СОДЕРЖАНИЕ 2
ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТРАТУРЫ 6
1.1 Строение, классификация и физиологическое значение жирных кислот в
организме человека и животных 6
1.2 Жирные кислоты в трофических сетях внутренних водоемов 9
1.3 Трансферт жирных кислот из водные экосистемы в наземные 12
1.4 Значение ДГК для организма человека и животных 17
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 22
2.1 Характеристика объекта исследования 22
2.1.1 Обыкновенная (серая) жаба Bufo bufo Linnaeus, 1758 22
2.1.2 Остромордая лягушка (Rana arvalis) 23
2.2 Район работ 24
2.2.1 Красноярское водохранилище 24
2.2.2 Озеро Круглое 26
2.3 Отбор и подготовка проб к анализу 26
2.4 Газовая хроматография 28
2.5 Методы статистического анализа 29
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
1.1 Состав и содержание жирных кислот в биомассе сеголеток серой
жабы и остромордой лягушки
3.2 Содержание длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот в
биомассе сеголеток серой жабы и остромордой лягушки
3.3 Обсуждение полученных результатов ВЫВОДЫ 31
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ 32
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 33
Необходимость жирных кислот для растительного и животного организма была давно доказана. Например, полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК), нужны для построения клеточных мембран в процессе роста, а насыщенные и мононенасыщенные жирные кислоты (НЖК и МНЖК) используются как источник энергии метаболических процессов (Tocher, 2003). Среди жирных кислот особо выделяют несколько физиологически значимых незаменимых ПНЖК омега 3 серии, такие как эйкозапенаеновая кислота (ЭНК) и докозагексаеновая кислота (ДГК). Эти ПНЖК необходимы доя работы сердечнососудистой и нервной систем многих организмов и человека в том числе. Однако, наземные организмы не способны сами синтезировать ЭНК и ДГК, поэтому они получают их из пищи (Гладышев, 2012).
Основным источником незаменимых омега-3 ПНЖК в биосфере являются водные экосистемы, где они синтезируются диатомовыми и динофитовыми водорослями (Bell and Tocher, 2009). Синтезированные продуцентами в водных экосистемах ЖК передаются организмам высших трофических уровней по цепям питания.
Оценка путей (векторов) и количественного выноса длинноцепочечных ПНЖК на сушу является одним из актуальных направлений в водной экологии. Существует несколько векторов выноса ПНЖК из водных экосистем в наземные, показанные целым рядом работ (Гладышев, 2012).
Наиболее изученным вектором выноса ПНЖК в наземные экосистемы являются насекомые. Водные насекомые могут быть превосходной пищей для наземных потребителей, поскольку они содержат высокие концентрации незаменимых ПНЖК. По разным оценкам амфибионтные насекомые выносят в наземные экосистемы в общей сложности 80,5 мг ПНЖК на квадратный метр суши в год (Dominik, 2017). Еще одним вектором выноса ПНЖК из водной экосистемы в наземную являются рыбы, содержание ПНЖК в которых варьирует от 5 до 50 % от всех жирных кислот (Rezanka,1989; Arts, 2001). Изучение разных векторов выноса необходимо для оценки потоков ПНЖК на сушу и их использования в разных сферах производства, например в фармацевтики и аквакультуре.
Земноводные, наряду с другими амфибионтными организмами, могут быть вектором переноса ПНЖК в наземные экосистемы. Это подтверждается тем, что головастики во время метаморфоза потребляют органическое вещество водного происхождения (Pryor,2014), а потом, в конце метаморфоза, выносят его на сушу.
Пищевая специализация амфибии на разных стадиях развития отличается. Пищей взрослых амфибий являются насекомые, в то время как головастики лягушек и жаб, по литературным данным, являются растительноядными организмами (Pryor,2014). Поскольку состав и содержание жирных кислот в животных в первую очередь завит от пищи, то различия в составе кормовых объектов молоди и взрослых особей амфибий могут сказаться на составе жирных кислот в их организмах.
