ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Полимеры, используемые в трансплантологии 6
1.1.1 Синтетические полимеры 7
1.1.2 Природные полимеры 9
1.2 Требования, предъявляемые к имплантируемым материалам 12
1.3 Морфология внеклеточных коллагеновых матриксов 14
1.3.1 Матрикс на основе перикарда 16
1.3.2 Матрикс на основе децеллюляризованной дермы коров и лошадей 18
1.3.3 Матрикс на основе подслизистой стенки мочевого пузыря 18
1.3.4 Матрикс на основе подслизистой тонкой кишки свиньи 19
1.4 Этапы получения внеклеточного коллагенового матрикса 20
1.4.1 Децеллюляризация 20
1.4.2 Стабилизация сшивающими агентами 24
1.4.3 Лиофилизация 26
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 28
2.1Подготовка материала исследования 28
2.2 Методы гистологического контроля 30
2.2.1 Окраска гематоксилин-эозином 30
2.2.2 Окраска по Ван-Гизону-Вейгерту 31
2.3 Подкожная имплантация экспериментальных образцов 32
2.4 Методы определения биохимических показателей крови 33
2.5 Методы статистической обработки данных 34
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 35
3.1 Результаты получения экспериментальных образцов разными способами децеллюляризации 35
3.1.1 Результаты ферментативной обработки 35
3.1.2 Результаты щелочной обработки 38
3.1.3 Результаты солевой обработки 40
3.1.4 Результаты детергентной обработки 41
3.2 Гистологическое исследование образцов 43
3.3 Изучение влияния подкожной имплантации образцов внеклеточного коллагенового матрикса на основе подслизистой тонкой кишки свиньи на биохимические параметры сыворотки крови крыс 47
3.3.1 Влияние подкожной имплантации внеклеточного коллагенового
матрикса на активность аланинаминотрансферазы в сыворотке крови крыс 47
3.3.2 Влияние подкожной имплантации внеклеточного коллагенового
матрикса на активность аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови крыс 49
3.3.3 Влияние подкожной имплантации внеклеточного коллагенового матрикса на активность глутамилтрансферазы в сыворотке крови крыс . 50
3.3.4 Влияние подкожной имплантации внеклеточного коллагенового матрикса на активность щелочной фосфотазы в сыворотке крови крыс .. 51
ВЫВОДЫ 53
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 54
Главной целью современной трансплантологии как части клинической медицины является повышение доступности качественной медицинской помощи методом трансплантации органов в соответствии с реальной потребностью населения и донорским ресурсом. Её развитие трудно представить без углубленного решения научных проблем, таких как: биологические и клинические аспекты органной, тканевой и клеточной трансплантации, преодоление тканевой несовместимости, отторжения трансплантата, создание моделей
искусственного сердца, искусственных и биогибридных органов и систем и др [11].
Донорство органов в трансплантологии имеет ряд существенных ограничений, поэтому разработка альтернативных методов восстановления повреждений органов и тканей является актуальной и необходимой. Создание искусственных органов даёт возможность отказаться от трансплантации большей части органов доноров и может улучшить качество жизни и выживаемость пациентов. Децеллюляризация тканей и органов — перспективная технология, которая легла в основу создания матриксных материалов для тканевой инженерии и конструктивно-регенеративной медицины. С помощью данной методики стало возможным получение внеклеточного матрикса, который можно в дальнейшем использовать для создания различных трансплантатов [60,61].
Выделяют три вида биоматериала по его происхождению:
• Под аутотрансплантантом понимают пересадку органа в пределах одного
организма. Данный вид пересадки органов и тканей относится к хирургии и не является предметом изучения трансплантологии.
• Под аллотрансплантантом понимают пересадку между организмами одного
и того же вида (от одного человека другому), имеющими разный генотип. Это наиболее часто используемый вид трансплантации.
• Под ксенотрансплантантом понимают пересадку органа или ткани от представителя одного вида представителю другого вида, например от животного человеку [7].
Однако, несмотря на успехи в его применении, остается немало серьёзных проблем, требующих своего решения. К таким задачам относятся развитие иммунного ответа, токсическое воздействие, способность к биодеградации с образованием безопасных для организма продуктов при использовании алло- и ксеногенных материалов и др. Для предотвращения возникновения иммунных реакций биологические скаффолды должны быть децеллюляризированы, но при этом сохранять исходную структуру ткани и внеклеточного матрикса.
Целью настоящей работы являлась оценка эффективности различных способов децеллюляризации биоматериала...
1. Были подобраны режимы децеллюляризации биоматериала при помощи растворов фермента, щелочи, соли и детергента, в результате которых получен внеклеточный коллагеновый матрикс на основе подслизистой тонкой кишки свиньи.
2. Гистологическое исследование показало, что во всех экспериментальных образцах наличия клеток не обнаружено, волокна коллагена и эластина сохранны.
3. Отмечено отсутствие повышения активности ферментов:
аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы,
глутамилтрансферазы, щелочной фосфатазы в сыворотке крови контрольной и опытной групп по сравнению с интактной на четвёртой неделе после проведения операции.
