Тип работы:
Предмет:
Язык работы:


ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ШТАММОВ AZOTOBACTER В РИЗОСФЕРНОЙ МИКРОФЛОРЕ

Работа №157967

Тип работы

Магистерская диссертация

Предмет

биология

Объем работы63
Год сдачи2024
Стоимость4830 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
26
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1 .Структура ризосферы 5
1.2 Механизмы положительного влияния ризобактерий на растения 8
1.2.1 Прямая стимуляция роста растений 9
1.2.2. Опосредованная стимуляция роста растений II
1.3 Физиолого-биохимическая активность штаммов Azotobacter в
ризосферной микрофлоре 13
1.4 Химическая природа, синтез и транспорт фитогормонов 17
1.5 Физиологическое действие фитогормонов 19
1.6 Механизм воздействия фитогормонов 20
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 22
2.1 Объекты исследования 22
2.2 Методы исследования 23
2.2.1 Отбор почвенных образцов 23
2.2.2 Подготовка почв для анализа 23
2.2.3 Посев почвы 23
2.2.4 Приготовление среды Эшби 24
2.2.5 Выделение чистых культур Azotobacter 25
2.2.6 Микроскопическое исследование образца 27
2.2.7 Приготовление рабочих растворов фитогормонов 27
2.2.7.1 Препараты фитогормонов 27
2.2.7.2 Приготовление раствора чистой культуры Azotoba 29
2.2.8 Проращивание пшеницы 30
2.2.9 Определение ауксин- и гиббереллиноподобной активности
азотобактера на тест-растениях 30
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 32
3.1 Активность роста Azotobacterна почвенных образцах 32
3.2 Микроскопическое исследование образца 40
3.3 Ауксин- и гиббереллиноподобная активность азотобактера на тест-
растениях 41
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 56
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 58


Микроорганизмы играют значительную роль в биогеохимических процессах циркуляции элементов и веществ в экосистемах, будь то водные или наземные. Эти процессы прямо или косвенно влияют на химический состав атмосферы Земли. Следовательно, сбалансированная активность природных микробных сообществ является ключевым условием для поддержания жизни на планете.
В последние десятилетия загрязнение почвы различными химическими веществами в значительной степени возросло из-за интенсификации промышленного и сельскохозяйственного производства. Низкие концентрации многих из этих веществ способны подавлять жизненную активность микроорганизмов и, тем самым, нарушать биогеохимический баланс - гомеостаз, который имеется в природе. Деградация почвенных экосистем и уменьшение разнообразия микроорганизмов, а также уменьшение их численности и физиологической активности - это наблюдаемые последствия такого загрязнения, также нарушается структура биогеоценозов.
Радикальный переход от глобальной "химизации" к повсеместной "биологизации" в стратегии сельскохозяйственного производства является выходом из этой ситуации. Например, возвращение биопрепаратов естественной почвенной микрофлоры в сельскохозяйственную практику играет ключевую роль. В связи с этим принимает важность физиологически значимая роль микроорганизмов, особенно в плане регулирования циркуляции биогенных элементов, таких как азот, которые выполняют функции деструктивного процесса фиксации молекулярного азота в биологический цикл. Они также играют роль в формировании окружающей среды путем фиксации азота и выработки различных биологически активных веществ.
Целью нашей работы является исследование физиолого¬биохимической активности штаммов Azotobacter,в ризосферной микрофлоре, то есть в почвенной зоне, окружающей корни растений.
Актуальность исследования заключается в том, что этот вид исследований может способствовать лучшему пониманию роли Azotobacterв процессе биологической фиксации азота и его влияния на растения. Результаты исследования могут быть использованы для повышения эффективности использования азота в сельском хозяйстве и улучшения устойчивости растений к стрессовым условиям. Также, выделение новых почвенных штаммов Azotobacterможет способствовать улучшению плодородия почвы и стимулированию роста растений. Кроме того, Azotobacterприменяется в медицине и пищевой промышленности.
В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
1. Изучить литературу по теме работы.
2. Собрать образцы почв с различных участков;
3. Оценить обеспеченность и активность Azotobacterв почвенных образцах.
4. Получить чистые культуры Azotobacter.
5. Изучить механизм влияния Azotobacterна растения
6. Проанализировать ауксин- и гиббереллиноподобную активность азотобактера на тест-растениях в сравнении с чистыми препаратами фитогормонов.
7. Сделать выводы о фитогормональной активности Azotobacter


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!


