ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Характеристика и области применения атомно-силовой микроскопии 6
1.2 Принцип действия и основные режимы работы атомно-силового
микроскопа в воздушной среде 8
1.3 Обзор биологических и синтетических материалов для хирургии 16
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 21
2.1 Материалы исследования 21
2.2 Методы исследования 22
2.2.1 Методы исследования поверхностных свойств материалов 22
2.2.2 Методы исследования физико-механических свойств материалов 22
2.2.3 Метод атомно-силовой микроскопии 23
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 28
3.1 Результаты исследования поверхностных свойств материалов 28
3.2 Результаты исследования физико-механических свойств материалов .... 30
3.3 Результаты атомно-силовой микроскопии 32
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 45
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 45
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 47
Актуальность работы. Атомно-силовая микроскопия (АСМ) - один из мощных современных методов исследования морфологии поверхности и локальных свойств поверхности с высоким пространственным разрешением. За последние годы своего существования метод АСМ получил множество различных воплощений: микроскопы превратились в сложные
многофункциональные аналитические инструменты как для исследования топографии, пространственного распределения приповерхностных силовых полей (магнитных, электрических), температуры, емкостных и адгезионных свойств поверхности, так и для модификации поверхности материалов. Метод открыл широкие возможности для комплексного изучения морфологии и различных характеристик поверхности материалов, в том числе для хирургии, и стал источником новой информации при решении традиционных задач кристаллографии и физики кристаллов [39].
С развитием тканевой инженерии одним из перспективных направлений для костной пластики является создание клеточных графтов из биодеградируемых материалов в сочетании с донорскими клетками, способных восстанавливать поврежденный орган или ткань. Однако для успешной индукции остеогенеза в месте имплантации необходимо создать высокую начальную концентрацию клеток, поэтому возникает необходимость поиска адекватного носителя для закрепления трансплантируемых клеток в организме реципиента. Среди материалов, разрабатываемых и исследуемых применительно к этим задачам, - полигидроксиалканоаты (ПГА), линейные полиэфиры микробиологического происхождения, являются наиболее перспективными. ПГА представляют большой интерес для ортопедии в связи с их высокой биосовместимостью, медленной биодеградацией и механической прочностью. Однако остается не ясным как химических состав, структура, свойства полимеров (кристалличность, механическая прочность, температурные характеристики, скорости биораспада), свойства поверхности различных форм на основе полимера могут повлиять на рост и адгезию остеобластов.
Актуальность представленной работы обусловлена с одной стороны важностью и новизной объектов исследования, интенсивно изучающихся многими научными коллективами в связи с интересом к их фундаментальным характеристикам и перспективами практического применения в современных технологиях. С другой стороны — с новизной развиваемых экспериментальных методик нанодиагностики поверхности материалов с различной степенью упорядоченности структуры и строением рельефа методом атомно-силовой микроскопии. Атомно-силовые микроскопы сейчас становятся одними из самых востребованных и доступных приборов для исследований в самых различных областях науки, вооруженность ими неуклонно возрастает. Поэтому основополагающим в работе рассматривается не просто получение адекватного изображения, но и осознанный его анализ.
Целью работы является исследование поверхностных, физикомеханических свойств и морфологии поверхности методом атомно-силовой микроскопии форм на основе полимеров полигидроксиалканоата.
1. Дать характеристику метода атомно-силовой микроскопии, области применения, принцип действия и основные режимы работы
2. Подготовить обзор биологических и синтетических материалов для хирургии
3. Провести исследование поверхностных свойств материала полигидроксиалканоата
4. Провести исследование физико-механических свойств материалов
5. Провести исследование топографии поверхности экспериментальных образцов на основе полигидроксиалканоатов методом атомно-силовой микроскопии
Выпускная квалификационная работа написана на 51 листе, содержит 16 рисунков, 3 таблицы и список литературы на русском и английском языках из 50 источников.
В процессе выполнения данной работы были исследованы свойства новых синтетических материалов для хирургии на основе
полигидроксиалканоатов.
При выборе метода диагностики исследуемых структур важно было учитывать прецизионность и достоверность получаемых результатов. В качестве методик для исследования материалов для хирургии применялся метод атомно-силовой микроскопии.
При анализе морфологии исследованных структур особое внимание обращалось на степень шероховатости исследуемой поверхности. Также было проведено сравнение морфологии различных П3ГБ матриксов.
Проведенное исследование позволяет качественно и количественно характеризовать свойства перспективного материала для хирургии.
Для дальнейшего развития данного направления исследования необходимо получить более детальную информацию о свойствах исследуемых материалов с применением более широкого спектра аналитических методов (оптические, электронно-зондовые, рентгеновские, ионно-зондовые и т.д.).
