📄Работа №132162
Тема: Пространственная организация прионной формы белка Sup35NMp
Тип работы
Бакалаврская работа
Предмет
физика
Объем:
42 листов
Год:
2018
Просмотров:
61
4700
руб.
🛒 Купить работу
Не подходит эта работа?
Закажите новую по вашим требованиям
Узнать цену на написание
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
📋 Содержание
Введение 3
1. Обзор литературы 4
1.1. Строение белка Sup35 4
1.2. Модели структурной организации фибрилл 6
1.3. Мутации белка Sup35 7
1.4. Работы по исследованию белков с помощью динамического рассеяния света 8
2. Методы исследования фибрилл белка Sup35 9
2.1. Атомная силовая микроскопия (АСМ, AFM) 9
2.2. Сканирующая электронная микроскопия ^ЭМ, SEM) 11
2.3. Динамическое рассеяние света 13
2.4. Программная обработка данных динамического светорассеяния 14
3. Материалы и приготовление образцов 19
3.1. Материалы 19
3.2. Фильтрация раствора белка 19
3.3. Приготовление кювет для динамического светорассеяния 20
3.4. Приготовление растворов белка 20
3.5. Подготовка образцов для АСМ и СЭМ 21
4. Результаты и обсуждение 21
4.1. Изучение агрегации белка Sup35-M0 21
4.2. Изучение агрегации белка Sup35-WT 28
4.3. Изучение агрегации белка Sup35-M5 30
4.4. Изучение агрегации белка Sup35-74 34
4.5. Сравнение кинетики агрегаций различных образцов 37
Заключение 41
Список использованной литературы 42
1. Обзор литературы 4
1.1. Строение белка Sup35 4
1.2. Модели структурной организации фибрилл 6
1.3. Мутации белка Sup35 7
1.4. Работы по исследованию белков с помощью динамического рассеяния света 8
2. Методы исследования фибрилл белка Sup35 9
2.1. Атомная силовая микроскопия (АСМ, AFM) 9
2.2. Сканирующая электронная микроскопия ^ЭМ, SEM) 11
2.3. Динамическое рассеяние света 13
2.4. Программная обработка данных динамического светорассеяния 14
3. Материалы и приготовление образцов 19
3.1. Материалы 19
3.2. Фильтрация раствора белка 19
3.3. Приготовление кювет для динамического светорассеяния 20
3.4. Приготовление растворов белка 20
3.5. Подготовка образцов для АСМ и СЭМ 21
4. Результаты и обсуждение 21
4.1. Изучение агрегации белка Sup35-M0 21
4.2. Изучение агрегации белка Sup35-WT 28
4.3. Изучение агрегации белка Sup35-M5 30
4.4. Изучение агрегации белка Sup35-74 34
4.5. Сравнение кинетики агрегаций различных образцов 37
Заключение 41
Список использованной литературы 42
📖 Введение
Прионами называют самораспространяющиеся и трансформируемые белковые изоформы. Они представляют собой белки с аномальной третичной структурой, способные индуцировать конформационное превращение гомологичных им нормальных клеточных белков в прионную форму. Белок в прионной форме меняет укладку нормального белка «по своему образу и подобию», изменяя его третичную структуру и таким образом увеличивая количество прионных белков. Такие неправильно уложенные белки, в свою очередь, образуют амилоиды — фибриллярные отложения, содержащие большое количество Р- структур, размером от небольших олигомеров до больших нерастворимых агрегатов.
Накопление белковых амилоидов в организме человека или млекопитающих, а конкретно, в их нервных клетках, является причиной развития различных нейродегенаративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, Хантингтона, Крейтцфельда-Якоба и других. На данный момент не существует ни действенных методов лечения подобных болезней, ни точного описания механизма их развития, чем и объясняется актуальность исследований механизма образования амилоидов и распространения прионов.
Белок дрожжей Saccharomyces cerevisiae - Sup35 используется в качестве удобной модельной системы для изучения механизмов образования и распространения амилоидов. Механизм его прионизации достаточно хорошо изучен и описан в большом количестве различных научных работ. Хотя он и не гомологичен прионному белку млекопитающих PrP, ответственному за заболевания человека, однако механизм его укладки и агрегации весьма схож с механизмами для PrP, поэтому понимание переходных процессов для белка Sup35 может проложить путь для разработки эффективной диагностики и лечения заболеваний.
Количество полученной информации о механизмах агрегации и о структурных и морфологических свойствах агрегатов в последнее время значительно увеличилось, однако детальный механизм перехода белков в амилоидную форму, а также влияние амилоидных агрегатов на цитотоксичность на данный момент остаются неизвестными. Для исследования амилоидообразования применяют ряд различных методик, таких как микроскопия, метод кругового дихроизма, флуоресценция в присутствии тиофлавина Т, инфракрасная спектроскопия и метод динамического рассеяния света.
В данной работе изучалась кинетика агрегации и морфология полученных фибрилл белка Sup35 с помощью динамического рассеяния света, сканирующей электронной микроскопии и атомной силовой микроскопии.
Накопление белковых амилоидов в организме человека или млекопитающих, а конкретно, в их нервных клетках, является причиной развития различных нейродегенаративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, Хантингтона, Крейтцфельда-Якоба и других. На данный момент не существует ни действенных методов лечения подобных болезней, ни точного описания механизма их развития, чем и объясняется актуальность исследований механизма образования амилоидов и распространения прионов.
Белок дрожжей Saccharomyces cerevisiae - Sup35 используется в качестве удобной модельной системы для изучения механизмов образования и распространения амилоидов. Механизм его прионизации достаточно хорошо изучен и описан в большом количестве различных научных работ. Хотя он и не гомологичен прионному белку млекопитающих PrP, ответственному за заболевания человека, однако механизм его укладки и агрегации весьма схож с механизмами для PrP, поэтому понимание переходных процессов для белка Sup35 может проложить путь для разработки эффективной диагностики и лечения заболеваний.
Количество полученной информации о механизмах агрегации и о структурных и морфологических свойствах агрегатов в последнее время значительно увеличилось, однако детальный механизм перехода белков в амилоидную форму, а также влияние амилоидных агрегатов на цитотоксичность на данный момент остаются неизвестными. Для исследования амилоидообразования применяют ряд различных методик, таких как микроскопия, метод кругового дихроизма, флуоресценция в присутствии тиофлавина Т, инфракрасная спектроскопия и метод динамического рассеяния света.
В данной работе изучалась кинетика агрегации и морфология полученных фибрилл белка Sup35 с помощью динамического рассеяния света, сканирующей электронной микроскопии и атомной силовой микроскопии.
✅ Заключение
1. Метод динамического рассеяния света позволяет определять зависимость распределения фибрилл прионного белка Sup35NM по длинам от времени его агарегации.
2. Замены M0 (QQ33 — KK34) и M5 (QQ89-90KK) затрудняют агрегацию белка Sup35NM.
3. Отсутствие M-домена в белке Sup35NM упрощает его агрегацию.
Результаты были ранее представлены на VI Молодежной конференции по молекулярной и клеточной биологии Института цитологии РАН.
2. Замены M0 (QQ33 — KK34) и M5 (QQ89-90KK) затрудняют агрегацию белка Sup35NM.
3. Отсутствие M-домена в белке Sup35NM упрощает его агрегацию.
Результаты были ранее представлены на VI Молодежной конференции по молекулярной и клеточной биологии Института цитологии РАН.
ИЛИ
Поиск аналога
📕 Список литературы
🖼 Скриншоты
🛒 Оформить заказ
⚡ Работу высылаем в течении 5 минут после оплаты.