ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Продукты пчеловодства 6
1.1.1 Мёд, как самый распространённый из продуктов пчеловодства 6
1.1.2 Маточное молочко состав и его свойства 8
1.1.3 Трутневый расплод и его состав 9
1.2 Антибактериальные компоненты продуктов пчеловодства 11
1.2.1 Антибактериальные свойства мёда 11
1.2.2 Антибактериальная активность трутневого расплода 13
1.2.3 Антибактериальные вещества продуктов пчеловодств 13
1.2.4 Бактерицидные пептиды насекомых 15
1.3 Вещества пептидной природы с антибактериальным эффектом 17
1.3.1 Апидаецины, свойства и биологическая активность 17
1.3.2 Абаецин, как основной антибактериальный пептид медоносных пчел
(Apis Mellifera) 19
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 24
2.1 Объекты исследований 24
2.2 Методы исследований 24
2.2.1 Тангенциальная ультрафильтрация 24
2.2.2 Гель-фильтрация 25
2.2.3 Определение концентрации белков и пептидов 26
2.2.4 Проведение оценки антибактериального эффекта продуктов
пчеловодства 27
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 32
3.1 Калибровка белковых молекул по БСА 32
3.2 Результаты гель-фильтрации 32
3.3 Изучение антибактериального эффекта белково-пептидных фракций 36
3.3.1 Получение и характеристика опытных культур 36
3.3.2 Оценка антибактериальной активности диско-диффузионным
методом 39
3.3.3 Оценка антибактериальной активности методом определения
минимальной подавляющей концентрации 43
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 47
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 49
Актуальность представленной темы заключается в том, что собственно почти все люди не задумываются о том, насколько уникальны продукты пчеловодства, и какую огромную роль они играют в жизни человека.
Одной из наиглавнейших проблем интересующих людей на сегодняшнее время, считается профилактика и лечение вирусных и простудных заболеваний. Главными виновниками, которых считаются различные вирусы и бактерии.
Давно известно, что мёд, прополис, маточное молочко и другие продукты пчеловодства обладают антибактериальным эффектом, благодаря наличию в их составе белков и пептидов. Эти антибактериальные белки и пептиды ещё не достаточно хорошо изучены учёными. А, как известно, вещества пептидной природы обладают высокой биологической активностью, оказывают огромное влияние на различные физиологические функции организма.
Поэтому мёд, прополис, маточное молочко, трутневый расплод и другие продукты пчеловодства, могут выступать в качестве сырья для получения новых антибактериальных препаратов, которые могут применяться в медицине.
Целью данной работы является провести оценку антибактериального эффекта продуктов пчеловодства.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. Выделить пептиды и белки маточного молочка, используя методы ультрафильтрации и гель-фильтрации.
2. Выделить пептиды трутневого расплода, используя методы ультрафильтрации и гель-фильтрации.
3. Провести оценку антибактериального эффекта пептидов и белков маточного молочка и трутневого расплода на таких культурах, как сенная палочка, клостридий и азотобактер с помощью метода диффузии в агар, диско-диффузионного метода и метода серийных разведений в жидкой питательной среде.
Дипломная работа написана на 53 листах, содержит 5 таблицы, 11 рисунков и список литературы на русском и английском языках из 48 источников.
Продукты пчеловодства такие, как мёд, маточное молочко, трутневый расплод по своей природе являются многокомпонентными уникальными продуктами, обладающими целебными свойствами. В этих продуктах содержаться огромное количество витаминов, ферментов, микро- и макроэлементов, сахаров, азотосодержащих соединений, органических кислот, пептидов и белков.
Эти продукты пчеловодства обладают антибактериальным эффектом, который обусловлен содержанием в них таких веществ, как перекиси водорода, метилглиоксаля, а также антибактериальных пептидов и белков.
В ходе исследования была изучена антибактериальная активность пептидов и белков таких продуктов пчеловодства, как маточное молочко и трутневый расплод. Исследования проводились с использованием методов определения минимальной подавляющей концентрации и диско¬диффузионным методом.
В итоги исследования можно сделать следующие выводы:
1. Маточное молочко и трутневый расплод содержат ряд пептидов и белков различного химического состава, которые можно выделить и разделить с использованием методов ультрафильтрации и гель-фильтраии.
2. Полученные фракции белков маточного молочка, пептидов маточного молочка и трутневого расплода не показали достоверной антибактериальной активности против использованных культур бактерий рода Azotobacter, Clostridiumи вида Bacillus subtilis с использованием диско¬диффузионного метода.
3. Отсутствие антибактериальной активности изученных фракций пептидов может быть следствием недостаточной концентрации пептидов и белков в изучаемых образцах, т. к. некоторые образцы показали сомнительные результаты по наличию зон задержки роста (4 мм).
4. В ходе исследования не удалось получить подтверждения наличия антибактериального эффекта пептидных и белковых фракций маточного молочка и трутневого расплода методом МПК на тестируемой культуре Bacillus subtilis.