Однако состав жирных кислот земноводных практически не исследован. При этом не многочисленные работы по составу жирных кислот земноводных касаются только взрослых особей. Например, такая работа была проведена в отношении леопардовой лягушки (Rana pipienswere) (Martin et al., 2002). Есть также исследования жирнокислотного состава яйцеклеток песчаной жабы (Bufo arenarum) (Bruzzone et al., 2003), а также состава жирных кислот в плазме крови коричневой лягушки (Rana temporaria) (Zabelinskii,2012). На примере австралийской лягушки, роющей лопатницы (Cyclorana alboguttata),было доказано, что содержание ПНЖК в ее организме зависит от пищи (Berner et ai., 2009)
Земноводные, как вектор выноса ПНЖК из водных экосистем в наземные рассматривались только в двух работах. Например, проводили изучение потока длинноцепочечных ПНЖК - ЭПК и ДГК, выносимых метаморфами краснобрюхой жерлянки (Bmbina bombina) (Ермохин и др., 2018). Также проводился анализ содержания ПНЖК в биомассе американской жабы (Anaxyrus americanus)к концу метаморфоза (Fritz et al., 2018).
Двух работ может быть не достаточно для оценки эффективность выноса ПНЖК в наземные экосистемы таким вектором, как амфибии. Зная о том, что головастики в водных экосистемах могут питаться организмами синтезирующими или содержащими ЭНК и ДГК, можно предположить, что к концу метаморфоза они могут выносить на сушу значительные количества этих кислот для наземных потребителей.
Поэтому, целью работы было изучить состав и содержание жирных кислот в биомассе сеголеток двух видов бесхвостых амфибий из разных водоемов.
Задачи:
1. Сравнить состав ЖК в биомассе разных видов амфибий обитающих в одном водоеме.
2. Сравнить состав ЖК в биомассе сеголеток одного вида амфибий, обитающих в водоемах с разным трофическим статусом.
3. Оценить содержание длинноцепочечных ПНЖК в биомассе сеголеток двух видов амфибий и оценить факторы влияющие на содержание этих ЖК.
1. Сравнение ЖК состава серой жабы и остромордой лягушки показало преобладание в биомассе сеголеток серой жабы биомаркерных ЖК наземного органического вещества. Тогда как в биомассе сеголеток остромордой лягушки преобладают биомаркеры водного происхождения (диатомовые водоросли).
2. Сравнение ЖК состава остромордой лягушки из оз. Круглое и Красноярского водохранилища показало, что в биомассе сеголеток из оз. Круглое преобладают биомаркеры диатомовых водорослей. В то время как в биомассе сеголеток из Красноярского водохранилища преобладают биомаркеры цианобактерий, бактериопланктона и аллахтонной органики.
3. Содержание ЭПК и ДГК в сырой массе сеголеток серой жабы составляет 0,3 мг/г, в то время как содержание этих же ЖК в биомассе сеголеток остромордой лягушки составляет 2,4 мг/г. Эти различия были, вероятно, вызваны принадлежностью к разным семействам бесхвостых амфибий, отличающихся образом жизни.
Содержание ЭПК и ДГК в биомассе остромордой лягушки из оз. Круглое составляло 3,2 мг/г и было достоверно выше, чем у этого вида из Красноярского водохранилища, за счет преобладания в фитопланктоне оз. Круглое синтезирующих ЭПК и ДГК диатомовых водорослей.
1. Агеев, А.В. Красноярское водохранилище: мониторинг, биота,
качество вод: монография. под ред. Алимова А.Ф., М.Б. Ивановой / А.В. Агеев, Н.А. Гаевский, М.И. Гладышев, Л.А. Глущенко, З.Г. Гольд, В.М. Гольд, Г.А. Еникеев, И.Г. Еникеева, Е.А. Иванова, Н.А. Кожевникова, И.И. Морозова, И.М. Попельницкая, В.Е. Распопов, Г.Н. Скопцова, В.А.
