология. 2010. № 2. С. 48-53.
23. Кулаков В. И. Лечение женского и мужского бесплодия. М.: Медицинское информационное агентство, 2005. 592 с.
24. Курило Л. Ф. Динамика преобразования хромосом в профазе мейоза в оогенезе человека // Цитология. 1980. Т. 22, № 1. С. 154-160.
25. Мамедова Н. Р., Назаренко Т. А., Монахова И. В. Препараты, содержащие лютеинизирующий гормон, в программах ВРТ // Проблемы репродукции. 2011. № 3. С. 50-55.
26. Меркулова А. И., Ниаури Д. А., Гзгзян А. М. и др. Повышенный уровень прогестерона в день введения триггера овуляции как предиктор неудачи имплантации в цикле ЭКО. 2014. № 8 (96). С. 24-30.
27. Милованов А. П. Патология системы мать-плацента-плод. М.: Медицина, 1999. 445 с.
28. Мотовилова Н. О., Коган И. Ю., Тотолян А. А. Секреция колониестимулирующих факторов в яичниках у больных с бесплодием в циклах ЭКО // Журнал акушерства и женских болезней. 2012. Вып. 3. С. 35¬40.
29. Назаренко Т. А., Мишиева Н. Г., Фанченко Н. Д. Роль антимюллерова гормона в оценке овариального резерва // Проблемы репродукции. 2005. №. С. 5-10.
30. Овариальный резерв и фертильность: сложности XXI века // Рациональный подход к сохранению репродуктивного резерва как залог
фертильности и осознанного деторождения. Информационное письмо / под ред. В. Е. Радзинского. М.: StatusPraesens, 2015. 24 с.
31. Пайкачева Ю.М. Профилактика и лечение невынашивания беременности у женщин после ЭКО. СПб., 2000. 23 с.
32. Позднякова А. А., Жахур Н. А., Ганичкина М. Б., Марченко Л. А. Новое в лечении бесплодия при преждевременной недостаточности яичников // Акушерство и гинекология. 2015. № 7. С. 26-32.
33. Попова-Петросян Е. В. Изменение гормонального фона у женщин с идиопатическим бесплодием в разных возрастных группах // Актуальные проблемы медицины в России и за рубежом: Сборник научных трудов по итогам III международной научно-практической конференции. 2017. С. 9-12.
34. Попова-Петросян Е. В. Перспективы восстановления фертильности женщин с эндометриозом // Актуальные вопросы современной медицины: Сборник научных трудов по итогам международной научно-практической конференции. 2017. С. 27-29.
35. Попова-Петросян Е. В., Довгань А. А. Изменение овариального резерва в зависимости от возраста // Информационные технологии в медицине и фармакологии: Сборник научных трудов по итогам международной научно-практической конференции. 2017. С. 7-9.
36. Репродуктивная медицина // Научно-практический журнал
Казахстанской Ассоциации репродуктивной медицины. 2013. № 2 (15). 28 с.
37. Савельева Е. М., Перминова С. Г., Демура Т. А., Стрельченко Д. А. Влияние поддержки лютеиновой фазы агонистом гонадотропин-рилизинг гормона на рецептивность эндометрия и исходы программы экстракорпорального оплодотворения // Гинекология. 2016. № 3. С. 48-53.
38. Тотчиев Г. Ф., Котиков Н. П., Семятов С. Д., Токтар Л. Р. Менопауза. Современные аспекты прогнозирования // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. 2012. № 5. С. 494-499.
39. Филиппова Е. С., Козаченко И. Ф., Быков А. Г., Бобров М. Ю., Адамян Л. В. Современный взгляд на овариальный резерв у женщин
репродуктивного возраста с эндометриоидными кистами яичников // Проблемы репродукции. 2017. № 23 (2). С. 72-80.
40. Шамилова Н. Н. Клинико-прогностическое значение молекулярно-биологических маркеров при преждевременной недостаточности яичников: дисс. ...канд. мед. наук. М., 2009. 202 с.
41. Эдлер К., Дэйл Б. Экстракорпоральное оплодотворение. Пер. с англ. М.: МЕДпресс-информ, 2008. 211 с.
42. Alarcon V. B., Marikawa Y. Spatial aignment of the muse blastocyst ais aross the frst ceavage pane is caused by mechanical constraint rather than developmental bias among blastomeres // Molecular Reproduction and Development. 2008. V. 75. P. 1143-1153.
43. Anti-mullerian hormone protein expression is reduced during the initial stages of follicle development in human polycystic ovaries / Stubbs S. A. [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2005. Vol. 90. P. 5536-5543.
44. Anti-Mullerianhormone-based approachto controlled ovarian stimulation for assisted conception / Nelson S. M. [et al.] // Hum. Reprod. 2009. Vol. 24. P. 867-87.
45. Artus J, Hadjantonakis A. K. Generation of chimeras by aggregation of embryonic stem cells with diploid or tetraploid mouse embryos // Methods Mol Biol. 2011. V. 693. P. 37-56.
46. Ashkin A. Forces of a single-beam gradient laser trap on a dielectric sphere in the ray optics regime // Biophysical Journal. 1992. V. 61. P. 569-582.
