Введение 3
1. Литературный обзор 5
1.1 Методы получения пиразоло пиридинового цикла 5
1.1.1. Аннелирование с образованием пиридинового фрагмента 5
1.1.2. Аннелирование с образованием пиразольного фрагмента 12
1.1.3. ужение цикла 14
1.2 Циклизация Рихтера 14
2. Обсуждение результатов 17
3.ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 33
3.1. Синтез галогенпроизводных 3-аминопиридина 33
3.1.1. Галогенирование 3-аминопиридина с использованием бромата и йодата калия 33
3.1.2. Галогенирование 3-аминопиридина с использованием галогенсукцинимидов 34
3.1.3. Галогенирование 3-аминопиридина с получением 3-амино-2,6-дигалогенпиридина 35
3.1.4. Йодирование 3-амино-6-бромпиридина 36
3.2 Получение 3,4,5-триметоксифенилацетилена в три стадии из 5-иод-1,2,3-триметоксибензола 36
3.2.1 Синтез 5-иод-1,2,3-триметоксибензола из 3,4,5-триметоксианилина 36
3.2.2 Синтез Триметил((3,4,5-триметоксифенил)этинил)силана[62] 37
3.2.3. Синтез 3,4,5-триметоксифенилацетилена 38
3.3. Реакция Соногаширы-Хагихары с галогенпроизводными 3-аминопиридина 39
3.4 Получение триазенов из галогенпроизводных 3-аминопиридина 41
3.5 Реакция Соногаширы-Хагихары с галогенпроизвоными триазенов 43
3.6.1. Диазотирование 3-амино-2,6-ди(фенилэтинил)пиридина 45
3.6.2. Циклизация триазена 47
3.6.3 Диазотирование 3-амино-2,6-ди(фенилэтинл)пиридина в среде уксусной и бромоводородной кислот 48
Список используемой литературы 49
Препараты, действующие на тубулин, давно известны как эффективные лекарственные средства для лечения онкологических заболеваний, механизм действия которых базируется на дестабилизации микротрубочек. Они представляют собой внутриклеточные структуры, состоящие из гетеродимеров а- и 0-тубулина и входят в состав цитоскелета. В результате их дестабилизации происходит апоптотическая гибель клеток. Природные соединения - колхицин, эпотилон, винбластин и комбретастатин А-4 (СА4) - воздействуют на микротрубочки, нарушая процессы полимеризации, а также деполимеризации тубулина, что приводит к нарушению митотического деления клеток. Кроме предотвращения полимеризации микротрубочек у СА-4 есть возможность воздействия на сосудистую сеть опухоли за счет избирательного отключения кровотока при разрушении VE-кадгерина, путем взаимодействия с низкими и нетоксичными дозами нейтрализующих моноклональных антител к VE- кадгерину, что блокирует сборку новых сосудов, тем самым ингибируя рост опухоли. Несмотря на низкую молекулярную массу и простоту молекулярной структуры, СА-4 является одним из самых мощных ингибиторов полимеризации тубулина известных на сегодняшний день. Простая структура, состоящая только из двух ароматических колец, связанных двойной связью в ^де-конфигурации, дает большое поле для модификации для получения различных аналогов.
СА-4 обладает двумя недостатками - плохой растворимостью в воде, в результате, которой он показывает низкую эффективность in vivo,а также изомеризацией двойной связи в более термодинамически стабильный транс-изомер, что приводит к полной потери цитотоксичности. Первый недостаток был устранен с помощью синтеза более растворимых пролекарств, путем модификации гидроксильной группы в кольце B. Были получены такие аналоги как натриевая соль фосфбретабулина (CA4P), омбрабулин (AVE8062), ранее известный как AC-7700, в настоящее время выпускаемый французской фармацевтической компанией Sanofi-Aventis а также борилированное производное комбретастатина D. Данные вещества показали схожую
цитотоксичность с молекулой комбрестатина А-4. Проблема изомерии СА-4 была решена путем замены двойной связи этиленового мостика C на гетероциклы [8] такие как пиразол, оксазол, фуразан, 2,3-дегидротиофен, диарилоксазолоны[12], либо заменой на различные мостики с гетероатомами или большим количеством атомов с фиксацией циклов A и B по одну сторону относительно связывающего их мостика C, а также добавлением к нему разнообразных заместителей. Одним из предложенных решений явилась замена этиленового фрагмента кетогруппой, сопряженной с дополнительным гетероциклическим фрагментом. Примером является синтетический аналог комбретастатина А-4 6-метокси-3-(3,4,5-триметоксибензоил)-1Н-индол, который был разработан в 2003 году и проявил высокую активность в отношении ксенотрансплантата карциномы желудка MKN-45, рака шейки матки человека KB и P-gp170/MDR- сверхэкспрессирующих KB-VIN10 клеток (Рисунок 1, BPROL075). Дальнейшие разработки привели к получению гетероаналога BPROL075 - 3-(3,4,5- триметоксибензоил)-6-метокси-1Я-индазола, который показал улучшенную метаболическую стабильность, растворимость и пероральную биодоступность в сравнении с BPROL075. Конечной стадией синтеза данного гетероаналога комбретастатина А4 является реакция Рихтера.
В виалу, объемом 10 мл снабженную магнитной мешалкой поместили 0,147 г (0.005 моль, 1 экв.) 3-амино-2,6-ди(фенилэтинил)пиридина, после чего медленно, при перемешивании, добавили 3мл охлажденной до 0 °С смеси уксусной и бромоводорной кислот в соотношении 1:1 (безводная смесь), затем ставили на ледяную баню и при перемешивании доводили температуры реакционной смеси до -5°С. После медленно добавляли 0,567 г (0,0055 моль, 1.1 экв.)третбутилнитрит, затем смесь перемешивали при -5°С в течение часа, после оставляли перемешиваться на ночь при комнатной температура. На следующий день реакционную смесь переносили в делительную воронку на 250 мл, добавили 50 мл этилацетата, полученную органическую фазу промывали 50 мл*2 одномолярным раствором гидроксида натрия, 20 мл насыщенным раствором хлорида натрия. Затем объединенные водные фазы экстрагировали 50 мл этилацетата, полученную орагническую фазу промывали 50 мл*2 одномолярным раствором гидроксида натрия, 20 мл насыщенным раствором хлорида натрия. Затем объединенные органические фазы перенесли в плоскодонную колбу на 250 мл, добавили безводный сульфат магния. Оставили сушиться на ночь.
На следующий день через фильтр Шотта избавились от осушителя, промыв после его 20 мл этилацетата. Растворитель удаляли при пониженном давлении на роторном испарителе. Продукт очищали методом препаративной жидкостной хроматографии (элюирующая система этилацетат-гексан 1:5) 3-бром-2,6- ди(фенилэтинил)пиридин.
