Тип работы:
 Предмет:
 Язык работы:


Трансфекция мышц комплексами ДНК с катионными пептидами и анионным пептидным покрытием

Работа №148758

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

биология

Объем работы60
Год сдачи2023
Стоимость4360 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
33
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


Список сокращений 4
Введение 5
Обзор литературы 8
1. Успехи генной терапии и основные трудности 8
2. Вирусные векторы 10
3. Невирусные векторы 11
4. Доставка нуклеиновых кислот в мышечную ткань 15
4.1. Вирусная доставка 17
4.2. Невирусная доставка 19
5. Генная терапия наследственных заболеваний, связанных с мышцами 22
5.1. Мышечная дистрофия Дюшенна и Беккера 22
5.2. Конечностно-поясные мышечные дистрофии 27
5.3. Миотоническая дистрофия 28
Материал и методы 29
Материал 29
Методы 30
1. Тест на вытеснение красителя бромистого этидия. 30
2. Измерение дзета-потенциалов и размеров комплексов ДНК/носитель/модуль. 30
3. Тест на токсичность комплексов ДНК/носитель/модуль после трансфекции культуры клеток C2C12. 31
4. Трансфекция in vitro клеток C2C12 комплексами ДНК/носитель/модуль 31
5. Доставка плазмидной ДНК с геном GFP бедренную мышцу мышей mdx 34
6. Окрашивание срезов мышц гематоксилин-эозином 35
7. Изучение трансфецируемости дифференцированных и недифференцированных клеток C2C12 комплексами ДНК/Turbofect. 35
8. Статистическая обработка 36
Результаты 37
1. Влияние соотношения заряда анионных носителей на образование комплексов. 37
2. Дзета-потенциалы и размеры комплексов ДНК/носитель/модуль. 40
3. Выживаемость клеток линии C2C12 после трансфекции комплексами ДНК/носитель/модуль 41
4. Трансфецирующая способность комплексов ДНК/носитель/модуль на клетках C2C12 в экспериментах invitro. 42
5. Трансфецирующая способность комплексов ДНК/носитель/модуль на мышцах мышей линии mdx в эксперименте invivo. 44
Обсуждение 47
Выводы 51
Список литературы