47. Ashkin A. Optical trapping and manipulation of neutral particles using lasers // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1997. V. 94. P. 4853-4860.
48. Ashkin A., Dziedzic J. M. Optical trapping and manipulation of viruses and bacteria // Science. 1987. V. 235. P. 1517-1520.
49. Basal level of anti Mullerian hormone is associated with oocyte quality in stimulated cycles / Ebner T. [et al.] // Hum. Reprod. 2006. Vol. 21. P. 2022¬2026.
50. Bider D, Livshits A, Yonish M, Yemini Z, Mashiach S, Dor J. Assisted hatching by zona drilling of human embryos in women of advanced age // Hum Reprod. 1997. V. 12. P. 317-320.
51. Boada M., Carrera M., De La Iglesia C., Sandalinas M., Barri P. N., Veiga A. Successful use of a laser for human embryo biopsy in preimplantation genetic diagnosis: report of two cases // J Assist Reprod Genet. 1998. V. 15. P. 302-307.
52. Buican T. N., Smyth M. J., Crissman H. A., Salzman G. C., Stewart C. C., Martin J. C. Automated single-cell manipulation and sorting by light trapping. // Appl Opt. 1987. V. 26, № 24. P. 5311-5316.
53. Carlson B. M. Human embryology and developmental biology. Fouth edition. Mosby Inc. 2009.
54. Chan S. A., Lin S. W., Yu K. J., Liu T. Y., Fuh M. R. Quantitative analysis of isoflavone aglycones in human serum by solid phase extraction and liquid chromatography-tandem mass spectrometry // Talanta. 2006. V. 69, № 4. P. 952-956.
55. Chen S. U., Chang C. Y., Lu C. C., Hsieh F. J., Ho H. N., Yang Y.S. Microtubular spindle dynamics and chromosome complements from somatic cell nuclei haploidization in mature mouse oocytes and developmental potential of the derived embryos // Hum Reprod. 2004. V. 19, № 5. P. 1181-1188.
56. Daniel J. C. Jr., Takahashi K. Selective laser destruction of rabbit blastomeres and continued cleavage of survivors in vitro // Exp Cell Res. 1965. V. 39. P. 475-482.
57. De Vos A., Van Steirteghem A. Aspects of biopsy procedures prior to preimplantation genetic diagnosis // Prenatal diagnosis. 2001. V. 21. P. 767-780.
58. Dholakia K., MacDonald M. P., Zemanek P., Cizmar T. Cellular and colloidal separation using optical forces // Methods Cell Biol. 2007. V. 82. P. 467- 495.
59. Dholakia K., Reece P. Optical micromanipulation takes hold // Nano Today. 2006. V. 1. P. 18-27.
60. Dokras A., Sargent I. L, Ross C., Gardner R. L., Barlow D. H. Trophectoderm biopsy in human blastocysts // Hum Reprod. 1990. V. 5. P. 821 - 825.
61. Ehrlicher A., Betz T., Stuhrmann B., Koch D., Milner V., Raizen M. G., Kas J. Guiding neuronal growth with light // Proc Natl Acad Sci USA. 2002. V. 99. № 25. P. 16024-16028.
62. Endocrine features of menstrual cyclesin middle and late reproductive age and the menopausal transition classified according to the Staging of Reproductive Aging Workshop (STRAW) staging system / Hale G. E. [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2007. Vol. 92, № 8. P. 3060-3067.
63. Enger J., Goksor M., Ramser K., Hagberg P., Hanstorp D. Optical tweezers applied to a microfluidic system // Lab Chip. 2004. V.4. № 3. P. 196¬200.
64. Evaluation of anti-Mullerian hormone as a test for the prediction of ovarian reserve / Kwee J. [et al.] // Fertil. Steril. 2008. Vol. 90, № 3. P. 737-743.
65. Inhibin B and anti-Mullerian hormone: markers of ovarianresponse in IVF/ICSI patients? / Muttukrishna S. [et al.] // BJOG. 2004. Vol. 111. P. 1248¬1253.
66. Serum anti-Mullerian hormone dynamics during controlled ovarian hyperstimulation / Fanchin R. [et al.] // Hum. Reprod. 2003. Vol. 18, № 2. P. 328-332.
67. Serum anti-Mullerian hormone levels: a novel measure of ovarian reserve / van Rooij I. A. [et al.] // Hum. Reprod. 2002. Vol. 17. P. 3065-3071.
68. Serum antimullerian hormone/mullerian-inhibiting substance appears
to be a more discriminatory marker of assisted reproductive technology outcome than follicle-stimulating hormone, inhibin B, or estradiol / Hazout A. [et al. // Fertil. Steril. 2004. Vol. 82. P. 1323-1329.
69. Tal R., Seifer D. B. Ovarian reserve testing: a user’s guide. Am. J. Obstet. Gynecol. 2017. 217 (2). Р. 129-40.
70. Undetectable serum anti-Mullerian hormone levels and occurrence of ongoing pregnancy / Fraisse T. [et al.] // Fertil. Steril. 2008. Vol. 89, № 3. P. 723.
71. Wallace W. H., Kelsey T. W. Human ovarian reserve from conception to the menopause. PLoS One. 2010. № 5 (1). Р. 8772.