По результатам исследования можно сделать следующие выводы:
1. Метод атомно-силовой микроскопии возможно использовать для оценки шероховатости поверхности синтетических материалов на основе полигидроксиалканоата
2. Установлено, что новые сополимеры П(3ГБ/П4ГБ) обладают более высокой гидрофильностью, чем ПГ3Б, следовательно адгезия и жизнеспособность остеобластов на данных сополимерах выше.
3. Установлено, что полученные образцы сополимеров П(3ГБ/П4ГБ) обладают высоким пределом прочности и деформации при разрушении, которые являются крайне важными показателями материалов в ортопедии.
4. Проанализированная морфология исследованных объектов показывает высокую степень подготовки поверхности, большинство образцов относятся к высокому классу чистоты поверхности.
1. Винокур А. А., Дьяков В. Е., Алуханян О. А., Сравнительное исследование физико-механических свойств новых заплат из политетрафторэтилена // Кубанский научный медицинский вестник. 2010. №. 8. С. 1-7.
2. Влияние мезенхимальных стромальных клеток костного мозга и жировой ткани человека на эффективность вооотановления неврологического дефицита в модели черепно-мозговой травмы у крыс / Е. В. Половников, В. В. Ступак, А. Г. Самохин, И. А. Васильев, О. Б. Добрякова, Е. Я. Шевела, Е. Р. Черных // Бюллетень восточносибирского научного центра СО РАМН. 2012. №. 3. С. 301-304.
3. Волова Т.Г., Шишацкая Е.И., Миронов П.В. Материалы для медицины, клеточной и тканевой инженерии [Электронный ресурс]: учеб. пособие. Красноярск: СФУ, 2009.
4. ГОСТ 8.593-2009 ГСИ. Микроскопы сканирующие зондовые атомно-силовые. Методика проверки. Введ. 2010-11-01. М., 2000. 8 с.
5. ГОСТ 2789-73. Шероховатость поверхности. Параметры и характеристики (с Изменениями №1,2). Введ. 1975-01-01. М., 1980. 7 с.
6. ГОСТ 25142-82. Шероховатость поверхности. Термины и определения (с Изменениями №1). Введ. 1983-01-01. М., 2017. 20 с.
7. Зубков В.И. Диагностика полупроводниковых
наногетероструктур методами спектроскопии адмиттанса: монография. СПб.: Элмор, 2007. 167 с.
8. Зубков В.И. Методы диагностики структур
наноэлектроники и фотоники : учеб. пособие / СПб.: Изд-во СПбГЭТУ «ЛЭТИ», 2015. 120 с.
9. Имплантационные материалы и остеогенез. Роль биологической фиксации и остеоинтеграции в реконструкции кости / Н. А. Корж, Л. А. Кладченко, С. В. Малышкина, И. Б. Тимченко // Ортопед., травматол. и протезир. 2005. № 4. С. 118-127.
10. Исследование пленочных матриксов из резорбируемых полигидроксиалканоатов различного химического состава in vivo: реакция тканей и кинетика биоразрушения/ Е. И. Шишацкая, Е. Д. Николаева, А. В. Горева, К. Д. Бригкхам, Т. Г. Волова, Э. Д. Синкси // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2012. №. 1. С. 73 - 80.
11. Кирилова И. А., Садовой М. А., Подорожная В. Т. Сравнительная характеристика материалов для костной пластики: состав и свойства // Хирургия позвоночника. 2012. №. 3. С. 72-83.
12. Клеточные технологии в травматологии и ортопедии / Р.В. Деев, А.А. Исаев, А. Ю. Кочиш, P. M. Тихилов // Травматология и ортопедия России. 2007. №. 46. С. 18-30.
13. Королев С.Б., Абраменков А.Н. Новая медицинская технология подготовки костных трансплантатов для костной пластики // Мат-лы II Московского Междунар. конгр. травматологов и ортопедов, 2011. 213 с.
14. Костно-пластические биоматериалы и их физикомеханические свойства / И. А. Кирилова, В. Т. Подорожная, Е. В. Легостаева, Ю. П. Шаркеев, П. В. Уваркин, A. M. Аронов // Хирургия позвоночника. 2010. № 1. С. 81-87.
15. Костные имплантаты на основе скаффолдов и клеточных систем в тканевой инженерии (обзор) / Е. В. Загайнова, В. Н. Баграташвили, П. С. Тимашев, Д. С. Кузнецова // Современные технологии в медицине. 2014. №. 4. С. 201-212....50