Тема: Оптимизация состава многокомпонентного иммобилизованного реагента
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
📋 Содержание
ВВЕДЕНИЕ 5
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1. Ферментативные биотесты и способы конструирования ферментативных реагентов 7
1.1. Использование ферментов в методах биодиагностики 7
1.2. Биолюминесцентные ферментативные тесты 11
1.3. Стабилизация ферментов 14
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 20
2.1. Реактивы и приборы 20
2.2. Метод получения многокомпонентного иммобилизованного реагента .... 21
2.3. Методика измерения активности многокомпонентного
иммобилизованного реагента 22
2.4. Исследование чувствительности многокомпонентного
иммобилизованного реагента к действию токсикантов 22
2.5. Статистическая обработка результатов экспериментов 23
3.1. Оценка активности многокомпонентного реагента в зависимости от
состава дисков и режима высушивания Ошибка! Закладка не определена.
3.1.1. Оценка активности многокомпонентного реагента в зависимости от количества ферментов в дисках и режима высушивания ..Ошибка! Закладка не определена.
3.1.2. Оценка активности многокомпонентного реагента в зависимости от
концентрации NADH Ошибка! Закладка не определена.
3.1.3. Оценка активности многокомпонентного иммобилизованного реагента в
зависимости от концентрации тетрадеканаля Ошибка! Закладка не
определена.
3.2. Оценка чувствительности многокомпонентного иммобилизованного реагента в зависимости от состава дисков ... Ошибка! Закладка не определена.
3.2.1. Оценка чувствительности многокомпонентного иммобилизованного реагента в зависимости от количества фермента Ошибка! Закладка не
определена.
3.2.2. Оценка чувствительности многокомпонентного иммобилизованного
реагента в зависимости от концентрации NADH Ошибка! Закладка не
определена.
3.2.3. Оценка чувствительности многокомпонентного иммобилизованного реагента в зависимости от концентрации тетрадеканаля ..Ошибка! Закладка не определена.
3.3. Анализ кинетических характеристик многокомпонентного
иммобилизованного реагента Ошибка! Закладка не определена.
3.4. Определение активности многокомпонентного иммобилизованного
реагента в зависимости от времени хранения Ошибка! Закладка не
определена.
3.5. Оценка активности многокомпонентного иммобилизованного реагента в зависимости от количества FMN в реакционной смеси ....Ошибка! Закладка не определена.
3.6. Оценка вариабельности многокомпонентных иммобилизованных реагентов внутри партии в зависимости от состава диска Ошибка! Закладка не определена.
ВЫВОДЫ 25
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 26
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 27
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 28
📖 Введение
Актуальным остаётся поиск быстрых методов оценки состояния окружающей среды. Таким методом является анализ токсичности образцов на основе биолюминесцентной биферментной системы светящихся бактерий ПАП(Р)Н:РМЫ-оксидоредуктаза и люцифераза (R + L), катализирующей последовательность реакций, в которых энергия химических связей трансформируется в световую. Для более широкого применения ферментов светящихся бактерий в методах экологического биотестирования (оценки качества воды, воздуха и почвы) необходимо получение на их основе стабильных реагентов, при сохранении чувствительности к действию токсических веществ на уровне ПДК.
На данный момент известно несколько способов стабилизации ферментов, из которых наиболее оптимальным является их иммобилизация. Несомненно, иммобилизация ферментов позволяет получать стабильные при хранении и использовании реагенты, удобные для проведения биолюминесцентного анализа. Разработаны коммерческие препараты, представляющие собой биферментную систему R + L, иммобилизованную совместно с субстратами в крахмальный гель, но их чувствительность к действию разным классам токсических веществ значительно ниже в сравнении с растворимыми ферментами. Ещё одной нерешённой проблемой является проблема сохранения активности реагента при хранении.
Цель работы состояла в оптимизации состава многокомпонентного иммобилизованного реагента для достижения его высокой чувствительности к действию токсических веществ и стабильности при длительном хранении и использовании...
✅ Заключение
Иммобилизованный реагент оптимизированного состава отличается наибольшей чувствительностью к действию CuSO4, соответствуя чувствительности растворимой системе R+L. Данный реагент позволяет определять концентрацию медного купороса на уровне ПДК. Чувствительность реагента к глифосату не соответствует ПДК пестицида и в 2 раза превышает значения IC50 растворимой R+L системы.
Установлено, что положение планшетов при высушивании реагентов не влияют на конечную активность дисков.
Оптимизация состава позволила увеличить срок хранения многокомпонентного иммобилизованного реагента, что способствует расширению применения биолюминесцентного иммобилизованного реагента в качестве тест-системы для экологического мониторинга.