Сапожников, В.А. Олейников, С. Чупров, С.П. Шулепина, А.В.
Шапошников. - Красноярск: Изд-во Сибирского федерального университета, 2008. - 537 с.
2. Борисова Е.В., А.П. Толомеев , А.В. Дроботов , Н.Н. Сущик Вылет хирономид (Chironomidae, Diptera) из соленого озера как источник органического углерода и незаменимых биохимических веществ для аридных экосистем юга Сибири // Journal of Siberian Federal University. Biology - 2019 - C. 196-215
3. Васьковский, В. E. Липиды // Соросовский образовательный журнал. - 1997. - № 3. - С. 32-37.
4. Волова, Т. Г. Н. В. Зобова, Л. А. Франк, П. В. Миронов, С. В. Прудникова, В. А. Кратасюк, Е. В. Немцева, И. Е. Суковатая, Т. А. Зотина, Е. И. Шишацкая, А. С. БарощИ. А. Ольховский, Н. М. Титова, Т. Н. Субботина, Н. Н. Сущик, Н. А. Гаевский, И. Е. Ямских, А. Ю. Кучкина; Г. С. Калачева, А. Я. Болсуновский, С. В. Маркова, М. Ю. Трусова, Д. Ю. Рогозин, Е. С. Задереев, А. П. Толомеев, Д. В. Дементьев, И. В. Исаков Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум //ИздательствоСибирского федерального университета. - 2012. - С. 275 - 289.
5. Гладышев М.И, , А. В. Крылов, Н. Н. Сущик, М. И. Малин, О. Н. Махутова, И. В. Чалова, Г. С. Калачёва Перенос незаменимых полиненасыщенных жирных кислот из водной экосистемы в наземную через трофическую пару рыбы - птицы // Доклад академии наук. - 2010 - Т. 431 -
№ 4 - С.563-565
6. Гладышев М. И., А. Ю. Харитонов, О. Н. Попова, Н. Н. Сущик, О. Н. Махутова, Г. С. Калачёва Количественное определение роли стрекоз в переносе незаменимых полиненасыщенных жирных кислот из водных экосистем в наземные // Доклады академии наук - 2011 - Т.438 - №5. - С. 708 - 710.
7. Гладышев, М. И. Незаменимые полиненасыщенные жирные кислоты и их пищевые источники для человека // Journalofsiberianfederaluniversity.- 2012. - № 5. -С. 352-386.
8. С.Н. Городилова Симбиотопичское сосуществование земноводных (Amphibia) Назаровской лесостепи (Средняя Сибирь)// ВестникКрасГАУ - 2010 - С. 1-6
9. Дгебуадзе Ю. Ю., Н. Н. Сущик, И. В. Башинский, О. Н.
Махутова, Г. С. Калачева, В. В. Осипов, М. И. Гладышев Анализ состава жирных кислот выявил различия в спектрах питания головастиков двух видов амфибий // Доклад академии наук - 2017 - Т.472 - №3 - С.350 - 353
10. Долгоносов А.М, Рудаков О.Б., Прудковский А.Г. Колоночная аналитическая хроматография: практика, теория, моделирование// 2005 - С. 36-205.
11. Ермохин М. В., Н. Н. Сущик, В. Г. Табачишин, Г. С. Калачева, А. А. Колмакова, М. И. Гладышев Амфибии как вектор переноса длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот омега - 3 из водных экосистем в наземные// Доклад академии наук - 2018 - Т.481 - №2 - С.1 - 3.
12. Каганова И. И, Сообщение о новых находках серой жабы (Bufo Bufo Linnaeus, 1758) на юге сибири// ХГУ ИМ. Н. Ф. Каганова. - 2014 - С. 1¬2.
13. Кузнецова И.И Биология серой жабы и ее экологическое значение// «Природные ресурсы Сибири и Дальнего Востока - взгляд в будущее» - 2013 - С. 22-23
14. А.А. Куницын Материалы по распространению и экологии остромордой лягушки (Rana Arvalis) в Прибайкалье и Забайкалье // Байкальский Зоологический Журнал - 2010 - С. 1-4
15. Мурзина, С.А., З.А. Нефедова, Н.Н. Немова Влияние жирных кислот (маркеров пищевых источников рыб) на механизмы адаптации в условиях высоких широт (обзор) // Труды Карельского научного центра Российской Академии наук. - 2012. - № 2. - С. 18 - 25
16. Рудченко А.Е, Роль трофических факторов в формировании жирнокислотного состава рыб, обитающих в водоемах красноярского края// Сибирский федеральный университет. - 2018
17. В.Т. Седалищев, Г.Н. Бекенева К экологии амфибий и рептилий юго-западной Якутии // Самарская Лука: Бюлл - 2004 - С. 330-338.
18. Сущик Н. Н., М. И. Гладышев, Г. С. Калачева, О. П. Дубовская, Е. С. Кравчук, Е. А. Иванова, М. Ю. Трусова Сезонная динамика зоопланктона и содержание незаменимых жирных кислот в сестоне небольшого пруда // Биология внутренних вод. - 2002. - №2. - С. 60-68.
19. Сущик, Н. Роль наземных жирных кислот в трофометаболических взаимодействиях в пресноводных экосистемах. // Журнал общей биологии. - 2008. - № 4. - С. 299-316.
20. Тейлор Д, Грин Н, Стаут У Биология: В 3-х томах. Т-1./ Р.Сопер- Москва, 2004. - № 3- С. 121-124.
21. Файзулин А. И, Морфометрическая характеристика серой жабы Bufo bufo(Anura,Amphibia) среднего Поволжья // Самарская Лука: проблемы региональной и глобальной экологии. - 2016. - Т. 25 - №2. - С. 190-193
22. Цих И. В, Морфоэкологическая характеристика серой жабы Новоселовского района Красноярского края//Сибирский федеральный университет. - 2015
23. Чупров С.М, Атлас Земноводных и пресмыкающихся Красноярского края// Сибирский федеральный университет. - 2013. - С. 143
24. Шляхтин Г.В, В.Г. Табачишин, Е.В. Завьялов Характеристика пищевого рациона остромордой лягушки (Rana Arvalis Nilson, 1842) и ее сезонная динамика на севере нижнего Поволжья//Современная герпетология - 2008 - С. 50-57.
25. Ahlgren G., I. B. Gustafsson, M. Boberg Fatty acid content and chemical composition of freshwater microalgae // Journal of Phycology. - 1992. - V. 28 - №1. - P.37-50.
26. Ahlgren G., P. Blomqvist, M. Boberg, I.-B. Gustafsson Fatty acid content of the dorsal muscle - an indicator of fat quality in freshwater fish // Journal of Fish Biology. - 1994. - V. 45 - №1. - P. 131-157.
27. Amira M. B., J. H. Hanene, D. Madiha, B. Imen, H. Mohamed, C. Abdelhamid Effects of frying on the fatty acid composition in farmed and wild gilthead sea bream (Sparus aurata) // International Journal of Food Science and Technology. - 2010. - V. 45. - №1. - P. 113-123
28. Ariana Bruzzone, Jorgelina Buschiazzo and Telma S. Alonso Lipids during Bufo arenarum oogenesis// Cambridge University Press - 2003 - P. 95¬100.
