Введение 3
1. Обзор литературы 4
1.1. Общая характеристика железа 4
1.2. Физиологические функции железа в растениях 4
1.2.1. Участие железа в дыхании 4
1.2.2. Роль железа в фотосинтезе 4
1.2.3. Роль железа в цветении высших растений 5
1.2.4. Участие железа в окислительно-восстановительных реакциях 5
1.2.5. Влияние железа на азотный обмен растений 6
1.2.6. Запас железа 7
1.3. Дефицит железа. Механизмы адаптации растений к дефициту железа 7
1.3.1. Общая характеристика дефицита железа 7
1.3.2. Механизмы адаптации растений к дефициту железа 7
1.4. Фуллерен и его производные 10
1.4.1. Общая характеристика 10
1.4.2. Применение фуллеренов 11
1.4.3. Биологическое действие фуллеренола 12
2. Материалы и методы 13
2.1. Выращивание растений 13
2.2. Измерение концентрации хлорофилла в листьях 13
2.3. Измерение биомассы растений 14
2.4. Оценка активности Fe(III)-хелатредуктазы в корнях 14
2.5. Определение активных форм железа в листьях 14
2.6. Статистическая обработка данных 14
3. Результаты и обсуждение 15
Выводы 20
Список литературы 21
В настоящее время из-за широкого распространения карбонатных почв, характеризующихся высокими значениями pH, около трети сельскохозяйственных угодий мира имеет пониженное содержание доступного железа. Это приводит к развитию опасного заболевания растений - хлороза, существенно снижающего урожайность сельскохозяйственных культур. Кроме того, естественное плодородие окультуренных почв со временем имеет тенденцию к снижению, что вместе с ростом населения планеты вынуждает человечество использовать более бедные почвы, часто в засушливых регионах с избыточным содержанием бикарбоната и высокими значениями pH. Поэтому проблема восполнения железа в условиях его дефицита в почве для сельского хозяйства стоит очень остро. Существующие методы, такие как некорневые подкормки железом в виде сульфата железа или его хелатной формы, имеют недостатки. Использование сульфата железа требует низких значений рН раствора, что может вызывать ожоги листьев. Хелаты железа лишены такого недостатка, но их высокая стоимость нередко ограничивает их применение. Есть необходимость в поиске новых методов борьбы с хлорозом, включая применение различных наночастиц, характеризующихся высокой реакционной способностью. Возможность использования в сельском хозяйстве фуллеренола в качестве наноматериала является малоизученной темой исследований. Биологический потенциал фуллеренола ещё предстоит выявить, поэтому настоящая работа посвящена исследованию перспектив его применения для решения проблемы дефицита железа у культурных растений.
Цель работы: оценка эффективности применения фуллеренола С60 при некорневых подкормках растений огурца в условиях недостатка железа.
Задачи исследования:
1. Охарактеризовать влияние фуллеренола на эффективность опрыскивания растений огурца сульфатом железа в условиях его недостатка.
2. Сопоставить действие на растения огурца фуллеренола в комбинации с железом с действием традиционно используемых при некорневых подкормках препаратов железа.
3. Изучить влияние свободной формы фуллеренола (без железа) на растения огурца при опрыскивании в условиях недостатка железа
1. В условиях дефицита железа опрыскивание листьев огурца сульфатом двухвалентного железа способствовало увеличению концентрации хлорофилла и активных форм этого микроэлемента в листьях. Эффективность такого опрыскивания существенно возрастала при использовании сульфата железа в комбинации с фуллеренолом (1 мг/л).
2. Фуллеренол в комбинации с сульфатом железа увеличивал концентрацию хлорофилла и активных форм железа в листьях эффективнее комплекса железа с ЭДТА, традиционно используемого для излечивания хлороза растений.
3. Обработка листьев свободными формами фуллеренола (без железа) не оказывала существенного влияние на проявление симптомов дефицита железа у растений. Следовательно, положительный биологический эффект фуллеренола обусловлен его взаимодействием с двухвалентными формами железа при опрыскивании листьев.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 19-016-00003a.
1. Битюцкий Н. П. Минеральное питание растений. СПб.: Из-во С.-Петерб. ун-та, 2014. С. 540 с.