Доставка нуклеиновых кислот в мышечные клетки является актуальной проблемой современной науки. Мышечная трансфекция считается одной из наиболее трудноосуществимых сразу по нескольким причинам. Во-первых, на мышечных клетках существует не так много рецепторов, с которыми могут связываться наночастицы, что, в свою очередь, снижает эффективность и специфичность доставки. Во-вторых, скелетные мышцы представлены синцитиальными мышечными волокнами, утратившими способность к митотическому делению, что приводит к снижению эффективности доставки конструкций, не несущих сигналы ядерной локализации (Zabner et al., 1995).
Трансфекция мышц имеет множество применений. В первую очередь следует упомянуть генную терапию наследственных заболеваний, связанных с нарушением работы мышц. К таким заболеваниям относят, например, мышечную дистрофию Дюшенна. На данный момент существует большое число подходов к генной терапии миодистрофии Дюшенна («пропуск экзона», вырезание экзонов с помощью системы CRISPR/Cas9 и т.д.), однако ограничивающим фактором до сих пор является отсутствие безопасного и высокоэффективного вектора доставки (Min et al., 2019). Исследование и разработка наиболее эффективных способов доставки нуклеиновых кислот в мышечные клетки позволят повысить качество генной терапии наследственных заболеваний мышц. Также мышечная ткань используется для доставки в нее ДНК- и мРНК-вакцин для продуцирования антигенов и последующей иммунизации организма.
Несмотря на то, что в настоящее время в большинстве исследований по генной терапии используются вирусные векторы (ретровирусы, аденовирусы, аденоассоциированные вирусы и др.), они имеют ряд недостатков по сравнению с невирусными носителями. Одним из главных преимуществ невирусных носителей является «неограниченная» емкость загрузки упаковываемой нуклеиновой кислоты, тогда как вирусные носители имеют ограничение размера доставляемой ДНК до 30 т.п.н.(Lukashev, Zamyatnin, 2016). Вследствие этого с помощью вирусных носителей нельзя доставлять крупные гены, такие как ген дистрофина (Shevchenko, 2012). Также необходимо учитывать тот факт, что, несмотря на адаптированность вирусных векторов для доставки генетического материала, они способны вызывать иммунные реакции.
Существует несколько типов невирусных носителей для доставки ДНК: липосомы, полимерные соединения, пептидные носители и др. Для связывания ДНК используются, в основном, катионные соединения. Они электростатически связываются с отрицательно заряженными фосфатными группами нуклеиновой кислоты, образуя стабильный комплекс. Чаще всего в качестве катионных пептидных носителей используются аргинин- и лизин-богатые олигопептиды, имеющие избыточный положительный заряд. Дополнительно к олигопептидам могут быть присоединены лиганды к определенным рецепторам для направленной и более эффективной доставки в соответствующий тип ткани (Kang et al., 2019).
Одной из серьезных проблем большинства катионных невирусных носителей является крайне низкая эффективность трансфекции в присутствии компонентов плазмы крови и межклеточной жидкости и, как следствие, низкая эффективность трансфекции in vivo. Происходит это вследствие агрегации положительно заряженных комплексов с отрицательно заряженными белками сыворотки и компонентами плазмы крови. Для решения данной проблемы существует несколько подходов. Например, добавление к носителям полиэтиленгликоля (ПЭГ) повышает стерическую устойчивость комплексов. В случае пептидных носителей катионные комплексы могут быть дополнительно покрыты слоем анионных пептидов для электростатического отталкивания комплексов от белков сыворотки (Shmueli et al., 2010).
Ранее в исследованиях, проведенных в нашей лаборатории, была продемонстрирована эффективность комплексов ДНК с катионными и анионными пептидами в экспериментах по трансфекцииin vitro на клеточной линии миобластов мыши C2C12 и in vivo на линии мышей с мутантным геном дистрофина (mdx). Однако вследствие большого объема упаковки, требуемого для образования комплексов с адекватными физико-химическими параметрами, не удается доставлять большое количество ДНК в мышечные клетки, так как объем трансфецирующей смеси ограничен размером мышцы. Малое количество доставляемой ДНК напрямую связано с низкой эффективностью трансфекции. Одним из направлений данной работы является уменьшение объема упаковки комплексов без потери эффективности трансфекции.
Целью работы является изучение катионных и анионных пептидных носителей в качестве транфекционного агента мышечной ткани животных.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучить защитные свойства комплексов, сформированных при различных зарядовых соотношениях пептидных носителей и плазмидной ДНК, а также их физико-химические свойства.
2. Изучить токсические свойства комплексов пептидных носителей с плазмидной ДНК на культуре клеток миобластов мыши С2С12.
3. Изучить трансфекционные свойства комплексов пептидных носителей с плазмидной ДНК на культуре клеток миобластов мыши C2C12.
4. Оценить эффективность доставки репортерных генов in vivo после внутримышечного введения комплексов мышам линии mdx.


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!
ДИПЛОМНЫЕ МАГИСТЕРСКИЕ ДИССЕРТАЦИИ
КУРСОВЫЕ СТАТЬИ ВКР

1. Все типы исследуемых пептидных носителей образуют стабильные комплексы с ДНК.
2. Причиной низкой эффективности трансфекции некоторых комплексов является их крупный размер и слабо положительный дзета-потенциал.
3. Комплексы, образуемые всеми пептидными носителями, не токсичны для культуры клеток C2C12.
4. Уменьшение объема упаковки комплексов в 5 раз в большинстве случаев не снижает эффективность трансфекции культуры клеток C2C12, что позволяет использовать данные типы комплексов в экспериментах in vivo.
5. Увеличение дозы ДНК, вводимой мышам линии mdx внутримышечно, за счет уменьшение объема упаковки изученных комплексов приводит к повышению эффективности трансфекции.



