📄Работа №132645
Тема: Молекулярный профиль регуляторных белков сигнального пути Wnt/b-катенин в опухолевой ткани и раковых стромальных клетках предстательной железы
Тип работы
Бакалаврская работа
Предмет
биология
Объем:
32 листов
Год:
2018
Просмотров:
59
4800
руб.
🛒 Купить работу
Не подходит эта работа?
Закажите новую по вашим требованиям
Узнать цену на написание
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
📋 Содержание
Список сокращений 4
Введение 5
Глава 1. Обзор литературы 7
1.1. Описание сигнального пути Wnt/b-катенин 7
1.2. Механизм эпителиально-мезенхимального перехода и роль b-катенина 9
1.3. Маркер рака AMACR как потенциальная мишень b-катенина, роль микроРНК26 и микроРНК138 11
1.4. Взаимодействие между стромальными и эпителиальными клетками простаты, роль экзосом 14
Глава 2. Материалы и методы 15
2.1. Получение первичных культур стромальных клеток предстательной железы человека 15
2.2. Пассирование первичных культур клеток простаты 15
2.3. Депонирование первичных культур клеток простаты 16
2.4. Получение экстрактов из ткани и стромальных клеток простаты, определение концентрации белка 16
2.5. Белковый электрофорез в денатурирующих условиях 17
2.6. Иммуноблот 17
2.7. Антитела 17
Глава 3. Результаты 18
3.1. Сравнительный анализ уровня различных изоформ виментина в нормальной и опухолевой ткани простаты и производных культурах стромальных клеток 18
3.2. Сравнительный анализ уровня b-катенина и AMACR в нормальной и опухолевой ткани простаты и производных культурах стромальных клеток 21
Глава 4. Обсуждения 26
Выводы 27
Список литературы 28
Публикации по теме ВКР 32
Введение 5
Глава 1. Обзор литературы 7
1.1. Описание сигнального пути Wnt/b-катенин 7
1.2. Механизм эпителиально-мезенхимального перехода и роль b-катенина 9
1.3. Маркер рака AMACR как потенциальная мишень b-катенина, роль микроРНК26 и микроРНК138 11
1.4. Взаимодействие между стромальными и эпителиальными клетками простаты, роль экзосом 14
Глава 2. Материалы и методы 15
2.1. Получение первичных культур стромальных клеток предстательной железы человека 15
2.2. Пассирование первичных культур клеток простаты 15
2.3. Депонирование первичных культур клеток простаты 16
2.4. Получение экстрактов из ткани и стромальных клеток простаты, определение концентрации белка 16
2.5. Белковый электрофорез в денатурирующих условиях 17
2.6. Иммуноблот 17
2.7. Антитела 17
Глава 3. Результаты 18
3.1. Сравнительный анализ уровня различных изоформ виментина в нормальной и опухолевой ткани простаты и производных культурах стромальных клеток 18
3.2. Сравнительный анализ уровня b-катенина и AMACR в нормальной и опухолевой ткани простаты и производных культурах стромальных клеток 21
Глава 4. Обсуждения 26
Выводы 27
Список литературы 28
Публикации по теме ВКР 32
📖 Введение
Рак простаты является вторым по частоте раковым заболеванием у лиц мужского пола. Механизмы возникновения и развития этого заболевание разнообразны и не до конца изучены. Одной из возможных причин рака предстательной железы является нарушение сигнального пути Wnt/b-катенина, в норме участвующего в регуляции эмбриогенеза, а после рождения - в регуляции пролиферации клеток различной тканевой специфичности. Ключевым участником этого сигнального пути является b-катенин, формирующие в клетке в цитоплазматический и мембранный популяции, выполняющие различные функции. При связывании лиганда Wnt c рецептором плазматической мембраны b-катенин накапливается в цитоплазме и транслоцируется в ядро, в котором он активирует различные транскрипционные факторы, индуцирующие эпителиальномезенхимальный переход (ЭМП). В свою очередь, ЭМП лежит в основе феномена приобретения раковыми клетками способности к миграции и метастазированию. В опубликованной литературе есть данные, что фермент ацилметил-КоА-рацемаза (AMACR), локализованный в митохондриях и пероксисомах, и необходимый для метаболизма жирных кислот, может быть мишенью Р-катенина. AMACR является надежным диагностическим маркером рака простаты, повышение его продукции позволяет раковым клеткам получать дополнительную энергию , что способствует активации пролиферации и развитию опухоли.
Цель данной работы: характеристика уровня b-катенина и AMACR в опухолевой ткани предстательной железы и производных культурах стромальных клеток.
Задачи работы:
1. Получить первичные культуры стромальных клеток из нормальной и опухолевой ткани простаты 6 пациентов, подвергнутых радикальной простатэктомии.
2. Выявить и охарактеризовать в опухолевой и окружающей нормальной ткани предстательной железы и производных стромальных клетках, продукцию виментина — маркера клеток мезенхимного происхождения.