В ходе выполнения нашей работы были изучены физиологе - биохимические свойства штаммов Azotobacterпо которым можно сделать следующие выводы, исходя из поставленных задач:
1. Для изучения активности Azotobacterбыли взяты образцы почв с разных точек и с разной глубины.
2. Количество чистой культуры Azotobacter , выращенных на отобранных образцах почвы (с наибольшим содержанием Azotobacter)не зависит от глубины взятия образца.
3. Штаммы Azotobacterризосферной микрофлоры растений обладают фитогормональной активностью.
4. Полученные нами в ходе работы чистые культуры Azotobacterпоказали положительное влияние на рост и развитие растений, ускоряя рост проростка и корня, тем самым увеличивая урожайность растений.
5. Фитогормональная активность выделенной нами чистой культуры Azotobacterоказалась выше, чем у коммерческого препарата “Азотник” и препарата ауксина использованного в концентрации 0,001 мг/л
6. Чистая культура Azotobacterвлияет на рост и развитие растений пшеницы сорта Клавдия.
Во многих литературных источниках показано влияние бактерий Azotobacterна рост и развитие растений в различных условиях. Вместе с тем, не всегда описан механизм влияния, а также есть сведения о незначительном влиянии азотобактера. Наши исследования подтверждают, что в ответ на обработку Azotobacter,у растений изменяется рост, длина корня, биомасса, скорость роста и другие показатели.
Выделенные нами чистые культуры Azotobacterпоказали большее влияние на рост и развитие растений, чем коммерческий препарат “Азотник”.
Таким образом, полученные нами чистые культуры Azotobacterможно применять в сельском хозяйстве для получения биоудобрений для восстановления и повышения плодородия почвы и повышения урожайности растений.



