Введение
Актуальность
Цель и задачи исследования
Практическая значимость работы
Глава 1. Литературный обзор
1.1 Этиология и патогенез
воспалительных заболеваний пародонта……………………..………………..11
1.2 Этапы и механизмы формирования наддесневой зубной бляшки,
значение ее биохимической деятельности………………………………………...…………………….…..…16
1.3 Пародонтопатогены и факторы их вирулентности…...…………..………18
1.3.1 Классификация пародонтальных микробных комплексов………….......18
1.3.2 Факторы и механизмы патогенности…………………………………..…19
1.3.3Porphyromonas gingivalis
1.3.4Tannerella forsythia…
1.3.5 Treponema denticola
1.3.6 Prevotella intermedia
1.4 Профессиональная гигиена полости рта………………………………….28
1.4.1 Принципы работы ультразвуковых, воздушно-абразивных и вращающихся инструментов
1.4.2Влияние профессиональной гигиены полости рта на микробиоту пародонтальных карманов у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1 Клиническая характеристика пациентов…………………………..……..40
2.2 Оценка стоматологического статуса…………………...…………..………43
2.3Оценка ортопантомограмм…………………………………………………50
2.4Микробиологические и генетические методы исследования…………….51
2.4.1Забор материала……………………………………………………….…51
2.4.2 Конструирование олигонуклеотидных праймеров…………………...51
2.4.3 Выделение тотальной ДНК из исходного биологического материала
2.4.4 Полимеразная цепная реакция (ПЦР)…………………………….…….53
2.4.5 Электрофорез ДНК
2.5 Статистическая обработка данных, полученных в результате клинических, рентгенологических и микробиологических методов обследования
Глава 3. Результаты исследований
3.1 Результаты клинических исследований…………………………………..56
3.2 Результаты оценки пародонтологического статуса пациентов до ПГПР
3.2.1Состояние тканей пародонта у пациентов трех групп обследованных до ПГПР
3.2.2Данные объективного обследования пациентов
3.2.3Значения стоматологических индексов до проведения профессиональной гигиены полости рта
3.3 Результаты оценки пародонтологического статуса пациентов после ПГПР
3.3.1 Динамика показателей стоматологических индексов……………..….69
3.4 Данные рентгенологического исследования………………………….…77
3.5 Данные микробиологических исследований……………………….……78
Глава 4.Заключение и выводы
Заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы
Приложение
Для того, чтобы построить устойчивое здание, нужно заложить прочный фундамент, который будет являться гарантом его стабильности. Пародонт – «фундамент» для зубов. При его разрушении проявляются клинические симптомы в виде кровоточивости десен, неприятного запаха из полости рта, болезненности при приеме пищи, подвижности зубов, утраты зубов.
Воспалительные заболевания пародонта (ВЗП) являются одними из наиболее распространенных заболеваний взрослого населения во всем мире (Мамедов Р.М.,2009).
По данным, предоставленным ВОЗ (ВОЗ, 1990; Губин М. А. и др., 2006; Грудянов А. И., Овчинникова В. В., 2007), распространенность заболеваний пародонта в возрастной группе 35-44 лет имеет следующие значения:
-у 5-25% населения имеется тяжелая степень течения пародонтита;
-пародонтит средней степени тяжести имеют 30-45% населения;
-легкое течение пародонтита наблюдается у 22-63% населения.
И лишь у 2-8% обследованных данной возрастной группы отсутствуют заболевания пародонта.
У молодых людей возрастной группы 15-19 лет болезни пародонта встречаются в 55-99% случаев (Гуляева О.А., Булаков Р.Т., 2016).
Распространенность ВЗП не имеет тенденции к снижению. ВЗП приводят к появлению дефектов зубных рядов, снижая качество жизни населения. Обладают комплексным характером поражения с вовлечением в патологический процесс других органов и систем. ВЗП сопровождаются нарушениями в различных звеньях гомеостаза организма человека (Курякина Н.В.,2007).