2. Глинка Н.Л. Общая химия. Л.: Из-во Химия, 1981. 720 c.
3. Костерина В.В. Каталаза как представитель биологических катализаторов и ее активность в разных сортах картофеля // Вестник Совета молодых учёных и специалистов Челябинской области, 2016, Т. 1, № 4, С. 31.
4. Кучеренко Н.Е., Виноградова Р.П., Литвиненка Н.А., Цудзевич В.А., Васильев А.Н. Биохимический справочник. Киев.: Из.-во Вища школа., 1979, С. 432.
5. Панова Г.Г., Канаш Е.В., Семенов К.Н., Чарыков Н.А., Хомяков Ю.В., Аникина Л.М., Артемьева А.М., Корнюхин Д.Л., Вертебный В.Е., Синявина Н.Г., Удалова О.Р., Куленова Н.А., Блохина С.Ю. Производные фуллерена стимулируют продукционный процесс, рост и устойчивость к окислительному стрессу у растений пшеницы и ячменя // Сельскохозяйственная биология, 2018, Т. 53, С. 38-49.
6. Abadıa J, Lopez-Millan A, Rombola A., Abadıa A. Organic acids and Fe deficiency: a review // Plant and Soil, 2002, V. 241, P. 75-86.
7. Abadía А., Sanz М., Rivas J., Abadía J. Photosynthetic pigments and mineral composition of iron deficient pear leaves // Journal of Soil Science and Plant Nutrition, 1989, V. 9, P. 827-838.
8. Arbogast J.W., Darmanyan A.P., Foote C.S, Rubin Y., Diederich, F.N., Alvarez M.M., Anz S.J., Whetten R.L. Photophysical properties of C60 // The Journal of Physical Chemistry, V. 95, P. 11 - 12.
9. Álvarez-Fernández A., Abadía J., Abadía А. Iron Nutrition in Plants and Rhizospheric Microorganisms.: Springer, 2006, P. 85-101.
10. Andreev I., Petrukhina A., Garmanova A., Babakhin A., Andreev S., Romanova V., Troshin P., Troshina O., DuBuske L. Penetration of fullerene C60 derivatives through biological membranes // Fullerenes, Nanotubes, and Carbon Nanostructures, 2008, V. 16, P. 89-102 (doi:10.1080/15363830701885831).
11. Andrews S.C., Arosio P., Bottke W., Briat J.F., von Darl M., Harrison P.M., Laulhère J.P., Levi S., Lobreaux S., Yewdall S.J. Structure, function, and evolution of ferritins // Journal of Inorganic Biochemistry, V. 47 (3-4), 1992, P. 161-74. (doi:10.1016/0162-0134(92)84062-R).
12. Anunciación A. Sanz М, Rivas J., Javier A. Photosynthetic pigments and mineral composition of iron deficient pear leaves // Journal of Plant Nutrition, 1989, V. 12, P. 827-838.
13. Balk J, Pilon M. Ancient and essential: the assembly of iron– sulfur clusters in plants. // Trends in Plant Science, 2011, V. 16, P. 218-226.
14. Becker L., Bada J.L., Winans R.E., Bunch T.E. Fullerenes in Allende meteorite // Nature, 1994, V. 372, P. 372-507.
15. Bertero M.G., Rothery R.A., Palak M., Hou C., Lim D., Blasco F., Weiner J.H., Strynadka N.C. Insights into the respiratory electron transfer pathway from the structure of nitrate reductase A // Nature structural Biology, 2003, V. 10, P. 681-687 (doi:10.1038/nsb969).
16. Borisev M., Borisev I., Zupunski M., Arsenov D., Pajević S, Curčić Z, Vasin J, Djordjevic A. Drought Impact Is Alleviated in Sugar Beets (Beta vulgaris L.) by Foliar Application of Fullerenol Nanoparticles// PLoS ONE, 2016, V. 11, P. 1-16
(doi:10.1371/journal.pone.0166248).
17. Briat J-F., Curie C., Gaymard F. Iron utilization and metabolism in plants // Current opinion in plant Biology, 2007, V. 10, P. 276-282.