3. Охарактеризовать с помощью иммуноблота уровень экспрессии b-катенина и AMACR в опухолевой и окружающей нормальной ткани простаты и полученных из неё первичных культурах стромальных клеток.
4. Охарактеризовать по уровню продукции в опухолевой и окружающей нормальной ткани предстательной железы и производных стромальных клетках возможную взаимосвязь между b-катенином и AMACR.
Цель данной работы: характеристика уровня b-катенина и AMACR в опухолевой ткани предстательной железы и производных культурах стромальных клеток.
Задачи работы:
1. Получить первичные культуры стромальных клеток из нормальной и опухолевой ткани простаты 6 пациентов, подвергнутых радикальной простатэктомии.
2. Выявить и охарактеризовать в опухолевой и окружающей нормальной ткани предстательной железы и производных стромальных клетках, продукцию виментина — маркера клеток мезенхимного происхождения.
3. Охарактеризовать с помощью иммуноблота уровень экспрессии b-катенина и AMACR в опухолевой и окружающей нормальной ткани простаты и полученных из неё первичных культурах стромальных клеток.
4. Охарактеризовать по уровню продукции в опухолевой и окружающей нормальной ткани предстательной железы и производных стромальных клетках возможную взаимосвязь между b-катенином и AMACR.
✅ Заключение
Выводы:
1. Получены, криоконсервированы и деконсервированы для роста в in vitro шесть культур стромальных клеток, полученных из нормальной и опухолевой ткани предстательной железы пациентов, подвергнутых операции по поводу рака предстательной железы.
2. С помощью электрофореза в денатурирующих условиях и иммуноблота нами впервые установлено, что маркер мезенхимных клеток виментин продуцируется в ткани простаты и производных стромальных клетках в виде 4-х изоформ с различной ММ. Продукция общеклеточного виментина возрастает в производных стромальных клетках по сравнению с исходной тканью простаты. Для опухолевой ткани простаты характерен высокий уровень медленно подвижной 57 кДа изоформы виментина по сравнению с нормальной тканью. Стромальные клетки, полученные из опухолевой ткани простаты 50% пациентов, выявляют повышенный уровень «легких» 50 и 42 кД изоформ виментина по сравнению с контролем.
3. Нами впервые установлено, что b-катенин ткани простаты и производных стромальных клеток при электрофореза в денатурирующих условиях и иммуноблоте представлен двумя мажорными медленно- и быстро подвижной формами. Общий уровень b-катенина выше в исходных тканях по сравнению с производными стромальными клетками. В опухолевой ткани 5 из 6 пациентов найден более высокий уровень быстроподвижной формы b- катенина по сравнению с нормальной тканью. Эти отличия не сохраняются в производных стромальных клетках.
4. Нами впервые обнаружена продукция эпителиального маркера AMACR в стромальных клетках, производных из ткани простаты. Уровень AMACR в стромальных клетках, полученных из нормальной и опухолевой ткани предстательной железы пациентов был выше, чем в исходных тканях. Мы не выявили зависимости между уровнем b-катенина и AMACR в тканях и производных стромальных клетках простаты.
1. Получены, криоконсервированы и деконсервированы для роста в in vitro шесть культур стромальных клеток, полученных из нормальной и опухолевой ткани предстательной железы пациентов, подвергнутых операции по поводу рака предстательной железы.
2. С помощью электрофореза в денатурирующих условиях и иммуноблота нами впервые установлено, что маркер мезенхимных клеток виментин продуцируется в ткани простаты и производных стромальных клетках в виде 4-х изоформ с различной ММ. Продукция общеклеточного виментина возрастает в производных стромальных клетках по сравнению с исходной тканью простаты. Для опухолевой ткани простаты характерен высокий уровень медленно подвижной 57 кДа изоформы виментина по сравнению с нормальной тканью. Стромальные клетки, полученные из опухолевой ткани простаты 50% пациентов, выявляют повышенный уровень «легких» 50 и 42 кД изоформ виментина по сравнению с контролем.
3. Нами впервые установлено, что b-катенин ткани простаты и производных стромальных клеток при электрофореза в денатурирующих условиях и иммуноблоте представлен двумя мажорными медленно- и быстро подвижной формами. Общий уровень b-катенина выше в исходных тканях по сравнению с производными стромальными клетками. В опухолевой ткани 5 из 6 пациентов найден более высокий уровень быстроподвижной формы b- катенина по сравнению с нормальной тканью. Эти отличия не сохраняются в производных стромальных клетках.
4. Нами впервые обнаружена продукция эпителиального маркера AMACR в стромальных клетках, производных из ткани простаты. Уровень AMACR в стромальных клетках, полученных из нормальной и опухолевой ткани предстательной железы пациентов был выше, чем в исходных тканях. Мы не выявили зависимости между уровнем b-катенина и AMACR в тканях и производных стромальных клетках простаты.
ИЛИ
Поиск аналога
📕 Список литературы
🖼 Скриншоты
🛒 Оформить заказ
⚡ Работу высылаем в течении 5 минут после оплаты.