Хронический генерализованный пародонтит (ХГП) тяжелой степени повышает риск возникновения инфаркта миокарда в 3 раза, атеросклеротических поражений сосудов - в 2 раза, сахарного диабета - в 11 раз, хронического бронхита - в 2-4 раза, преждевременных родов - в 8 раз, инсульта - в 2 раза (Артюшкевич А.С., Латышева С.В., Наумович С.А., Трофимова Е.К., 2006).
Нередко ХГП является проявлением системного заболевания организма и требует специального лечения (Николаев А.И., Наконечный Д.А., 2015).
Эти факты должны являться веским аргументом в стремлении специалистов уделять лечению и профилактике заболеваний пародонта большее внимание.
Известно, что ведущую роль в этиологии ХГП играют микроорганизмы поддесневой зубной бляшки (Леонтьев А.А., 2010; Грудянов А. И., Овчинникова В. В., 2007; Пузин М. Н. и др., 2008; Mira A, Simon-Soro A, Curtis M.A., 2017).
Следовательно, удаление зубной бляшки является базовой процедурой пародонтальной терапии и профилактики заболеваний пародонта. Более того, своевременное и тщательное удаление зубных отложений является неотъемлемой частью как стоматологической, так и общемедицинской санации.
В исследованиях отечественных ученых ведется дискуссия об эффективности удаления зубного налета различными методами. Такие авторы как С.В. Порийский, И.В. Фирсова (2016) считают, что не все методики удаления зубного налета одинаково эффективны.
Исследователи, врачи-стоматологи признают необходимость микробиологического контроля ПГПР для оценки эффективности проведенного вмешательства и планирования дальнейшего местного и общего консервативного лечения ВЗП (Грудянов А. И., Овчинникова В. В., 2007; Пузин М. Н. и др., 2008).
Контроль эффективности лечения ХГП при помощи метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) является надежным способом оценки эффективности проводимого лечения (Гуляева О.А., Булаков Р.Т., 2016).
Таким образом, до сих пор не существует четких рекомендаций, указывающих на наиболее эффективный метод удаления зубных отложений в комплексном лечении ХГП. Важность дальнейшего изучения эффективности различных методов удаления зубного налета и их влияния на качественный состав микробиоты пародонтальных карманов послужили основанием для проведения данного исследования.
Цель исследования:
Клинико-микробиологическая оценка эффективности методов профессиональной гигиены полости рта в комплексном лечении пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом различной степени тяжести.
Задачи исследования:
1. Изучить качественный состав микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой, средней и тяжелой степеней тяжести.
2. Изучить влияние методов профессиональной гигиены полости рта на клинико-микробиологические показатели у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой, средней и тяжелой степени тяжести.
3. Провести сравнительный анализ эффективности современных методов профессиональной гигиены полости рта в комплексном лечении пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой, средней и тяжелой степеней тяжести.
Практическая значимость исследования:
В ходе исследования было проведено клиническое и микробиологическое (ПЦР-скрининг) обследование пациентов с ХГП легкой, средней и тяжелой степени тяжести, в результате которого были выявлены пародонтопатогены «красного» и «оранжевого» комплексов - P. gingivalis,T. denticola,T. forsythia, P. intermedia.
На основании клинико-микробиологических данных проведен сравнительный анализ эффективности применения двух методов профессиональной гигиены полости рта у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом различной степени тяжести:
а) c помощью ручных инструментов (кюреты, скейлеры) и ультразвукового скейлера с последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами.
б) с использованием ультразвукового скейлера, воздушно-абразивной системы Air Flow в сочетании с порошком на основе глицина Air-Flow Perio и последующей полировки поверхности зубов вращающимися инструментам.
Целью настоящего исследования являлась оценка эффективности различных методов профессиональной гигиены полости рта в комплексном лечении пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом различной степени тяжести.
В ходе исследования была изучена динамика значений стоматологических, пародонтологических индексов и индекса кровоточивости (ВОР), особенности качественного состава микробиоты пародонтальных карманов между пациентами трех групп до и после проведения ПГПР по двум различным методикам. Проведена оценка роли пародонтопатогенов в развитии ХГП в группах пациентов с легкой, средней и тяжелой степенью тяжести ХГП.