1. Деев Р. В. и др. Результаты 5-летнего наблюдения за пациентами с заболеваниями периферичеких артерий после генной терапии //Вестник Национального медико-хирургического центра им. НИ Пирогова. – 2018. – Т. 13. – №. 3. – С. 61-66.
2. Мельникова Е. В. и др. Мировой опыт регистрации и применения препаратов для генной терапии в клинической практике //Антибиотики и химиотерапия. – 2019. – Т. 64. – №. 1-2. – С. 58-68.
3. Швальб П. Г. и др. Эффективность и безопасность применения препарата «Неоваскулген» в комплексной терапии пациентов с хронической ишемией нижних конечностей (IIb-III фаза клинических испытаний) //Гены и клетки. – 2011. – Т. 6. – №. 3. – С. 76-83.
4. Acsadi G. et al. A differential efficiency of adenovirus-mediated in vivo gene transfer into skeletal muscle cells of different maturity //Human molecular genetics. – 1994. – Т. 3. – №. 4. – С. 579-584.
5. Adams D. et al. Patisiran, an RNAi therapeutic, for hereditary transthyretin amyloidosis //New england journal of medicine. – 2018. – Т. 379. – №. 1. – С. 11-21.
6. Arabi F., Mansouri V., Ahmadbeigi N. Gene therapy clinical trials, where do we go? An overview //Biomedicine & Pharmacotherapy. – 2022. – Т. 153. – С. 113324.
7. Behr J. P. The proton sponge: a trick to enter cells the viruses did not exploit //Chimia. – 1997. – Т. 51. – №. 1-2. – С. 34-34.
8. Bengtsson N. E. et al. Muscle-specific CRISPR/Cas9 dystrophin gene editing ameliorates pathophysiology in a mouse model for Duchenne muscular dystrophy //Nature communications. – 2017. – Т. 8. – №. 1. – С. 14454.
9. Billiet L. et al. Gene transfer by chemical vectors, and endocytosis routes of polyplexes, lipoplexes and lipopolyplexes in a myoblast cell line //Biomaterials. – 2012. – Т. 33. – №. 10. – С. 2980-2990.
10. Boeckle S., Wagner E. Optimizing targeted gene delivery: chemical modification of viral vectors and synthesis of artificial virus vector systems //The AAPS journal. – 2006. – Т. 8. – С. E731-E742.
11. Boulaiz H. et al. Non-viral and viral vectors for gene therapy //Cellular and molecular biology (Noisy-le-Grand, France). – 2005. – Т. 51. – №. 1. – С. 3-22.
12. Cao B., Mytinger J. R., Huard J. Adenovirus mediated gene transfer to skeletal muscle //Microscopy research and technique. – 2002. – Т. 58. – №. 1. – С. 45-51.
13. Chang C. W. et al. Non-ionic amphiphilic biodegradable PEG–PLGA–PEG copolymer enhances gene delivery efficiency in rat skeletal muscle //Journal of Controlled Release. – 2007. – Т. 118. – №. 2. – С. 245-253.
14. Counsell J. R. et al. Lentiviral vectors can be used for full-length dystrophin gene therapy //Scientific reports. – 2017. – Т. 7. – №. 1. – С. 1-10.
15. Cui Z. et al. The Progress of Non-Viral Materials and Methods for Gene Delivery to Skeletal Muscle //Pharmaceutics. – 2022. – Т. 14. – №. 11. – С. 2428.
16. Dhawan J. et al. Systemic delivery of human growth hormone by injection of genetically engineered myoblasts //Science. – 1991. – Т. 254. – №. 5037. – С. 1509-1512.
17. Donnelly J. J., Liu M. A., Ulmer J. B. Antigen presentation and DNA vaccines //American journal of respiratory and critical care medicine. – 2000. – Т. 162. – №. supplement_3. – С. S190-S193.
18. Douglas J. T. Adenovirus-mediated gene delivery to skeletal muscle //Gene Delivery to Mammalian Cells: Volume 2: Viral Gene Transfer Techniques. – 2004. – С. 29-35.
