ВВЕДЕНИЕ 5
1.ЛИТЕРАТУРНЫ Й ОБЗОР 8
1.1 Врожденный иммунитет и воспаление 8
1.2 Происхождение макрофагов 9
1.3 Классификация макрофагов 11
1.4 Поляризация макрофагов 12
1.5 Различия в метаболизме М1 и М2 макрофагов 13
1.6 Клеточно-молекулярная основа повреждения миокарда в ответ
на острую ишемию 14
1.7 Моноциты/макрофаги в постинфарктной репарации миокарда 16
1.8 Скавенджер-рецепторы 19
1.9 Скавенджер-рецептор стабилин-1 29
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 31
2.1 Общая характеристика пациентов 31
2.2 Материалы исследования 31
2.3 Методы исследования 32
2.3.1 Непрямой метод иммуногистохимического исследования 34
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 40
ВЫВОДЫ 45
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 49
В последние годы широкое распространение в кардиологии получили исследования, направленные на изучение роли иммунной системы. Большое количество работ, посвященных иммунопатогенезу различных форм сердечнососудистых заболеваний, позволили накопить большой пласт знаний. Полученные данные свидетельствуют о том, что иммунная система и сердечнососудистые заболевания имеют сложные механизмы взаимодействия на клеточном, рецепторном и медиаторном уровне .
Заболевания сердечно-сосудистой системы остаются одной из самых распространенных причин смертности во всем мире. В 2015 году в России, по официальным данным, 55,3% случаев смерти приходилось на сердечно
сосудистые заболевания, из которых больше половины были обусловлены ишемической болезнью сердца. При этом лидирующую позицию в структуре смертности занимает такая форма ишемической болезни сердца, как острый инфаркт миокарда. Известно,что вследствие инфаркта миокарда происходят морфологические, структурныеи функциональные изменения сердца, которые могут приводить к серьезным осложнениям. Одним из таковых осложнений является постинфарктное ремоделирование сердца и развивающаяся сердечная недостаточность.
Успехи медикаментозных и инвазивных стратегий лечения позволили существенно снизить летальность при инфаркте миокарда. Тем не менее, по данным как зарубежных исследований, так и работ, проведенных на базе НИИ кардиологии (Томск), у 30% пациентов, перенесших крупноочаговый инфаркт миокарда, отмечается развитие неблагоприятного ремоделирования сердца и прогрессирующей сердечной недостаточности, несмотря на выполнение всех необходимых лечебных мероприятий.
Широкая распространенность постинфарктной сердечной
недостаточности привела к необходимости изучения новых концепций патогенеза данного синдрома. Одним из актуальных направлений стало изучение процессов воспаления как клеточно-молекулярной основы постинфарктного ремоделирования сердца. В связи с этим, особый научный интерес вызывали клетки иммунной системы - макрофаги - как в здоровом организме, так и при различной патологии.
Макрофаги подразделяются на две разные субпопуляции: классически активированные М1 макрофаги и альтернативно активированные М2 макрофаги. Первыми были открыты М1 макрофаги, принимающие участие в процессах инициации воспаления. В дальнейшем был открыты М2 макрофаги, играющие важную роль в процессах регенерации, адаптации, подавления воспалительной реакции.
М2 макрофаги, демонстрирующие противовоспалительный фенотип, экспрессируют на своей поверхности характерные маркеры, такие как маннозный рецептор CD206, скавенджер-рецепторы CD163 и стабилин-1. Стабилин-1 является одним из новых и интересных маркеров М2 макрофагов. Впервые скавенджер-рецептор стабилин-1 был обнаружен на поверхности синусоидальных клеток в селезенке человека. В результате дальнейших экспериментов было выявлено, что стабилин-1 экспрессируются на поверхности тканевых макрофагов при хронических воспалительных процессах и туморогенезе.
В течение последних десяти лет активно изучалась роль стабилина-1 в патогенезе злокачественных новообразований. Экспериментальные
исследования на мышах показали, что данный маркер экспрессировался на начальных этапах прогрессирования глиомы. Затем, по мере прогрессирования заболевания, его экспрессия снижалась. Следовательно, изменение выраженности экспрессии стабилина-1 демонстрирует его диагностические возможности в оценке опухолевого роста. В другом эксперименте было показано, что моноциты периферической крови с выраженной экспрессией стабилина-1 могут подавлять провоспалительные реакции in vivo. Это позволило предположить возможность его использования как новой иммуносупрессивной молекулы.
Таким образом, макрофаги являются ключевыми участниками воспалительной реакции. Они выполняют про- и противовоспалительные функции, фагоцитируют погибшие клетки, участвуют в регенерации ткани, сложных иммунных и воспалительных реакциях, отвечают за поддержание гомеостаза ткани, своевременный ответ на вторжение патогенных агентов. Однако, несмотря на накопленные данные о жизнедеятельности макрофагов, фенотипические аспекты и функциональная роль макрофагов в процессе постинфарктного ремоделирования сердца все еще остаются малоизвестными. В связи с этим актуальным является изучение сердечных макрофагов в процессах постинфарктного воспаления и заживления, протекающего в сердечной мышце.
Цель работы: провести количественный анализ сердечных стабилин-1 позитивных макрофагов у пациентов с фатальным исходом инфаркта миокарда при помощи иммуногистохимического исследования.
Задачи исследования:
1.Оценить возможность применения иммуногистохимии в оценке постинфарктной макрофагальной инфильтрации у больных инфарктом миокарда.
Представить количественную характеристику стабилин-1 позитивных макрофагов в миокарде пациентов с летальным исходом инфаркта миокарда.
В результате работы показана возможность применения иммуногистохимического исследования в оценке постинфарктной макрофагальной инфильтрации у больных инфарктом миокарда.
Выявлено отсутствие стабилин-1 позитивных макрофагов или же их единичное присутствие в миокарде пациентов, умерших в ранние сроки инфаркта. Выявлено увеличение количества стабилин -1 позитивных макрофагов на поздних сроках инфаркта, соответствующих фазе регенерации миокарда.
Новизна исследования заключается в проведении работы по фенотипированию сердечных макрофагов у больных инфарктом миокарда на клиническом материале.