1. Беззубенкова О.Е., Юхлимова М.Н., Нестерова Н И. Микрофлора ризосферы и ризопланы и её влияние на растительный организм И Естественные и технические науки. 2012. Т. 4. С. 99-102.
2. Бухарин О.В., Лобакова Е.С., Немцева Н.В., Черкасов С.В. Ассоциативный симбиоз. Екатеринбург: УрО РАН, 2006. 264 с.
3. Добровольская Т.Г. Структура бактериальных сообществ почв. Москва: ИКЦ «Академкнига» 2002. 282 с.
4. Звягинцев Д.Г., Бабьева И.Л., Зенова Г.М. Биология почв. Москва: Изд- во Моск, ун-та, 2005. 445 с.
5. Звягинцев Д.Г., Добровольская Т.Г., Лысак Л.В. Растения как центры формирования бактериальных сообществ почв // Общая биология. 1993. №2. С. 183-199.
6. Иванов В.П. Корневые выделения и их значение в жизни фитоценозов. Москва: Наука, 1973. 193 с.
7. Каменева С.В., Муромец Е.М. Генетический контроль процессов взаимодействия бактерий с растениями в ассоциациях // Генетика. 1999. Т. 35. №11. С. 1480-1494.
8. Ланкина Е.П., Хижняк С.В., Кулижский С П. Перспективы использования смешанных культур психрофильных и психротолерантных бактерий в биологической защите растений от болезней//Вести. КрасГАУ. 2013. №. 4. С. 101-105.
9. Матюнина В.Д. и др. «Влияние обработки семян разными дозами гетероауксина на ростовые параметры двух сортов фасоли»// Экобиотех, 2023. Том 6, № 3 С. 175-184.
10. Мишке Н.В. Микробные фитогормоны в растениеводстве. Рига: Зинатне, 1988. 151 с.
11. Моргун В В., Коць С.Я., Кириченко Е.В. Ростстимулирующие ризобактерии и их практическое применение // Физиология и биохимия культурных растений. 2009. Т. 41, № 3. С. 187-207.
12. Умаров М.М. Ассоциативная азотфиксация. Москва: Изд-во Моск, ун¬та, 1986. 133 с.
13. Умаров М.М., Кураков А.В., Степанов А.Л. Микробиологическая трансформация азота в почве. Москва: ГЕОС, 2007. 137 с.
14. Шапошников А.И., Белимов А.А., Кравченко Л.В., Виванко Д.М. Взаимодействие ризосферных бактерий с растениями: механизмы образования и факторы эффективности ассоциативных симбиозов (обзор) И Сельскохозяйственная биология. 2011. № 3. С. 16-22.
15. Afzal М., Khan Q., Sessitsch A. Endophytic bacteria: Prospects and applications for the phytoremediation of organic pollutants // Chemosphere.
2014. V. 117. P. 232-242.
16. Asfar, A., Bargaz, A., Yakubi, K., Hilali, A., Bennis, I., Zerual, Yu. et al. (2021). Nitrogen-fixing azotobacter species as potential soil biological enhancers of crop nutrition and yield stability. The front. Microbiol. 12. doi: 10.3389/fmicb,2021.628379 cipl6, 14
17. Babu N., Jogaiah S., Ito S., Nagaraj K., Tran L. Improvement of growth, fruit weight and early blight disease protection of tomato plants by rhizosphere bacteria is correlated with their beneficial traits and induced biosynthesis of antioxidant peroxidase and polyphenol oxidase // Plant Sci.
2015. V. 231. P. 62-73.
18. Balandreau J. Microbiology of the association // Can. J. Microbiol. 1983. V. 29, No 8. P. 851-859.
19. Beneduzi A., Ambrosini A., Passaglia L.M.P. Plant-growth-promoting rhizobacteria (PGPR): Their potential as antagonists and biocontrol agents // Genet. Mol. Biol. 2012. V. 35, Suppl. 4. P. 1044-1051.
20. Beijerinck M.W. Uber oligonitrophile Mikroben // Zentralblatt fur Bakteriologie, Parasitenkunde und Infektionskrankheiten. 1901. Abteilung II, Vol 7. P. 561-582.
21. Berg G., Rybakova D., Grube M., Koberl M. The plant microbiome explored: implications for experimental botany // J. Exp. Bot. 2016. V. 67, No 4. P. 995-1002.
22. Bulgarelli D., Schlaeppi K., Spaepen S., Ver Loren van Themaat E., Schulze-Lefert P. Structure and function of bacterial microbiota of plants // Annu. Rev. Plant Biol. 2013. V. 64. P. 807-838.
23. Chapparo J.M., Badri D.V., Bakker M.G., Sugiyama A., Manter D.K., Vivanco J.M. Root exudation of phytochemicals in Arabidopsis follows specific patterns that are developmentally programmed and correlate with soil microbial functions // PloS One. 2013. V. 8, No 8. P. 55731.
24. Chowdhury S.P., Hartmann A., Gao X-W., Borriss R. Biocontrol mechanism by rootassociated Bacillus amyloliquefaciens FZB42 - a review //Front. Microbiol. 2015. V. 6. Art. 780, P. 1-11.
25. Couillerot O.5 Ramirez-Trujillo A., Walker V., von Felten A., Jansa J., Maurhofer M., Defago G., Prigent-Combaret C., Comte G., Caballero- Mellado J., Moenne-Loccoz Y. Comparison of prominent Azospirillum strains in Azospirillum-Pseudomonas-Glomus consortia for promotion of maize growth // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2013. V. 9, No 7. P. 4639- 4649.
26. Das H.K. - Achievements in Applied Microbiology, 2019. Elsevier
27. Description of Azotobacter chroococcum subsp. isscasi subsp. nov. isolated from paddy soil and establishment of Azotobacter chroococcum subsp. chroococcum subsp. nov. / H. Jin, H. Wang, Y. Zhang, T. Hu, Z. Lin, B. Liu, J. Ma, X. Wang, Q. Liu, X. Lin., Z. Xie // International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. 2020. Vol. 70. P. 2124-2131.
