Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
ℹ️Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
1. Введение 3
2. Обзор научной литературы «Колиформные бактерии как гигиенический показатель безопасности воды. Встречаемость энтеробактерии в микробиоте гидробионтовпри гигиеническом контроле водных объектов». 5
2.1 Общая характеристика водных объектов, подлежащих гигиеническому контролю. Структура гигиенического контроля водных объектов в РФ. 5
2.2 Методы выделения и оценки численности колиформных бактерий из водных образцов. 9
2.3 Проблемы гигиенического контроля воды океанариумов и обьектов аквакультуры по численности колиформных бактерий. 11
2.3.1 Встречаемость колиформных бактерий в воде открытых водоемов и в воде при искусственном содержании и разведении гидробионтов. 11
2.3.2 Колиформные бактерии в аквариумистике и в аквакультуре с непрерывной санацией и рециркуляцией воды. 16
2.3.3 Особенности изменения состава колиформных бактерий в условиях непрерывной санации в замкнутых водных системах. 18
3. Объекты и методы исследования. 21
3.1 Характеристика объектов исследования. 21
3.1.1 Характеристика аквариума №4 (рыбы). 21
3.1.2 Характеристика аквариума №1 (черепахи). 22
3.1.3 Характеристики аквариума №11 (выдры). 23
3.2 Определение численности и выделение колиформных бактерий,
очистка изолятов, создание коллекции штаммов, ее поддержание. 24
3.2.1 Определение ОМЧ. 24
3.2.2 Подготовка проб к анализу, процедура восстановления жизнеспособности. 24
3.2.3 Оценка численности общих, термотолерантных колиформ и E.coli. 25
3.2.4 Очистка изолятовколиформ и создание коллекции штаммов. 26
3.2.5 Иидентификация штаммов колиформных бактерий с помощью МИКРОЛАТЕСТ ENTEROtest 24 N(Чехия). 27
4. Результаты и их обсуждение. 30
4.1 Общее микробное число и содержание колиформных бактерий в воде аквариумов с различными гидробионтами. 30
4.2 Выделение колиформных бактерий и создание коллекции штаммов. 32
4.3 Идентификация колиформных бактерий, выделенных из аквариумов с разными гидробионтами. 33
4.3.1 Идентификация колиформных бактерий в воде аквариума № 4 (рыбы). 33
4.3.2 Идентификация колиформных бактерий в воде аквариума № 1 (черепахи). 34
4.3.3 Идентификация колиформных бактерий в воде аквариума № 11 (выдры). 34
4.3.4 Обсуждение результатов идентификации и заключение. 34
5. Выводы. 36
6. Список научной литературы. 37
7. Приложениe. 45
📖 Введение
В настоящее время большое внимание уделяется гигиеническому состоянию аквакультуры, то есть искусственному разведению гидробионтов (с целью получения пищевого сырья) и содержанию гидробионтов в океанариумах и аквапарках в сфере шоу-бизнеса. Современные объекты аквакультуры конструируются с замкнутым оборотом воды, ее фильтрацией и санацией, например, озоном и УФ-излучением. Это приводит к формированию специфических микробиоценозов в санируемой воде.
В современной научной литературе имеется много данных о присутствии в подобных биоценозах патогенных и условно-патогенных бактерий, в первую очередь энтеробактерий, способных повлиять на здоровье объектов аквакультуры, обслуживающего персонала и посетителей. Поэтому предприятия аквакультуры являются объектами как ветеринарного, так и санитарного надзора.
До настоящего момента в отношении объектов аквакультуры в Российской Федерации не существовало специально разработанных критериев гигиенического состояния подобных объектов. При оценке безопасности воды используются гигиенические показатели и нормативы для воды поверхностных водоемов рекреационного типа(СанПин 2.1.5.980-00), в частности общие и термотолерантные колиформы и E.coli. Требования этого документа трудно выполнимы в условиях аквакультуры в условиях замкнутых систем с постоянным высоким уровнем фекального заражения. Необходимо разрабатывать более адекватные требования, учитывающие специфические особенности данных водных объектов.
В настоящий момент вода аквариумов СтПетербургского Океанариума оценивается лабораторией Роспотребнадзора по американскому стандарту Вирджинского аквариума – по показателю E.coli – не более 235 клеток в 100 мл воды.
Однако группой исследователей каф. Микробиологии СПбГУ было показано, что присутствие E.coli в санируемой аквариумной воде СтПетербургского Океанариума очень низкое, на пределе выявления (Цесулис, 2008; Аламмар, 2017). Безусловно, непрерывный режим санации (озонирование, ультрафиолетовое излучение, лечебные препараты для гидробионтов, вносимые в воду), влияют на качественный и количественный состав колиформных бактерий. Поэтому основными представителями колиформных бактерий являются не E.coli, аKlebsiella и Citrobacter(Аламмар, 2017).
Отсутствие E.coli в составе колиформ в аквариумной воде можно объяснить их более высокой чувствительностью к процедуре санации воды и появлению сублетальных и летальных повреждений, что приводит к их вытеснению из накопительных культур при выявлении по официальному методу анализа (МУК 4.2.1884-04). Можно предположить, что на состав колиформных бактерий аквариумной воды может влиять и тип гидробионтов (рыбы, моллюски, членистоногие, рептилии, теплокровные животные).
В 2017 г. Р.А. Вахрушевым (Вахрушев, 2018), сотрудником нашей группы, было показано, что подавляющее количество (до 99%) колиформных бактерий в воде СтПетербургского Океанариума имеют обратимые сублетальные повреждения. Оказалось, что жизнеспособность поврежденных бактерий можно восстановить проведением на первой стадии анализа процедуры восстановления.
Разработанная нашей группой процедура восстановления жизнеспособности колиформ позволяет вернуться к вопросу о присутствииE.coli в санируемой аквариумной воде. Этот вопрос является на сегодняшний день крайне актуальным в связи с настоятельной необходимостью выбора адекватных, корректных и, главное, обоснованных гигиенических показателей аквариумной воды СтПетербургского Океанариума.
В связи с вышеизложенным целью данной работы было изучение состава колиформных бактерий в воде аквариумов с различными гидробионтами СтПетербургского океанариума. Для этого были поставлены следующие задачи:
1.Выделить колиформных бактерий из воды аквариумов с рыбами, рептилиями и теплокровными животными с использованием стадии восстановления жизнеспособности бактерий; оценить содержание колиформных бактерий, очистить изоляты и сформировать коллекцию штаммов.
2. Провести идентификацию штаммов коллекции с использованием высоко эффективного набора для идентификации МИКРОЛАТЕСТ ENTEROtest 24N (Чехия).
3. Дать рекомендации для выбора микробиологических показателей для оценки гигиенического состояния аквариумной воды СтПетербургского Океанариума.
✅ Заключение
1. Качественный состав колиформных бактерий непрерывно санируемой воды изученных аквариумов с рыбами, черепахами и выдрами практически не различается. Представители родов Citrobacterи Klebsiella являются преобладающими.
2. Колиформные бактерии вида E.coli не характерны для аквариумов с замкнутой системой оборота воды и непрерывной санацией УФ независимо от типа содержащихся в них гидробионтов.