18. Brown, J. C. Iron chlorosis in plants // Advances in Agronomy, 1961, V. 13, P. 329-369.
19. Brown J.C., Ambler J.E. Iron stress in tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) Sites of Fereduction, absorption and transport // Physiologia plantarum, 1974, V. 31. P. 221-224.
20. Cataldo F, Da Ros T. Medicinal chemistry and pharmacological potential of fullerenes and carbon nanotubes: Springer, 2008, P. 408.
21. Chen M, Zhou S, Zhu Y, Sun Y, Zeng G, Yang C, Xu P, Yan M, Liu Z, Zhang W. Toxicity of carbon nanomaterials to plants, animals and microbes: Recent progress from 2015-present // Chemosphere , 2018, V. 206, P. 255-264.
22. Chen Y. & Barak P. Iron nutrition of plants in calcareous soils // Advances in Agronomy, 1982, V. 35, P. 217-240.
23. Greenwood N.N., Earnshaw A. Chemistry of Elements. Berlin: Pergamon Press, 1998, P. 1376.
24. Hao Y, Ma C., Zhang Z., Song Y., Cao W., Guo J., Zhou G., Rui Y., Liu L., Xing B. Carbon nanomaterials alter plant physiology and soil bacterial community composition in a rice-soil-bacterial ecosystem // Environmental pollution, 2018, V. 232, P. 123-136.
25. Hell R., Stephan U.W. Iron uptake, trafficking and homeostasis in plants.: Springer-Verlag, 2002, P. 541-551.
26. Husebo L.O., Sitharaman B., Furukawa T., Kato L., Wilson J. Fullerenols revisited as stable radical anions // Journal of the American Chemical Society, 2004, V. 126, P. 12055-12064.
27. https://patents.s3.yandex.net/RU2495821C2_20131020.pdf
28. Jiang G, Yang Y. Preparation and tribology properties of water-soluble fullerene derivative nanoball // Arabian journal of Chemistry 2017, V. 10, P. 870-876.
29. Jolley V.D., Cook K.A., Hansen N.C., Stevens W B. Plant physiological responses for genotypic evaluation of iron efficiency in strategy I and strategy II plants-A review // Journal of plant nutrition, 1996, V. 19, P. 1241-1255.
30. Katyal J.C., Sharma B.D. А new technique of plant analysis to resolve iron chlorosis // Plant and soil, 1980, V.55, P. 105-119.
31. Keilin D. On cytochrom, a respiratory pigment common to animals, yearst, and high plants // Proceeding of the Royal Society, 1925, V. 98, ser. B, P. 312.
32. Kerkeb L., Connolly E.L. Iron transport and metabolism in plants.: Springer, 2006, P. 119-147.
33. Kroto H.W., Heath J.R., O’Brien S.C., Curl R.F., Smalley R.E. C60: buckminster-fullerene // Nature, 1985, V. 318, P. 162-163.
34. Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, https://www.kegg.jp.
35. Lah, M.S., Dixon, M., Pattridge, K.A., Stallings, W.C., Fee, J.A., Ludwig, M.L. Structure-function in e. coli iron superoxide dismutase: comparisons with the manganese enzyme from T. Thermophilus // Biochemistry, 1995, V. 34, P. 1646-1660.
36. Liu Q., Zhao Y., Wan Y, Zheng J., Zhang X., Wang C., Fang X., Lin J. Study of the inhibitory effect of watersoluble fullerenes on plant growth at the cellular level // Acsnano, 2010, V. 10, P. 5743-5748.
37. Lucena C, Romera F.J., Rojas C.L., Garcia M.J., Alcantara E., Perez-Vicente R. Bicarbonate blocks the expression of several genes involved in the physiological responses to Fe deficiency of Strategy I plants // Functional plant Biology, 2007, V. 34, P. 1002-1009.
38. Mendel K. Iron availability in plant tissues – iron chlorosis on calcareous soils // Plant and soil, 1994, V. 165, P. 275-283.
39. Mendel K., Planker R.,Hoffman B. Relationship between leaf apoplast pH and iron chlorosis of sunflower (Heliantus annuus L.) // Journal of Soil Science and plant nutrition, 1994, V. 17, P. 1053-1065.