29. Artamonovaa V. S., A. A. Makhrova, Corresponding Member of the RAS M. I. Gladyshev, N. N. Sushchik, and Academician Y. Y. Dgebuadzea Polyunsaturated Fatty Acid Content in Muscle Tissue Is Associated with the Duration of Embryo Development in Salmonoid Fishes (Salmonoidei)// Doklady Biochemistry and Biophysics - 2020 - C. 59-61
30. Arts Michael T., Robert G. Ackman, and Bruce J. Holub “Essential fatty acids” in aquatic ecosystems: a crucial link between diet and human health and evolution// Can . J. Fish. Aquat. Sci - 2001 - P. 122 - 137.
31. Bell, M.V, D. R. Tocher Biosynthesis of polyunsaturated fatty acids in aquatic ecosystems: general pathways and new directions // Lipids in Aquatic Ecosystems. .- 2009. - P. 211 - 231.
32. Dominik Martin-Creuzburg, Carmen Kowarik, Dietmar Straile Cross-ecosystem fluxes: Export of polyunsaturated fatty acids from aquatic to terrestrial ecosystems via emerging insects// Science of The Total Environment - 2017 -
P.174 - 182
33. Filipa Faleiro, Luis Narciso Lipid dynamics during early development of Hippocampus guttulatus seahorses: Searching for clues on fatty acid requirements// Aquaculture - 2010 - C. 56-64
34. Gladyshev, M.I., N.N. Sushchik, O.N. Makhutova, O.P. Dubovskaya, E.S. Kravchuk, G.S. Kalachova, E.B. Khromechek Correlations between fatty acid composition of seston and zooplankton and effects of environmental parameters in a eutrophic Siberian reservoir // Limnologica. - 2010. - V. 40. - P. 343 - 357
35. Gladyshev Michail I., Nadezhda N. Sushchika, Olesia N. Makhutovaa, Production of EPA and DHA in aquatic ecosystems and their transfer to the land. // Prostaglandins & other Lipid Mediators 107. - 2013 - P. 117 - 126
36. Gladyshev M. I., N. N. Sushchik, O. N. Makhutova, L. A. Glushchenko, A. E. Rudchenko, A. A. Makhrov, E. A. Borovikova, Y. Y. Dgebuadze Fatty acid composition and contents of seven commercial fish species of genus Coregonus from Russian Subarctic water bodies // Lipids. - 2017. - V. 52. - P. 1033-1044.
37. Heissenberger M., J. Watzke, M. J. Kainz Effect of nutrition on fatty acid profiles of riverine, lacustrine, and aquaculture-raised salmonids of pre-alpine habitats // Hydrobiologia. - 2010. - V. 650. -P. 243-254.
38. A. J. Hulbert Membrane Fatty Acids as Pacemakers of Animal Metabolism// Lipids - 2007 - C. 811-819
39. M. J. Kainz, H. H. Hager, S. Rasconi, K. K. Kahilainen, P.-A. Amundsen, B. Hayden Polyunsaturated fatty acids in fishes increase with total lipids irrespective of feeding sources and trophic position// Ecosphere - 2017 - C. 1-13
40. Katz, S.L., L.R. Izmesteva, S.E. Hampton, T. Ozersky, K. Shchapov, M.V. Moore, S.V. Shimaraeva, E.A. Silow The —Melosira years of Lake Baikal: Winter environmental conditions at ice onset predict under-ice algal blooms in spring // Limnol. Oceanogr. - 2015. - V. 60. - P. 1950-1964.
41. Kelly J. R., R. E. Scheibling Fatty acids as dietary tracers in benthic food webs // Marine Ecology Progress Series. - 2012. - V. 446. - P.1-22.
42. Kelley A. Fritz, Matt R. Whiles, Jesse T. Trushenski Subsidies of long-chain polyunsaturated fatty acids from aquatic to terrestrial environments via amphibian emergence// Freshwater Biology - 2019 - P. 1-11.
