ВВЕДЕНИЕ 4
1 Обзор литературы 6
1.1 Рак лёгких 6
1.2 Канцерогенез 9
1.3 Квантовые точки 11
1.4 Гибриды квантовых точек и биологических молекул 14
1.5 Аптамеры 16
1.6 АФК 23
2 Материалы и методы 28
2.1 Материалы и оборудование 28
2.2 Конъюгация квантовых точек с праймерами 29
2.3 Первичная оценка связывания препарата с послеоперационным
материалом больного раком легкого 30
2.4 Определение острой токсичности спрея in vivo в эксперименте с
мышами 32
2.5 Определение АФК методом микроскопии 33
3 Результаты исследования и обсуждения 35
Заключение 36
Список использованных источников 37
Рак легких (РЛ) является ведущей причиной смерти от рака в наше время [1]: смертность составляет 17,6%. 5-летняя выживаемость при раке легкого составляет не более 10%. Выявление РЛ в России на I-II стадиях заболевания составляет 27,3%, а на III-IV стадиях - 70,3%. В то же время 5-летня выживаемость больных после радикального лечения на первой стадии заболевания около 70%, а на IV этапе - менее 5% [2]. По данным разных авторов 10%-30% пациентов с впервые выявленным диагнозом рака лёгкого подвергаются радикальному хирургическому лечению, что связано с его поздним выявлением [3].
Радикальное хирургическое вмешательство является самым эффективным методом лечения рака, лёгкого [4], в связи с чем интраоперационная визуализация патологических очагов в ткани легкого является актуальной задачей, поскольку позволяет уменьшить риск рецидива и прогрессирования онкологического заболевания [2]. Флуоресцентная диагностика повышает эффективность операции за счёт увеличения качества наблюдения опухолевого очага [4].
В последнее время в качестве флуорофоров стали использовать флуоресцентные проводниковые нанокристалы - квантовые точки (КТ), обладающие рядом преимуществ, отсутствующим у традиционно используемых в биологических исследованиях контрастирующих агентов [5].
Цель - модифицировать препарат для интраоперационного окрашивания рака легкого на основе аптамеров и квантовых точек и оценить его токсичность.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. Разработать способы конъюгации квантовых точек с аптамерами, специфичными раку легкого.
2. Оценить способность конъюгатов квантовых точек с аптамерами визуализировать опухолевые клетки в послеопераицонной ткани рака легкого.
3. Оценить токсичность конъюгатов квантовых точек с аптамерами, специфичными раку легкого.
Работа выполнена в Лаборатории биомолекулярных и медицинских технологий Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого.
Был разработан препарат для интраоперационного окрашивания рака лёгкого. Препарат на основе аптамеров с квантовыми точками позволяет окрашивать раковые очаги в поражённых тканях лёгких, тем самым визуализируя малозаметные раковые клетки без хирургического микроскопа, используя лишь ультрафиолетовый фонарь с подходящими фильтрами.
Отсутствие токсичности позволяет препарату быть кандидатом для применения на пациентах.
