ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Основные методы количественного хроматографического анализа.................. 5
1.1.1. Метод внешнего стандарта (одного эталона)
1.1.2. Метод абсолютной градуировки
1.1.2.1. Проверка соответствия регрессионного уравнения экспериментальным
данным с помощью числовых параметров
1.1.3. Метод стандартной добавки.
1.1.4. Метод последовательных стандартных добавок
1.1.5. Метод внутреннего стандарта
1.1.6. Метод двойного внутреннего стандарта
1.1.7. Метод внутренней нормализации
1.2 Выводы из литературного обзора
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Приборы и реактивы
2.2. Приготовление модельных растворов
2.3. Обработка результатов измерений и оценка их погрешности
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Выявление потерь проб на стадии их дозирования при помощи построения
гистограмм
3.2. Общая характеристика дополнительного стандарта.
3.2.1. Дополнительный стандарт. Определение. Сравнение с внутренним
стандартом.
3.2.2. Относительные параметры аналит/дополнительный стандарт .................. 29
3.2.3. Стабильность относительных параметров в условиях разбавления пробы и
варьировании её объёма при вводе в хроматографическую систему ..................... 313
3.3. Модификация методов количественного анализа за счет использования
дополнительного стандарта
3.3.1. Метод внешнего стандарта
3.3.2. Метод стандартной добавки
3.3.3. Метод абсолютной градуировки
3.3.4. Растворитель пробы в качестве дополнительного стандарта..................... 41
3.4. Проверка применимости модифицированных методов количественно анализа
в методах ВЭЖХ и КЗЭ
Выводы
Список литературы.
ПРИЛОЖЕНИЯ
Одно из основных применений хроматографических методов состоит в количественном определении целевых компонентов с использованием различных методов количественного анализа: внешнего стандарта, абсолютной градуировки, стандартной добавки, внутреннего стандарта и внутренней нормализации. Каждый из этих методов может быть реализован в нескольких вариантах, но общим условием трех первых является необходимость обеспечения максимальной абсолютной воспроизводимости дозирования анализируемых проб в хроматограф для достижения максимально высокой повторяемости абсолютных площадей пиков и снижения случайных составляющих погрешностей определений [1].
Особые сложности в работе вызывает то, что выявление потерь проб при дозировании в хроматограф образцов с неизвестными содержаниями определяемых компонентов представляет собой сложную задачу. Таким образом, прецизионность «традиционных» вариантов методов внешнего стандарта, абсолютной градуировки и стандартной добавки чрезвычайно чувствительна к неконтролируемым потерям проб при их дозировании в хроматограф, что может приводить к неприемлемо большим ошибкам количественных определений. Следовательно, в случаях, когда наблюдаются значительные потери проб на стадии их дозирования необходимо модифицировать эти методы с целью компенсации погрешностей, обусловленных случайными вариациями дозируемых количеств аналитов.
Именно поэтому настоящая работа посвящена разработке способа компенсации случайной составляющей погрешностей определений площадей пиков аналита, в таких методах количественного анализа, как внешний стандарт, абсолютная градуировка и стандартная добавка. Принцип такой компенсации основан на замене абсолютных значений площадей (высот) пиков аналитов относительными параметрами – отношениями площадей пиков «аналит/дополнительный стандарт», что значительно повышает прецизионность количественных определений. При этом нет никаких ограничений на физико-химические свойства дополнительных стандартов, что выгодно отличает разрабатываемый подход от метода внутреннего стандарта
1) С целью компенсации случайных погрешностей количественного хроматографического анализа, вызванных частичными потерями проб на стадии их дозирования и нестабильностью режима анализа, предложен способ модификации трёх его методов: внешнего стандарта, абсолютной градуировки и стандартной добавки. Модификация основана на замене абсолютных количественных параметров пиков относительными параметрами (отношением площадей аналит/дополнительный стандарт) и позволяет заметно увеличить повторяемость результатов;
2) Сформулированы требования к дополнительным стандартам и показано, что они не эквивалентны требованиям к внутренним стандартам в одноименном методе количественного анализа. Главными отличиями являются отсутствие ограничений на их химическую природу и необходимость задания содержания в образцах.
Экспериментально подтверждена возможность использования растворителя в качестве дополнительного стандарта;
3) Подтверждена высокая стабильность относительных параметров в условиях разбавления пробы и варьировании её объёма при вводе в хроматографическую систему;
4) Установлено, что применение дополнительных стандартов позволяет до 50 раз повысить повторяемость результатов количественного анализа при использовании относительных площадей пиков вместо абсолютных;
5) Предлагаемый подход охарактеризован в методах газовой хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии и капиллярного электрофореза.
Показано, что наилучшие результаты количественного анализа модифицированными методами достигаются в условиях газохроматографического анализа.