40. Mroz P., Pawlak A., Satti M., Lee H., Wharton T., Gali H., Sarna T., Hamblin M.R. (). Functionalized fullerenes mediate photodynamic killing of cancer cells: type I versus type II photochemical mechanism // Free radical Biology and Medicine, 2007, V. 43, P. 711-719.
41. Nagano T., Arakane K., Ryu A, Masunaga T., Shinmoto K., Mashiko S., Hirobe M. Comparison of singlet oxygen production efficiency of C-60 with other photosensitizers, based on 1268-Nm emission // Chemical and pharmaceutical bulletin, 1994, V. 42, P. 2291-2294.
42. Panova G.G., Ktitorova I.N., Skobeleva O.V., Sinjavina N.G., Charykov N.A., Semenov K.N. Impact of polyhydroxy fullerene (fullerol or fullerenol) on growth and biophysical characteristics of barley seedlings in favourable and stressful conditions. // Journal of Plant Growth Regulation, 2016, V. 79, P. 309-317.
43. Parthasarathy G., Srinivasan R., Vairamani M., Ravikumar K., Kunwar A.C. Occurrence of natural fullerenes in low grade metamorphosed proterozoic shungite from Karelia, Russia // Geochimica et cosmochimica acta, 1998, V. 62, P. 3541-3544.
44. Passardi F., Theiler G., Zamocky M., Cosio C., Rouhier N., Teixera F., Margis-Pinheiro M., Ioannidis V., Penel C., Falquet L., Dunand C. PeroxiBase: The peroxidase database // Phytochemistry, 2007, V. 68, P. 1605-1611.
45. Piotrovskiy L.B., Kiselev O.I. Fullerenes in biology. Saint-Petersburg.: Vostok, 2006, P. 334.
46. Rabotti G., Nisi P. D., Zocchi G. Metabolic implication in the biochemical responses to iron deficiency in cucumber roots // Plant physiology, 1995, V. 107, P. 1195-1199.
47. Römheld V, Marschner H. Evidence for a specific uptake system for iron phytosiderophores in roots of grasses // Plant physiology, 1986, V. 80, P. 175-180.
48. Römheld V. The role of phytosiderophores in acquisition of iron and other micronutrients in graminaceous species: An ecological approach // Plant and soil, 1991, V. 130, P. 127-134.
49. Rouhier, N., Jacquot, J.P. Molecular and catalytic properties of a peroxiredoxin-glutaredoxin hybrid from Neisseria meningitidis // FEBS Letters, 2003, V. 554,
P. 149-153.
50. Sachkova A.S., Kovel E.S., Churilov G.N., Guseynov O.A., Bondar A.A., Dubinina I.A., Kudryasheva N.S. On mechanism of antioxidant effect of fullerenols // Biochemistry and Biophysics reports, 2017, V. 9, P. 1-9.
51. Schneider K, Mueller A. Iron-only nitrogenase: exceptional catalytic, structural and spectroscopic features. Catalysts for nitrogen fixation: nitrogenases, relevant chemical models and commercial processes.: Springer Netherlands, 2004, P. 281-307.
52. Sera N., Tokiwa H., Miyata N. Mutagenicity of the fullerene C60 - generated singlet oxygen dependent formation of lipid peroxides // Carcinogenesis, 1996, V. 17, P. 2163-2169.
53. Semenov K. N., Andrusenko E.V., Charykov N.A., Litasova E.V., Panova G.G., Penkova A.V., Murin I.V., Piotrovskiy L.B. Carboxylated fullerenes: Physico-chemical properties and potential applications // Progress in solid state Chemistry, 2017, V. 47, P. 19-36.
54. Semenov K.N., Charykov N.A., Namazbaev V.I., Keskin V.A. A method for producing a mixture of fullerenols. The Russian Federation patent for the invention № RU2495821C2 (RU2495821C2).
55. Slater E.С. Keilin, Cytochrome, and the Respiratory Chain // Journal of Biological Chemistry, 2003, V. 278, P. 16455-16460.
56. Vigani G. Discovering the role of mitochondria in the iron deficiency-induced metabolic responses of plants // Journal of Plant Physiology, 2012, V. 169, P. 1–11.
57. Schmidt W. Iron solutions: acquisition strategies and signaling pathways in plants // Trends in plant science, 2003, V. 4, P. 188.
58. