Перечень условных обозначений 4
Введение 5
Глава 1 Обзор литературы 6
1.1 Мембранная жидкостная микроэкстракция 6
1.1.1 Двухфазный вариант мембранной жидкостной микроэкстракции 7
1.1.2 Трехфазный вариант мембранной жидкостной микроэкстракции 10
1.1.3 Микроэкстракция с применением мембран, импрегнированных растворителями с переключаемой гидрофильностью 13
1.1.4 Электромембранная жидкостная микроэкстракция 15
1.2 Жидкостная микроэкстракция с применением вращающейся мембраны 18
1.2.1 Двухфазный режим жидкостной микроэкстракции с применением вращающейся мембраны 20
1.2.2 Трехфазный режим жидкостной микроэкстракции с применением вращающейся мембраны 21
1.2.3 Электромембранная жидкостная микроэкстракция с применением вращающейся мембраны 23
1.3 Методы определения тетрациклинов в биологических жидкостях 25
Заключение 31
Глава 2 Экспериментальная часть 32
2.1 Оборудование 32
2.2 Реактивы и материалы 32
2.3 Приготовление растворов 33
2.4 Отбор и подготовка проб 34
2.5 Приготовление вращающегося пористого мембранного диска 35
Глава 3 Обсуждение результатов 36
3.1 Теоретическое обоснование метода пробоподготовки 36
3.2 Схема ВЭЖХ-УФ определения тетрациклинов в биологических жидкостях 37
3.3 Оптимизация параметров, влияющих на эффективность извлечения 38
3.3.1 Выбор метода анализа 38
3.3.2 Выбор оптимальной подвижной фазы 39
3.3.3 Выбор оптимального экстрагента 40
3.3.4 Выбор оптимальной концентрации гексаноата натрия 42
3.3.5 Выбор оптимального рН 42
3.3.6 Выбор оптимального материала мембранного пористого диска 44
3.3.7 Выбор оптимального диаметра мембранного пористого диска 44
3.3.8 Выбор оптимального времени поглощения фазы гексановой кислоты диском 45
3.3.9 Выбор оптимального элюента и его объема 46
3.3.10 Выбор оптимального времени элюирования 47
3.4 Аналитические характеристики разработанной схемы анализа 48
3.5 Проверка правильности референтным методом 50
Выводы 54
Благодарности 55
Список цитируемой литературы 56
Одним из наиболее важных направлений современной жизни является разработка высокоэффективных медицинских методов, основанных на интеграции идей и достижений в различных научных областях, в том числе и в химии. В частности, переход к персонализированной медицине представляет особый интерес как со стороны государства, так и со стороны ученых-химиков. В области аналитической химии уделяется большое внимание объектам, связанным со здоровьем человека, например, таким как биологические жидкости. Химический анализ этих объектов ввиду сложного состава матрицы и зачастую следовых содержаний интересующих аналитов требует разработки эффективных методов разделения и концентрирования, позволяющих проводить надежное определение целевых аналитов.
Целью данной работы явилась разработка схемы микроэкстракционного извлечения антибиотиков тетрациклинового ряда, предполагающей генерирование in situ фазы высшей карбоновой кислоты из гомогенного раствора и одновременное поглощение экстракта вращающимся пористым мембранным диском для последующего ВЭЖХ-УФ определения аналитов.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: предложить и обосновать новый микроэкстракционный подход, основанный на свойствах растворителей с переключаемой гидрофильностью; изучить возможность применения высших карбоновых кислот в качестве экстрагентов для извлечения целевых аналитов; подобрать оптимальные условия микроэкстракционного выделения тетрациклинов в высшие карбоновые кислоты с последующим поглощением экстракта вращающимся пористым мембранным диском; оптимизировать условия ВЭЖХ-УФ определения аналитов; апробировать метод на реальных объектах и подтвердить правильность полученных результатов референтным методом.
В настоящее время одним из перспективных направлений аналитической химии является разработка микроэкстракционных методов, основанных на применении полимерных пористых мембран, импрегнированных органическими растворителями. Такие методы позволяют существенно сократить объемы используемых экстрагентов, что делает их более дешевыми и менее опасными для окружающей среды, по сравнению с традиционными экстракционными методами. Также методы мембранной жидкофазной экстракции позволяют анализировать объекты, способные к образованию эмульсий и суспензий (биологические жидкости, продукты питания), благодаря предохранению экстрагента от внешних воздействий за счет его удерживания капиллярными силами в порах мембраны. Другим преимуществом данных микроэкстракционных методов является их высокая селективность, которая определяется химической природой органического растворителя, импрегнированного в поры мембраны.
Также большое внимание уделяется разработке экстракционных устройств, интегрирующих в себе экстракционные элементы (мембрана, импрегнированная экстрагентом) и элементы для перемешивания (металлический стержень). Применение подобных устройств способствовало возникновению и развитию методов жидкостной микроэкстракции с применением вращающихся мембран, основным преимуществом которых является увеличение эффективности массообмена между фазами за счет непрерывного и интенсивного перемешивания отдающей фазы.
Данная работа была посвящена определению тетрациклинов в биологических жидкостях методом ВЭЖХ-УФ с предварительным концентрированием аналитов в фазу высшей карбоновой кислоты и отделением экстракта на вращающийся пористый мембранный диск.