В соответствии с поставленными задачами было проведено обследование 34 пациентов (22 женщины и 12 мужчин) в возрасте от 36 до 63 лет (M±m=49,82±1,09) с ХГП легкой, средней и тяжелой степени тяжести без тяжелой сопутствующей патологии.
Были собраны жалобы пациентов и анамнез; использованы клинические, рентгенологические и микробиологические методы исследования.
Пациенты были разделены на 3 группы, в каждой из которых мы выделили 2 подгруппы в зависимости от использованных методов ПГПР:
1 группу составили 11 пациентов с ХГП легкой степени тяжести. Подгруппа 1а - 5 пациентов с ХГП легкой степени тяжести, у которых ПГПР осуществлена с помощью ручных инструментов (кюреты, скейлеры) и ультразвукового скейлера с последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами.
Подгруппа 1б - 6 пациентов с ХГП легкой степени тяжести, у которых ПГПР проведена с использованием ультразвукового скейлера, воздушно-абразивной системы Perio Flow в сочетании с порошком на основе глицина Air-Flow Perio и последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами.
Во 2 группу вошли 12 пациентов с ХГП средней степени тяжести.
Подгруппа 2а - 6 пациентов с ХГП средней степени тяжести, у которых ПГПР осуществлена с помощью ручных инструментов (кюреты, скейлеры) и ультразвукового скейлера с последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами.
Подгруппа 2б - 6 пациентов с ХГП средней степени тяжести, у которых ПГПР проведена с использованием ультразвукового скейлера, воздушно-абразивной системы Perio Flow в сочетании с порошком на основе глицина Air-Flow Perio и последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами.
В 3 группу вошли 11 пациентов с ХГП тяжелой степени.
Подгруппа 3а - 6 пациентов с ХГП тяжелой степени тяжести, у которых ПГПР осуществлена с помощью ручных инструментов (кюреты, скейлеры) и ультразвукового скейлера с последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами.
Подгруппа 3б - 5 пациентов с ХГП тяжелой степени тяжести, у которых ПГПР проведена с использованием ультразвукового скейлера, воздушно-абразивной системы Perio Flow в сочетании с порошком на основе глицина Air-Flow Perio и последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами.
Было получено статистически значимое снижение предъявляемых жалоб у пациентов 1 группы обследованных на попадание пищи между зубами после ПГПР (р< 0,05). Также было выявлено статистически значимое снижение предъявляемых жалоб у пациентов 2 группы обследованных на смещение зубов и попадание пищи между зубами после ПГПР (р<0,05). У пациентов 3 группы обследованных было получено статистически значимое снижение предъявляемых жалоб на смещение зубов, попадание пищи между зубами и воспаление десен после ПГПР (р<0,05).
В пределах подгрупп не было выявлено статистически значимых различий (p>0,05).
Согласно данным объективного обследования наблюдалось статистически значимое снижение гиперемии десневого края и экссудации после проведения ПГПР во всех группах пациентов (р<0,01).
Результаты, полученные при проведении клинического исследования, подтверждают статистически значимое снижение уровня гигиенических и пародонтологических индексов и индекса кровоточивости (ВОР) (p<0,05), за исключением индекса CPITN (р>0,05) у пациентов 2 и 3 группы. Было доказано статистически значимое снижение значений индексов OHI-S, PMA, BOP, Silness-Loe (p<0,05) у пациентов подгруппы «б» относительно значений данных индексов у пациентов подгруппы «а».
В ходе работы было выявлено, что уровень пародонтологических индексов (РМА, ВОР, CPITN) находиться в прямой зависимости от степени тяжести ХГП, что подтверждено весьма высоким уровнем их корреляции с достоверностью р=0,05.
Исходя из данных ортопантомограмм всех пациентов в 100% наблюдений было выявлено разрушение компактной пластинки альвеолярной кости на всем протяжении зубного ряда. У всех пациентов были выявлены генерализованные (в области не менее 4 зубов) костные карманы в среднем в области 11,3±2,6 зубов (табл. 12).
У обследованных пациентов по мере прогрессирования ХГП наблюдается статистически значимое увеличение количества костных карманов (р=0,01).