43. Lee A. Fuiman and Kestrel O. Perez Metabolic programming mediated by an essential fatty acid alters body composition and survival skills of a marine fish // The Author(s) Published by the Royal Society - 2015 - C. 1-6
44. Lipids, Lipids in Aquatic Ecosystems// Springer Science+Business Media, LLC . - 2009. - P. 179 - 211
45. . O. N. Makhutova , N. N. Sushchik, M. I. Gladyshev, A. V. Ageev, E. G. Pryanichnikova, G. S. Kalachova Is the Fatty Acid Composition of Freshwater Zoobenthic Invertebrates Controlled by Phylogenetic or Trophic Factors?// Lipids
- 2011 - C. 709-721
46. Martin R.E., S. A.Hopkins, R.Steven Brush, C. R.Williamson,H.Chen, R.E. Anderson Docosahexaenoic, arachidonic, palmitic, and oleic acids are differentially esterified into phospholipids of frog retina// Prostaglandins, Leukotrienes and Essential FattyAcids - 2002 - P. 105 - 111
47. Nancy J. Berner, P. L. Else, A. J. Hulbert, B. L. Mantle, R. L. Cramp, C. E. Franklin Metabolic depression during aestivation does not involve remodelling of membrane fatty acids in two Australian frogs // J Comp Physiol B - 2009 - P. 857-866
48. Napolitano, G. E., M.T. Arts, B.C. Wainman. Fatty acids as throphic and chemical markers in freshwater ecosystems // Lipids in freshwater ecosystems.
- 1999. - P. 21-44.
49. Nelson M. M., B. D. Mooney, P. D. Nichols, C. F. Phleger Lipid of Antartic Ocean amphipods: food chain interactions and the occurrence of novel biomarkers // Marine Chemistry. - 2001. - V. 73. - P. 53-64.
50. Pryor Gregory S, Tadpole Nutritional Ecology and Digestive Physiology: Implications For Captive Rearing of Larval Anurans// Francis Marion University. -2014
51. Rezanka Tomas, Very - long - chain fatty acids from the animal and plant kingdoms// Prog. Lipid Res. - 1989 - P. 147 - 187.
52. . J. Rinchard, S. Czesny, K. Dabrowski Influence of lipid class and fatty acid deficiency on survival, growth, and fatty acid composition in rainbow trout juveniles // Aquaculture - 2007 - C. 363-371
53. Sushchik N.N, Yurchenko Y.A, Belevich O.E, Kalachova G.S, Kolmakova A.A and Gladyshev M.I Waterbugs (Heteroptera: Nepomorpha and Gerromorpha) as sources of essential n-3 polyunsaturated fatty acids in Central Siberian ecoregions.// Freshwater Biology. - 2016 - P. 1-15
54. Taipale S., U. Strandberg, E. Peltomaa, A. W. E. Galloway, A. Ojala, M. T. Brett Fatty acid composition as biomarkers of freshwater microalgae: analysis of 37 strains of microalgae in 22 genera and in seven classes // Aquatic Microbiol Ecology. - 2013. - V. 71. - P. 165-178
55. Tocher, D.R. Metabolism and functions of lipids and fatty acids in teleost fish.// Rev. Fish. Sci. - 2003. - V. 11. - P. 107-184.
56. Nigel Turner, Paul L. Else, A. J. Hulbert Docosahexaenoic acid (DHA) content of membranes determines molecular activity of the sodium pump: implications for disease states and metabolism // Naturwissenschaften - 2003 - C. 521-523
57. William Stillwell, Stephen R. Wassall Docosahexaenoic acid: membrane properties of a unique fatty acid // Chemistry and Physics of Lipids - 2003 - C.1-27
58. Yermokhin M. V, N. N. Sushchik V. G. Tabachishin, G. S. Kalacheva, A. Kolmakova, and M. I. Gladyshev Amphibia as a Vector of Transfer of Long-Chain Polyunsaturated Omega-3 Fatty Acids from Aquatic to Terrestrial Ecosystems // Doklady Biochemistry and Biophysics. - 2018 - C.195-197.