ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Послеоперационные инфекционные осложнения в кардиохирургии 6
1.2 Инфекционный эндокардит 7
1.2.1 Возбудители инфекционного эндокардита 9
1.2.2 Биохимический механизм развития воспаления
и тромбообразования 11
1.3 Полимерные системы доставки лекарственных препаратов 14
1.4 Характеристика и действие антимикробных препаратов 18
1.4.1 Антибактериальная терапия 18
1.4.2 Фармакокинетика лекарственных средств 19
1.4.3 Антибиотики, применяемые при лечений
инфекционных осложнений 20
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 26
2.1 Материалы исследования 26
2.2 Методы исследования 28
2.2.1 Моделирование деградации лекарственного покрытия in vitro 28
2.2.2 Спектрофотометрический метод определения
ванкомицина в растворе 28
2.2.3 Методика определения ванкомицина в растворе методом ВЭЖХ .. 30
2.2.4 Диско-диффузионный метод 31
2.2.5 Методы статистической обработки результатов 33
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 34
3.1 Оценка антибактериального действия лекарственного покрытия
диско-диффузионным методом 34
3.2 Результаты моделирования деградации
лекарственного покрытия in vitro 36
3.2.1 Определение профилей высвобождения ванкомицина
при деградации лекарственного покрытия 36
3.2.2 Определение суммарного выхода ванкомицина при деградации
лекарственного покрытия 41
3.2.3 Определение остаточного содержания ванкомицина при деградации
лекарственного покрытия 46
3.2.4 Сравнительная оценка зависимости остаточного содержания
ванкомицина от концентрации полимера PLGA 85:15 48
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 50
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 51
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 52
Актуальность работы. Заболевания сердечно-сосудистой системы являются самыми распространёнными в мире. Согласно статистике, ими страдают около 3,5% населения всего земного шара. Они служат причинами более трети летальных исходов, а также приводят к потери трудоспособности многих больных. Особенно высокой явялется частота инфекционных осложнений после кардиохирургических вмешательств [1].
Реконструктивные клапаносберегающие операции занимают лидирующие позиции [17].
Любой протез - это инородное тело, в связи с этим остаётся высокий риск тромбообразования, инфицирования и механического износа протезов. Типичным осложнением имплантации протеза клапана сердца является инфекционный эндокардит. Заболевание не зависит от модели клапана. Средняя выживаемость к 10-летнему сроку после операций протезирования клапанов составляет 39% - 75% [8].
Традиционным подходом при лечении бактериальных поражений клапанов сердца является классическая лекарственная терапия. Как правило, это антибиотики широкого спектра действия: группы аминогликозидов, гликопептидов, фторхинолов, цефалоспоринов и пенициллинов [12].
Для уничтожения инфекций локализованных на поверхности клапана приходится заполнять антибиотиком весь организм, при этом создать местную повышенную концентрацию путем локальной инъекции не удается, так как он непрерывно смывается кровью. Поэтому основным принципом, использованным в настоящей работе при создании лекарственного покрытия манжеты клапана сердца, является контролируемое и длительное выделение антибиотика с поверхности биопротеза [29]. Контроль и доставку лекарственного препарата осуществляют биоразлагаемые полимерные системы, применение которых особенно актуально в последнее десятилетие.
Целью данной работы является исследование кинетических параметров высвобождения антибиотика ванкомицина из композиционного лекарственного покрытия.
В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
1) Подготовить образцы лекарственных покрытий, на основе полимеров PLGA с разным соотношением сополимеров (65:35; 75:25;
85:15) и провести моделирование деградации лекарственных покрытий в условиях in vitro;
2) Оценить начальное и остаточное содержание ванкомицина при моделировании деградации лекарственных покрытий;
3) Оценить количественное высвобождение ванкомицина по неделям при моделировании деградации лекарственного покрытия in vitro;
4) Оценить возможность использования спектрофотометрического метода и метода ВЭЖХ для оценки количественного высвобождения лекарственного препарата из покрытия и определения остаточного содержания в нём;
5) Провести оценку антибактериального эффекта лекарственного покрытия до и после моделирования деградации in vitro.
Выпускная квалификационная работа написана на 57 листах, содержит 17 рисунков, 4 таблицы и список литературы на русском и английском языках из 60 источников.
В ходе выполнения бакалаврской работы было исследовано влияние типа полимера на скорость деградации лекарственного покрытия, произведена оценка зависимости концентрации полимера PLGA 85:15 на остаточное содержание ванкомицина. Получены результаты по суммарному выходу ванкомицина в раствор при моделировании деградации антибактериального покрытия in vitro, а также произведена оценка остаточного содержания лекарственного препарата по окончании сроков инкубации в модельном растворе.
По результатам исследования можно сделать следующие выводы:
1) В ходе исследования установлено что технология изготовления лекарственного покрытия не оказывает негативного влияния на антибактериальный эффект;
2) Исследование показало, что тип полимера PLGA влияет на время деградации лекарственного покрытия, наибольшее время деградации обнаружено у полимера PLGA с соотношением сополимеров 85:15;
3) Установлено неравномерное высвобождение ванкомицина из лекарственного покрытия по неделям: максимально в первые 2 недели с последующем снижением выхода препарата в модельный раствор;
4) Доказана возможность использования спектрофотометрического метода и метода ВЭЖХ для оценки высвобождения ванкомицина из лекарственного покрытия;
5) Полученное лекарственное покрытие обладает антибактериальным эффектом по отношению к тестовым культурам: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus bovis, Enterococcus faecalis. Полимер PLGA не оказывает негативного влияния на действие ванкомицина.