Проведенное ПЦР–исследование на пародонтопатогены выявило наличие пародонтопатогенов «красного» (P. gingivalis,T. forsythia, T. denticola) и «оранжевого» (P. intermedia) комплексов, которые обладают агрессивным действием на пародонт, вызывая сильную кровоточивость десен и быстрое течение деструктивных процессов в пародонте.
Из результатов ПЦР-скрининга видно, что наиболее часто выявлялся пародонтопатоген Treponemа denticolа – 79% наблюдений из всех обследованных пациентов. Porphyromonas gingivalis и Tanerella forsythia были обнаружены в 74% и 68% случаев соответственно. Эти микроорганизмы в 73% случаев выявлялись в комплексе с Treponemа denticolа у пациентов с ХГП тяжелой степени тяжести, то есть участвовали в формировании «красного» комплекса пародонтопатогенов. Prevotella intermedia была обнаружена в 24% образцов.
В 100% образцов выявлялось наличие хотя бы одного пародонтопaтогена «красного комплекса», но только в 41% случаев наблюдалось наличие всех трех пародонтопатогенов данного комплекса, наиболее часто такое сочетание наблюдалось у пациентов с ХГП тяжелой степени тяжести.
При изучении полученных результатов между тремя группами пациентов, у обследованных с ХГП тяжелой степени тяжести до проведения ПГПР (3 группа пациентов), по сравнению со 1 и 2 группой пациентов, следует отметить статистически значимый рост частоты встречаемости T. denticola (91%), P. gingivalis (91%) и T. forsythia (91%) при p=0,001.
У пациентов 2 группы со средней степенью тяжести пародонтита до проведения ПГПР, по сравнению с 1 и 3 группой пациентов, в ходе развития ХГП также наблюдали статистически значимый рост обнаружения T. denticola (92%) , T. forsythia (92%) одновременно с статистически значимым падением P. gingivalis (58%) при p=0,001.
В 1 группе пациентов с ХГП легкой степени тяжести до проведения ПГПР, по сравнению с пациентами 2 группы, был выявлен статистически значимый рост обнаружения P. gingivalis (73%) одновременно с значительным падением T. forsythia (18%) и T. denticola (55%). В то время как по сравнению с пациентами 3 группы было выявлено статистически значимое снижение уровня P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola p=0,001.
Следует отметить, что в ходе ПЦР-скрининга у пациентов 1 группы обнаружены самые низкие показатели встречаемости пародонтопатогенов среди трех групп обследованных пациентов при р =0,001.
Таким образом, с развитием ХГП очевидна возрастающая динамика обнаружения пародонтопатогенов «красного» комплекса, которая сопровождается более интенсивным образованием комплексов пародонтопатогенов.
В группе пациентов с легкой степенью тяжести ХГП была выявлена полная элиминация всех микроорганизмов «красного» и «оранжевого» комплексов при использовании метода удаления зубных отложений «б» (с использованием ультразвукового скейлера, воздушно-абразивной системы Perio Flow в сочетании с порошком на основе глицина Air-Flow Perio и последующей полировки поверхности зубов вращающимися инструментами). В то время как, при использовании метода «а» (с использованием ручных инструментов и ультразвукового скейлера с последующей полировкой поверхности зубов вращающимися инструментами) обнаружена частичная элиминация микроорганизмов – T. denticola, P. gingivalis, P. intermedia, по сравнению с методом «б». Данные результаты свидетельствуют о том, что в подгруппе обследуемых «а» в будущем возможен рецидив ХГП (табл. 15).
В группе пациентов со средней степенью тяжести ХГП было выявлено снижение уровня микробной обсемененности. При использовании методов «а» и «б» была выявлена полная элиминация микроорганизмов T. fosithya и P. intermedia. Метод «б» показал себя более результативным в сравнении с методом «а» по снижению встречаемости в образцах - P. gingivalis и T. denticola (табл.15).
В группе пациентов с тяжелой степенью тяжести ХГП была выявлена полная элиминация микроорганизмов T. forsythia, P. intermedia, T. denticola и частичная элиминация P.gingivalis при использовании метода удаления зубных отложений «б». В то время как, при использовании метода «а» была выявлена полная элиминация T. forsythia, P. intermedia и частичная элиминация микроорганизмов - P. gingivalis и T. denticola. Данные микроорганизмы относятся к пародонтопатогенам «красного комплекса», что говорит о высоком риске прогрессирования ХГП у данной подгруппы пациентов (табл. 15).
