ВВЕДЕНИЕ 3
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1 Лимфоциты: свойства и функции 5
1.1.1 Характеристика В-лимфоцитов 7
1.1.2 Характеристика Т-лимфоцитов 8
1.2 Пролиферация лимфоцитов в рамках иммунного ответа 11
1.2.1 Пролиферативная активность лимфоцитов 12
1.2.2 Способы оценивания пролиферациилимфоцитов в культуре in vitro . 13
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 21
2.1 Постановка реакции бласттрансформации 21
2.2 Проточная цитометрия 22
2.3 Биолюминисцентное определение активности дегидрогеназ 23
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ 26
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 27
ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 28
Иммунная система обеспечивает способность организма поддерживать свой гомеостаз, индивидуальность и целостность. В общих чертах иммунную систему можно охарактеризовать как систему контроля, действие которой заключается в отличии своего от генетически чужого и уничтожение последнего. Свою функцию данная система выполняет с помощью запуска механизмов иммунного ответа после того, как обнаруживается генетически чужеродные для организма хозяина структуры.
Иммунные процессы осуществляются клетками, относящимися к двум кроветворным линиям - миелоидной и лимфоидной. Миелоидные клетки осуществляют первую реакцию организма против проникшего антигена, выполняя функцию врожденного иммунитета, а лимфоидные - отвечают преимущественно за реакции адаптивного иммунитета. Клетками лимфоидного происхождения являются лимфоциты, которые реагируют на проникнувшие в организм инфекции, распознают чужеродные антигены и запускают ряд реакций иммунного ответа.
В ходе иммунного ответа наивные лимфоциты распознают чужеродный антиген и при надлежащей костимуляции активируются, быстро пролиферируют и производят различные эффекторные молекулы, которые приводят к контролю патогена. Активация этих клеток, клональная экспансия и приобретение эффекторных функций являются энергетически требовательными процессами, которые сопровождаются и зависят от выраженных изменений в усвоении питательных веществ и клеточном метаболизме.
Активация лимфоцитов приводит к резким сдвигам в клеточном метаболизме для защиты от патогенов и организации действия других иммунных клеток. Наивные лимфоциты требуют преимущественно АТФ- генерирующих процессов, тогда как пролиферирующие эффекторные клетки требуют высокого метаболического потока через стимулирующие рост пути. Пути, которые контролируют функцию иммунных клеток и метаболизм, тесно связаны, и установлено, что изменения в метаболизме клеток, как на клеточном, так и на системном уровнях, усиливают или подавляют специфические функции лимфоцитов. В результате этих открытий клеточный метаболизм теперь ценится как ключевой регулятор спецификации и функциональной активности лимфоцитов.
Целью моей работы является исследование метаболических механизмов активности лимфоцитов в ходе пролиферативного ответа.
На основании поставленной цели были определены следующие задачи:
• Изучить современную научную литературу по данной теме.
• Отработать методику постановки реакции бласттрансформации с оценкой эффективности методом проточной цитометрии.
• Оценить активность ферментов лимфоцитов в ходе реакции бласттрансформации, методом биолюминисценции.
Были получены данные об изменении активности внутриклеточных ферментов в ходе развития пролиферативного ответа лимфоцитов и сделано заключение, о том, что между этими процессами существует взаимосвязь. Изучение клеточного цикла и характеристика его метаболической основы имеет большое значение для понимания функционирования механизма распознавания чужеродных молекул антигена и реакции иммунного ответа.
Нельзя забывать, что активация лимфоцитов приводит к резким сдвигам в клеточном метаболизме для защиты от патогенов и организации действия других иммунных клеток. Установлено, что изменения в метаболизме клеток, усиливают или подавляют специфические функции лимфоцитов.
Таким образом, можно говорить, что оценка клеточного метаболизма лимфоцитов в ходе моделируемых реакций иммунного ответа in vitro, может не только расширить наше представление о протекании процессов иммунного ответа, но и служить важным диагностическим критерием, при оценке пролиферативного потенциала исследуемых клеток.