28. Djordjevic M.A., Mond-Radzman N.A., Imin N. Small-peptide signals that control root nodule number, development, and symbiosis // J. Exp Bot. 2015. V. 66, No 17. P. 5171-5181.
29. Dobereiner J. Dinitrogen fixation in rhizosphere and phyllospere associations // Inorganic Plant Nutrition. Berlin etc.: Springer-Verlag, 1983. P. 330-350.
30. Dobereiner J. Nitrogen-fixing bacteria in the rhizosphere // Quispel A. (ed.) The biology of nitrogen fixation. Amsterdam: North-Holland Pub. Co, 1974. P. 86-120.
31. Duca D., Lory J., Patten C.L., Rose D., Glick B.R. Indole-3-acetic acid in plant-microbe interactions // Antonie Van Leeuwenhoek. 2014. V. 106, No l.P. 85-125.
32. Fahad S., Hussain S., Bano A., Saud S., Hassan S., Shan D., Khan F.A., Khan F., Chen Y., Wu C., Tabassum M.A., Chun M.X., Afzal M., Jan A., Jan M.T., Huang J. Potential role of phytohormones and plant growth¬promoting rhizobacteria in abiotic stresses: consequences for changing environment // Environ. Sci. Pollut. Res. Int. 2015. V. 22, No 7. P. 4907- 4921.
33. Haas D., Defago G. Biological control of soil-borne pathogens by fluorescent pseudomonas // Nat. Rev. Microbiol. 2005. V. 3, No 4. - P. 307- 319.
34. Isobe K., Ohte N. Ecological perspectives on microbes involved in N- cycling//Microbes Environ. 2014. V. 29, No 1. P. 4-16.
35. Jensen H. L. The Azotobacteriaceae // Bacteriological Reviews. 1954. Vol.
18, №4. 195-214
36. Klopper J.W., Lifshitz R., Zablotowicz R.M. Free-living bacterial inocula for enhancing crop productivity // Trends Biotechnol. 1989. V. 7, No 2. P. 39-13.
37. Koul V., Adholeya A., Kochar M. Sphere of influence of indole acid and nitric oxide in bacteria // J. Basic Microbiol. 2015. V. 55, No 5. P. 543- 553.
38. Layne J. S. Natural Factors Involved in the Induction of Cyst Formation in Azotobacter // Journal of Bacteriology. 1964. Vol. 87, № 3. P. 684— 689.
39. Lynch J.M. The rhizosphere - form and function H Appl. Soil Ecol. 1994. V. l,No3. P. 193-198.
40. Maksimov I.V., Abizgil’dina R.R., Pusenkova L.I. Plant growth promoting rhizobacteria as alternative to chemical crop protectiors from pathogens // Appl. Biochem. Microbiol. 2011. V. 47, No 4. P. 333-345.
41. McNear Jr. D.H. The rhizosphere - roots, soil and everything in between // Nat. Educ. Knowl. 2013. V. 4, No 3. P. 1.
42. Nascimento F.X., Rossi M.J., Soares C.R.F.S., McConkey B.J., Glick B.R. New insights into 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) deaminase phylogeny, evolution and ecological significance // PLoS One. 2014. V. 9. No 6. Art. e99168, P. 1-17.
43. Panhwar Q.A., Naher U.A., Jusop S., Othman R., Latif Md.A., Ismail M.R. Biochemical and molecular characterization of potential phosphate- solubilizing bacteria in acid sulfate soil and their beneficial effects on rice growth// PLoSOne. 2014. V. 9, No 10. Art. e97241.
44. Rajkumar M., Vara Prasad M.N., Freitas H., Ae N. Biotechnological applications of serpentine soil bacteria for phytoremediation of trace metals //Crit. Rev. Biotechnol. 2009. V. 29, No 2. P. 120-130.
45. Robson R. L. and Postgate J.R. (1980). Oxygen and hydrogen in biological nitrogen fixation. The annual edition of Microbiology. 34, 183-207.
46. Robson, R. L., Eadie, R. R., Richardson, T. H., Miller, R. V., Hawkins, M. and Postgate, J. R. (1986). An alternative nitrogenase of Azotobacter chroococcum is a vanadium enzyme. Nature 322, 388-390. doi: 10.1038/3223 88a0
47. Rodriguez H., Fraga R. (1999). Bacteria that solubilize phosphates and their role in stimulating plant growth. Biotechnology. Adv. 17, 319-339. doi: 10.1016/80734-9750(99)00014-2
48. Schlaeppi K., Bulgarelli D. The plant microbiome at work // Mol. Plant- Microbe Interact. 2015. V. 28, No 3. P. 212-217.
49. Sharma S.B., Sayyed R.Z., Trivedi M.H., Gobi T.A. Phosphate solubilizing microbes: sustainable approach for managing phoaphorus deficiency in agricultural soils//SpringerPlus. 2013. V. 2. Art. 587, P. 1-14.
50. Turner T.R., James E.K., Poole P.S. The plant microbiome // Genome Biol. 2013. V. 14, No 6. Art. 209, P. 1-10.
51. Ullah A., Mushtag H., Ali H., Munis M.F., Javed M.T., Chaudhary H.J. Diazotrophsassisted phytoremediation of heavy metals: a novel approach // Environ. Sci. Pollut. Res. Int. 2015. V. 22, No 4. P. 2505-2514.
52. Vandenkoornhuyse P., Quaiser A., Duhamel M., Le Van A., Dufresne A. The importance of the microbiome of plant holobiont // New Phytol. 2015. V. 206, No 4. P. 1196- 1206.
53. Zilber-Rosenberg I., Rosenberg E. Role of microorganisms in the evolution of animals and plants: the hologenome theory of evolution // FEMS Microbiol. Rev. 2008. V. 32, No 5. P. 723-735.


Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.




©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