Наиболее эффективным методом ПГПР у трех групп обследованных пациентов с различной степенью тяжести ХГП является метод «б» (с использованием ультразвукового скейлера, воздушно-абразивной системы Perio Flow в сочетании с порошком на основе глицина Air-Flow Perio и последующей полировки поверхности зубов вращающимися инструментами), что было доказано с помощью данных клинико-микробиологического обследования.
Использование в качестве средства профессиональной гигиены аппарата Perio Flow с порошком на основе глицина позволяет обеспечить полноценное удаление поддесневого налета и биопленки. Данный прибор позволяет устранить микронеровности и достичь максимальной гладкости поверхности корня с помощью распыления водно-воздушной струи с тонкодисперсным чистящим порошком в трех плоскостях. Perio Flow работает без соприкосновения с тканями, не травмируя их, в щадящем для пациента режиме. В то время как при обработке поверхности корня ручными инструментами необходимо затрачивать большее количество времени на процедуру, возможны травма зубодесневого прикрепления и неполное удаление микробной биопленки из-за отсутствия визуального контроля.
Метод удаления зубных отложений с использованием ручных инструментов является менее эффективным по сравнению с методом, в котором используется аппарат Perio Flow, что согласуется с данными проделанной работы и исследованиями Гуляевой О.А., Булякова Р.Т., Чемикосовой Т.С., Тухватулиной Д.Н. (2012г.).
В результате проведения данного научного исследования все поставленные цели и задачи были выполнены и сделаны соответствующие выводы.
1) Артюшкевич А.С., Латышева С.В., Наумович С.А. «Заболевания периодонта: руководство для врачей-стоматологов» - М.: Медицинская литература, 2006 – 328 с.
2) Артюшевич А.С., Трофимова Е.К., Латышева С.В. Клиническая периодонтология: Практ.пособие. - Москва, 2002. - 303с.
3) Боровский Е. В., Леонтьев В. К. Биология полости рта. – Москва,2001. – 303с.
4) Боровский Е. В. Терапевтическая стоматология: Учебник для студентов медицинских вузов. – Москва, 2003. – 840с.
5)Григорьян А. С., Грудянов А. И., Рабухина Н. А. Болезни пародонта: Патогенез, диагностика, лечение. – Москва, 2004. – 320 с.
6)Григорьян А. С., Рахметова С. Ю., Зырянова Н. В. Микроорганизмы в заболеваниях пародонта: этиология, патогенез, диагностика. – Москва, 2007. – 56 с.
7)Грудянов А.И., Москалев К.Е. Инструментальная обработка поверхности корней зубов. – М.: ООО «МИА», 2005. 72 с.
8)Грудянов А.И., Безрукова И.А., Охапкина Н.Б. Распространенность
воспалительных заболеваний пародонта и подходы к их лечению // Пародонтология. –2000. - № 2. – С. 31-38
9)Гуляева О.А., Буляков Р.Т., Чемикосова Т.С., Тухватулина Д.Н. «Применение метода Perio-Flow в комплексном лечении пародонтита средней степени тяжести» // Проблемы стоматологии. – 2012. – № 2. – С. 14-18.
10) Дмитриева Л. А. «Пародонтология: национальное руководство» - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2014. - 704 с.
11)Елисеева А.Ф., Цимбалистов А.В., Шторина Г.Б. «Роль смешанной инфекции в развитии хронического генерализованного пародонтита и ишемической болезни сердца» // Институт стоматологии. – 2012. - №2. –С. 78-79.
12)Еловикова Т.М. Арифметика пародонтологии : Ручные инструменты в пародонтологии / М.: МЕДпресс-информ, 2006. – 80с.
13)Кунин А.А., Ерина С.В., Попова Т.А. и др. Влияние различных способов снятия зубных отложений на микроструктуру твердых тканей зуба // Пародонтология. 2010.№2. С. 33-36.
