Введение 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Общая характеристика нестройных лекарственных средств 6
1.2 Этапы доклинических исследований лекарственных препаратов 11
1.3 Особенности пептидов как лекарственных препаратов 15
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 21
2.1 Выделение пептидных фракций из трутневого расплода 22
2.1.1 Ультрафильтрация и ионообменная хроматография для получения
пептидных фракций с молекулярной массой 5-10 кДа 22
2.1.2 Определение содержания пептидов и углеводов
спектрофотометрическим методом 24
2.2 Физиологические тесты для оценки ноотропной активности. Тест
«Открытое поле» 25
2.3 Тест «Приподнятый крестообразный лабиринт» 26
2.4 Статистическая обработка данных 28
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 29
3.1 Очистка от углеводов и разделение белков и пептидов методом
ионообменной хроматографии 30
3.2 Результаты распознавания новых объектов животными в тесте «Открытое
поле» 33
3.3 Результаты теста «Приподнятый крестообразный лабиринт» 37
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 41
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 43
Актуальность темы. Усиление воздействия неблагоприятных социальных и биологических факторов приводит к увеличению доли непсихотических органических депрессивных расстройств среди населения трудоспособного возраста. При этом органическая депрессивная симптоматика сопровождается нейрометаболитическими нарушениями в центральной нервной системе.
Было доказано, что стресс для человеческого организма не безвреден. Стресс - это фактор риска большинства сердечно-сосудистых заболеваний, оказывающий негативное воздействие на нервную систему, в последствие чего у человека ухудшается память, снижается работоспособность, искажается восприятие и ухудшаются процессы мышления. В связи с этим необходимо заниматься поиском и разработкой путей профилактики и коррекции отрицательного воздействия стресса на нервную систему.
На современном российском фармацевтическом рынке существует широкий выбор лекарственных препаратов. В области нейрофармакологии центральное место занимают ноотропные препараты.
Нестройные препараты - это особая группа нейропсихотропных препаратов, специфический эффект которых определяется способностью улучшать процессы обучения и памяти, когнитивные, интеллектуальные функции как у здоровых лиц, так и нарушенные функции в ходе различных заболеваний.
Ноотропы широко применяются при старении организма; психоорганических синдромах нейродегенеративного или сосудистого генеза (сенильная деменция, в том числе болезнь Альцгеймера); при острых и хронических наршениях мозгового кровообращения, в том числе при инсультах и энцефалопатиях; после черепно-мозговых травм, нейроинфекций; при остром и хроническом утомлении, синдроме
хронической усталости, при стрессе, болевых синдромах; при заболеваниях, вызванных длительным приемом алкоголя и наркотиков, терапией анксиолитиками, антипсихотическими средствами и другими депрессантами ЦНС; при астеническом, астено-депрессивном и депрессивном синдромах, невротических расстройствах, вегето-сосудистой дистонии, головокружении; для профилактики укачивания.
В педиатрии ноотропные препараты популярны при цереброастенических, энцефалопатических нарушениях, расстройствах памяти, при задержке психического и речевого развития, умственной отсталости, при последствиях перинатального поражения ЦНС, синдроме дефицита внимания с гиперактивностью. Ноотропы используются здоровыми людьми, когда в силу определенных ситуаций необходимо повысить умственную работоспособность, концентрацию внимания, улучшить продуктивность работы, способность к планированию и принятию решений, увеличить скорость извлечения памятного следа и объем памяти...
В ходе выполнения бакалаврской работы было изучено наличие ноотропного эффекта пептидных фракций трутневого расплода с молекулярной массой 5-10 кДа, при введении лабораторным животным интраназально и внутрибрюшинно в течение 21 дня.
Исходя из полученных результатов, можно сделать следующие выводы:
1. Установлено, что метод выделения пептидов из трутневого расплода с использованием комбинации методов тангенциальной ультрафильтрации, ионообменной хроматографии с использованием DEAE-целлюлозы, гель-фильтрации на сефадексе G-25 позволяет получить очищенные пептидные фракции с молекулярной массой 5-10 кДа. Данные методы обладают возможностью автоматизации и масштабирования, широко доступны.
2. Обнаружено, что внутрибрюшинное и интраназальное введение пептидных фракций с молекулярной массой 5-10 кДа в течение 21 дня приводит к изменению поведения животных в тесте «Открытое поле с объектами», а именно к достоверному увеличению: вертикальной двигательной активности и выходов в центр арены по сравнению с контролем.
3. Обнаружено, что интраназальное введение пептидных фракций с молекулярной массой 5-10 кДа в течение 21 дня приводит к изменению поведения животных в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт», а именно к достоверному увеличению: количества стоек в рукавах лабиринта и горизонтальной двигательной активности по сравнению с контролем. Внутрибрюшинное введение пептидных фракций с молекулярной массой 5-10 кДа в течение 21 дня приводит к изменению поведения животных в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт», а именно к увеличению груминга.
4. Выявлено, что изменения данных показателей поведения в тестах «Открытое поле с объектами» и «Приподнятый крестообразный лабиринт» свидетельствуют о наличии ноотропного эффекта пептидных фракций трутневого расплода при интраназальном введении. Внутрибрюшинное введение не приводит к выраженному ноотропному эффекту.
Дальнейшие исследования и эксперименты могут быть направлены на подтверждение и детальное изучение полученных результатов, а также на разработку практических рекомендаций возможного применения пептидных фракций трутневого расплода с молекулярной массой 5-10 кДа в медицине или других сферах.