19. Dzierlega K., Yokota T. Optimization of antisense-mediated exon skipping for Duchenne muscular dystrophy //Gene therapy. – 2020. – Т. 27. – №. 9. – С. 407-416.
20. Egorova A. et al. Characterization of iRGD-ligand modified arginine-histidine-rich peptides for nucleic acid therapeutics delivery to αvβ3 integrin-expressing cancer cells //Pharmaceuticals. – 2020. – Т. 13. – №. 10. – С. 300.
21. Egorova A., V Kiselev A. Peptide modules for overcoming barriers of nucleic acids transport to cells //Current topics in medicinal chemistry. – 2016. – Т. 16. – №. 3. – С. 330-342.
22. Elsner C., Bohne J. The retroviral vector family: something for everyone //Virus Genes. – 2017. – Т. 53. – С. 714-722.
23. Floyd S. S. et al. Ex vivo gene transfer using adenovirus-mediated full-length dystrophin delivery to dystrophic muscles //Gene therapy. – 1998. – Т. 5. – №. 1. – С. 19-30.
24. Furling D. et al. Viral vector producing antisense RNA restores myotonic dystrophy myoblast functions //Gene therapy. – 2003. – Т. 10. – №. 9. – С. 795-802.
25. Hattori Y. et al. In vivo siRNA delivery system for targeting to the liver by poly-l-glutamic acid-coated lipoplex //Results in pharma sciences. – 2014. – Т. 4. – С. 1-7.
26. Hattori Y. Progress in the development of lipoplex and polyplex modified with anionic polymer for efficient gene delivery //Journal of Genetic Medicine and Gene Therapy. – 2017. – Т. 1. – №. 1. – С. 003-018.
27. Gaj T., Gersbach C. A., Barbas III C. F. ZFN, TALEN, and CRISPR/Cas-based methods for genome engineering //Trends in biotechnology. – 2013. – Т. 31. – №. 7. – С. 397-405.
28. Ghosh A., Yue Y., Duan D. Viral serotype and the transgene sequence influence overlapping adeno‐associated viral (AAV) vector‐mediated gene transfer in skeletal muscle //The Journal of Gene Medicine: A cross‐disciplinary journal for research on the science of gene transfer and its clinical applications. – 2006. – Т. 8. – №. 3. – С. 298-305.
29. Ghosh D., Barry M. A. Selection of muscle-binding peptides from context-specific peptide-presenting phage libraries for adenoviral vector targeting //Journal of virology. – 2005. – Т. 79. – №. 21. – С. 13667-13672.
30. Godbey W. T., Wu K. K., Mikos A. G. Poly (ethylenimine) and its role in gene delivery //Journal of controlled release. – 1999. – Т. 60. – №. 2-3. – С. 149-160.
31. Gonzalez P. et al. SGT-001 microdystrophin gene therapy for Duchenne muscular dystrophy. – 2021.
32. Harris T. J. et al. Tissue-specific gene delivery via nanoparticle coating //Biomaterials. – 2010. – Т. 31. – №. 5. – С. 998-1006.
33. Hausl M. et al. Development of adenovirus hybrid vectors for Sleeping Beauty transposition in large mammals //Current gene therapy. – 2011. – Т. 11. – №. 5. – С. 363-374.
34. Herweijer H., Wolff J. A. Progress and prospects: naked DNA gene transfer and therapy //Gene therapy. – 2003. – Т. 10. – №. 6. – С. 453-458.
35. Hersh J. et al. Peptide-functionalized dendrimer nanocarriers for targeted microdystrophin gene delivery //Pharmaceutics. – 2021. – Т. 13. – №. 12. – С. 2159.
36. Herson S. et al. A phase I trial of adeno-associated virus serotype 1-γ-sarcoglycan gene therapy for limb girdle muscular dystrophy type 2C //Brain. – 2012. – Т. 135. – №. 2. – С. 483-492.
37. Hou X. et al. Lipid nanoparticles for mRNA delivery //Nature Reviews Materials. – 2021. – Т. 6. – №. 12. – С. 1078-1094.
38. Jeon O. et al. Heparin-conjugated polyethylenimine for gene delivery //Journal of Controlled Release. – 2008. – Т. 132. – №. 3. – С. 236-242.
39. Johnson-Saliba M., Jans D. A. Gene therapy: optimising DNA delivery to the nucleus //Current drug targets. – 2001. – Т. 2. – №. 4. – С. 371-399.
40. Kanadia R. N. et al. Reversal of RNA missplicing and myotonia after muscleblind overexpression in a mouse poly (CUG) model for myotonic dystrophy //Proceedings of the National Academy of Sciences. – 2006. – Т. 103. – №. 31. – С. 11748-11753.
41. Kang Z., Meng Q., Liu K. Peptide-based gene delivery vectors //Journal of Materials Chemistry B. – 2019. – Т. 7. – №. 11. – С. 1824-1841.
42. Kobinger G. P. et al. Correction of the dystrophic phenotype by in vivo targeting of muscle progenitor cells //Human gene therapy. – 2003. – Т. 14. – №. 15. – С. 1441-1449.
43. Kumar P., Nagarajan A., Uchil P. D. Analysis of cell viability by the alamarBlue assay //Cold Spring Harbor Protocols. – 2018. – Т. 2018. – №. 6. – С. pdb. prot095489.
44. Li S. D., Huang L. Gene therapy progress and prospects: non-viral gene therapy by systemic delivery //Gene therapy. – 2006. – Т. 13. – №. 18. – С. 1313-1319.
45. Lim K. R. Q., Maruyama R., Yokota T. Eteplirsen in the treatment of Duchenne muscular dystrophy //Drug design, development and therapy. – 2017. – С. 533-545.
46. Lu Q. L., Bou-Gharios G., Partridge T. A. Non-viral gene delivery in skeletal muscle: a protein factory //Gene therapy. – 2003. – Т. 10. – №. 2. – С. 131-142.
47. Lukashev A. N., Zamyatnin A. A. Viral vectors for gene therapy: current state and clinical perspectives //Biochemistry (Moscow). – 2016. – Т. 81. – №. 7. – С. 700-708.
48. Lundstrom K. Viral vectors in gene therapy //Diseases. – 2018. – Т. 6. – №. 2. – С. 42.
49. Magaña J. J., Cisneros B. Perspectives on gene therapy in myotonic dystrophy type 1 //Journal of neuroscience research. – 2011. – Т. 89. – №. 3. – С. 275-285.
50. McCormack M. P., Rabbitts T. H. Activation of the T-cell oncogene LMO2 after gene therapy for X-linked severe combined immunodeficiency //New England Journal of Medicine. – 2004. – Т. 350. – №. 9. – С. 913-922.
51. Mendell J. R. et al. Assessment of systemic delivery of rAAVrh74. MHCK7. micro-dystrophin in children with Duchenne muscular dystrophy: a nonrandomized controlled trial //JAMA neurology. – 2020. – Т. 77. – №. 9. – С. 1122-1131.
52. Min Y. L. et al. CRISPR-Cas9 corrects Duchenne muscular dystrophy exon 44 deletion mutations in mice and human cells //Science advances. – 2019. – Т. 5. – №. 3. – С. eaav4324.
53. Morgan J. E., Partridge T. A. Muscle satellite cells //The international journal of biochemistry & cell biology. – 2003. – Т. 35. – №. 8. – С. 1151-1156.
54. Mueller C., Flotte T. R. Gene-based therapy for alpha-1 antitrypsin deficiency //COPD: Journal of Chronic Obstructive Pulmonary Disease. – 2013. – Т. 10. – №. sup1. – С. 44-49.
55. Odom G. L. et al. Gene therapy of mdx mice with large truncated dystrophins generated by recombination using rAAV6 //Molecular therapy. – 2011. – Т. 19. – №. 1. – С. 36-45.
56. Ousterout D. G. et al. Multiplex CRISPR/Cas9-based genome editing for correction of dystrophin mutations that cause Duchenne muscular dystrophy //Nature communications. – 2015. – Т. 6. – №. 1. – С. 6244.
57. Philippidis A. Food and drug administration lifts clinical hold on pfizer duchenne muscular dystrophy gene therapy linked to patient death //Human Gene Therapy. – 2022. – Т. 33. – №. 11-12. – С. 573-576.
58. Phua K. K. L., Leong K. W., Nair S. K. Transfection efficiency and transgene expression kinetics of mRNA delivered in naked and nanoparticle format //Journal of Controlled Release. – 2013. – Т. 166. – №. 3. – С. 227-233.
59. Qi R. et al. PEG-conjugated PAMAM dendrimers mediate efficient intramuscular gene expression //The AAPS journal. – 2009. – Т. 11. – С. 395-405.
60. Rauschhuber C., Noske N., Ehrhardt A. New insights into stability of recombinant adenovirus vector genomes in mammalian cells //European journal of cell biology. – 2012. – Т. 91. – №. 1. – С. 2-9.
61. Rejman J. et al. Size-dependent internalization of particles via the pathways of clathrin-and caveolae-mediated endocytosis //Biochemical journal. – 2004. – Т. 377. – №. 1. – С. 159-169.
62. Ricobaraza A. et al. High-capacity adenoviral vectors: expanding the scope of gene therapy //International Journal of Molecular Sciences. – 2020. – Т. 21. – №. 10. – С. 3643.
63. Roudaut C. et al. Restriction of calpain3 expression to the skeletal muscle prevents cardiac toxicity and corrects pathology in a murine model of limb-girdle muscular dystrophy //Circulation. – 2013. – Т. 128. – №. 10. – С. 1094-1104.
64. Sakae M. et al. Highly efficient in vivo gene transfection by plasmid/PEI complexes coated by anionic PEG derivatives bearing carboxyl groups and RGD peptide //Biomedicine & pharmacotherapy. – 2008. – Т. 62. – №. 7. – С. 448-453.
65. Samoylova T. I., Smith B. F. Elucidation of muscle‐binding peptides by phage display screening //Muscle & Nerve: Official Journal of the American Association of Electrodiagnostic Medicine. – 1999. – Т. 22. – №. 4. – С. 460-466.
66. Santana-Armas M. L., de Ilarduya C. T. Strategies for cancer gene-delivery improvement by non-viral vectors //International journal of pharmaceutics. – 2021. – Т. 596. – С. 120291.
67. Sasaki E. et al. Alpha-dystroglycan binding peptide A2G80-modified stealth liposomes as a muscle-targeting carrier for Duchenne muscular dystrophy //Journal of Controlled Release. – 2021. – Т. 329. – С. 1037-1045.
68. Schoenmaker L. et al. mRNA-lipid nanoparticle COVID-19 vaccines: Structure and stability //International journal of pharmaceutics. – 2021. – Т. 601. – С. 120586.
69. Schratzberger P. et al. Transcutaneous ultrasound augments naked DNA transfection of skeletal muscle //Molecular Therapy. – 2002. – Т. 6. – №. 5. – С. 576-583.
70. Scott J. M. et al. Viral vectors for gene transfer of micro-, mini-, or full-length dystrophin //Neuromuscular Disorders. – 2002. – Т. 12. – С. S23-S29.
71. Seow Y., Yin H., Wood M. J. A. Identification of a novel muscle targeting peptide in mdx mice //Peptides. – 2010. – Т. 31. – №. 10. – С. 1873-1877.
72. Shevchenko K. G. Selected issues of the Duchenne Muscular Dystrophy gene and cell therapy //Cellular Therapy and Transplantation. – 2012. – Т. 3. – №. 1 (8).
73. Shmueli R. B., Anderson D. G., Green J. J. Electrostatic surface modifications to improve gene delivery //Expert opinion on drug delivery. – 2010. – Т. 7. – №. 4. – С. 535-550.
74. Shtykalova S. et al. Magnetic Nanoparticles as a Component of Peptide-Based DNA Delivery System for Suicide Gene Therapy of Uterine Leiomyoma //Bioengineering. – 2022. – Т. 9. – №. 3. – С. 112.
75. Shtykalova S. et al. Non-Viral Carriers for Nucleic Acids Delivery: Fundamentals and Current Applications //Life. – 2023. – Т. 13. – №. 4. – С. 903.
76. Suk J. S. et al. PEGylation as a strategy for improving nanoparticle-based drug and gene delivery //Advanced drug delivery reviews. – 2016. – Т. 99. – С. 28-51.
77. Tagalakis A. D. et al. PEGylation improves the receptor-mediated transfection efficiency of peptide-targeted, self-assembling, anionic nanocomplexes //Journal of Controlled Release. – 2014. – Т. 174. – С. 177-187.
78. Takeshima Y. et al. Mutation spectrum of the dystrophin gene in 442 Duchenne/Becker muscular dystrophy cases from one Japanese referral center //Journal of human genetics. – 2010. – Т. 55. – №. 6. – С. 379-388.
79. Thornton C. A. Myotonic dystrophy //Neurologic clinics. – 2014. – Т. 32. – №. 3. – С. 705-719.
80. Valera I. C. et al. Essential roles of the dystrophin-glycoprotein complex in different cardiac pathologies //Advances in medical sciences. – 2021. – Т. 66. – №. 1. – С. 52-71.
81. Volpers C., Kochanek S. Adenoviral vectors for gene transfer and therapy //The Journal of Gene Medicine: A cross‐disciplinary journal for research on the science of gene transfer and its clinical applications. – 2004. – Т. 6. – №. S1. – С. S164-S171.
82. Wang D. et al. The potential of adeno-associated viral vectors for gene delivery to muscle tissue //Expert opinion on drug delivery. – 2014. – Т. 11. – №. 3. – С. 345-364.
83. Wang Z. et al. Gene therapy in large animal models of muscular dystrophy //ILAR journal. – 2009. – Т. 50. – №. 2. – С. 187-198.
84. Wheeler T. M. et al. Reversal of RNA dominance by displacement of protein sequestered on triplet repeat RNA //Science. – 2009. – Т. 325. – №. 5938. – С. 336-339.
85. Wolff J. A. et al. Direct gene transfer into mouse muscle in vivo //Science. – 1990. – Т. 247. – №. 4949. – С. 1465-1468.
86. Wyatt E. J. et al. Efficient exon skipping of SGCG mutations mediated by phosphorodiamidate morpholino oligomers //JCI insight. – 2018. – Т. 3. – №. 9.
87. Xiang S. et al. Uptake mechanisms of non-viral gene delivery //Journal of controlled release. – 2012. – Т. 158. – №. 3. – С. 371-378.
88. Yla-Herttuala S. et al. Improving safety of gene therapy //Current drug safety. – 2008. – Т. 3. – №. 1. – С. 46-53.
89. Yoshimura M. et al. AAV vector-mediated microdystrophin expression in a relatively small percentage of mdx myofibers improved the mdx phenotype //Molecular Therapy. – 2004. – Т. 10. – №. 5. – С. 821-828.
90. Yu C. Y. et al. A muscle-targeting peptide displayed on AAV2 improves muscle tropism on systemic delivery //Gene therapy. – 2009. – Т. 16. – №. 8. – С. 953-962.
91. Zabner J. et al. Cellular and molecular barriers to gene transfer by a cationic lipid //Journal of Biological Chemistry. – 1995. – Т. 270. – №. 32. – С. 18997-19007.
92. Zhang W. et al. Nano-structural effects on gene transfection: large, botryoid-shaped nanoparticles enhance DNA delivery via macropinocytosis and effective dissociation //Theranostics. – 2019. – Т. 9. – №. 6. – С. 1580.
93. Zuidam N. J., Barenholz Y. Electrostatic and structural properties of complexes involving plasmid DNA and cationic lipids commonly used for gene delivery //Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranes. – 1998. – Т. 1368. – №. 1. – С. 115-128.

Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.



Подобные работы


©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ
.