14)Курякина Н.В. Заболевания пародонта. – М.: Медицинская книга, Н. Новгород: издательство НГМА. 2007. – 292 с.
15)Лукиных Л.М., Жулев Е.Н., Чупрунова И.Н. Болезни пародонта (клиника, диагностика, лечение и профилактика). – Н.Новгород., 2005. – 321 с.
16)Лукиных Л.М. Профилактика кариеса зубов и болезней пародонта. – М.:Медицинская книга, 2003. – 196 с.
17)Луцкая И.К. Болезни пародонта. – М.: Мед. лит., 2010. – 256 с
18)Мамедов М.М. Сравнительная оценка эффективности комплексного лечения разных форм течения воспалительных заболеваний пародонта // Клиническая стоматология. – 2009. - №3. – с. 84-86.
19)Мюллер Х. П. Пародонтология. Науч. ред. изд. на русск. яз. проф. А. М. Политун, пер. с нем. – Львов, 2004. – 256 с.
20)Ричард Дж. Ламонт, Роберт А. Берне. Микробиология и иммунология для стоматологов. Под ред. проф. В.К. Леонтьева. – Москва, 2010. – 502 с.
21)Царев В. Н.,«Микробиология, вирусология и иммунология полости рта: учебник»М. : ГЭОТАР-Медиа, 2013. - 576 с.
22)Цимбалистов А.В., Шторина Г.В., Михайлова Е.С. Инструментальное обеспечение профессиональной гигиены полости рта. – Санкт-Петербург, 2003. – 80 с.
23)Цепов Л. М., Николаев А. И., Михеева Е. А. Диагностика, лечение и профилактика заболеваний пародонта, 3-е изд. - Москва, 2008. – 272с.
Многотомное издание
1) Барер Г.М. Терапевтическая стоматология, часть 2. Заболевания пародонта. - Москва, 2013. – 224 с.
Дополнительная литература
Книги
Однотомные издания
1) Кузьмина Э.М. «Профилактика стоматологических заболеваний» - Тонга-принт – Москва – 2001, 216 с.
Диссертации на соискание научных степеней
1)Москалев К.Е. «Сравнительная оценка различных методов инструментальной обработки поверхности корней зубов при лечении воспалительных заболеваний пародонта» – Москва – 2005, 116 с.
2)Махмутова А.Ф. «Эффективность комплексного восстановительного лечения больных воспалительными заболеваниями пародонта» – Москва, 2009. – с. 18.
3) Караева, А.Ю. «Клинико-функциональное значение компонентов комплексного лечения генерализованного пародонтита» – СПб., 2007.- 19 с.
Статьи в научных периодических изданиях
1) Ainamo, J., andI. Bay. “Problems and Proposals for Recording Gingivitis and Plaque.” International Dental Journal 25, no. 4 (December 1975): 229–35.
2) Ainamo, J., D. Barmes, G. Beagrie, T. Cutress, J. Martin, and J. Sardo-Infirri. “Development of the World Health Organization (WHO) Community Periodontal Index of Treatment Needs (CPITN).” International Dental Journal 32, no. 3 (September 1982): 281–91.
3) Fleszar, Thomas J., James W. Knowles, Edith C. Morrison, Frederick G. Burgett, Robert R. Nissle, and Sigurd P. Ramfjord. “Tooth Mobility and Periodontal Therapy.” Journal of Clinical Periodontology 7, no. 6 (1980): 495–505.
4) Haffajee, Anne D., and Sigmund S. Socransky. “Microbial Etiological Agents of Destructive Periodontal Diseases.” Periodontology 2000 5, no. 1 (1994): 78–111.
5) Miller Jr PD. A classification of marginal tissue recession. International Journal of Periodontics & Restorative Dentistry 1985; 5: 8–13.
6) Socransky, S. S., and A. D. Haffajee. “Periodontal Microbial Ecology.” Periodontology 2000 38, no. 1 (2005): 135–87.
7) Torresyap, G., A. D. Haffajee, N. G. Uzel, and S. S. Socransky. “Relationship between Periodontal Pocket Sulfide Levels and Subgingival Species.” Journal of Clinical Periodontology 30, no. 11 (2003): 1003–10.