Введение 3
Глава I. Литературный обзор 5
1.1.Общая характеристика хорионического гонадотропина человека. 5
1.2 Методы идентификации хорионического гонадотропина человека 9
1.2.1 Иммунохроматографическая реакция для определения хорионического гонадотропина 9
1.2.2 Метод иммуноферментного анализа для определения хорионического гонадотропина 10
1.3 Методы выделения хорионического гонадотропина человека 13
Глава II. Объект, методы выделения и исследования 15
2.1 Характеристика объекта исследования 15
2.2 Пробоподготовка 17
2.3 Методика выделения хорионического гонадотропина из биоматериала. 18
2.4 Методика проведения иммуноферментного анализа для определения ХГЧ 19
Глава III. Результаты исследований и их обсуждение 24
Заключение 29
Список литературы 30
В современном мире репродуктивную медицину сложно представить без применения в ней средств, помогающих в совершении экстракорпорального оплодотворения. Этот метод делает возможным зачатие и рождении здоровых детей. Одним из препаратов применяемых в этом процессе – это хорионический гонадотропин человека.
Хорионический гонадотропин человека в настоящее время является одним из важнейших гормонов в передовой репродуктивной медицине. Выделение этого биологически активного соединения, контроль активности и концентрации в организме человека является флагманской задачей . Гонадотропин – эффективный гормон, используемым в борьбе против бесплодия и применяемым в процессе экстракорпорального оплодотворения на этапе стимуляции суперовуляции у женщин. Поэтому разработка методов выделения этого компонента из биологического материала и создание методик контроля активности гормона в организме человека и на этапах получения необходима для улучшения технологического процесса и повышения качества продукции.
Цели исследования:
1. Разработка метода выделения хорионического гонадотропина человека из биологического материала (моча беременных женщин)
2. Контроль полученного гонадотропина методом иммуноферментного анализа.
Достижение целей работы предполагает необходимость решения следующих задач:
1. Обзор литературы: изучение существующих научных исследований и публикаций, касающихся характеристики и методов выделения и определения хорионического гонадотропина из биологического материала.
2. Создание методики выделения хорионического гонадотропина человека из биологического материала.
3. Определение активности хорионического гонадотропина в исходном биологическом сырье; в пробах, отобранных на технологических этапах синтеза и в полученном полупродукте.
4. Создание технологической схемы и составление материального баланса по полученному материалу.
5. Обобщение полученных результатов, формулирование выводов, относящихся к исследуемой активности хорионического гонадотропина.
Исследование проводится на стыке таких направлений естественно-научного познания, как аналитическая химия, органическая химия, биохимия, биотехнология. Теоретический анализ специальной научной литературы по заявленной теме путем анализа и систематизации информации зарубежных и российских печатных и электронных источников . Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, базирующийся на реакции «антиген-антитело», который позволяет идентифицировать вещества белковой природы.
В заключении исследования методов контроля и выделения хорионического гонадотропина можно сделать следующие выводы:
1. В процессе анализа литературных данных установлено, что метод иммуноферментного анализа является наиболее оптимальным для количественного определения активности хорионического гонадотропина в биологическом материале (урине) беременных женщин.
2. Разработана и описана методика пробоподготовки продукта для дальнейшего анализа методом иммуноферментного анализа.
3. Разработана методика извлечения хорионического гонадотропина человека из мочи.
4. Апробирована и оптимизирована методика иммуноферментного анализа для определения ХГЧ, которая позволяет проводить количественное определение β-субъединиц в пробах производственного цикла и исходном сырье (моче).
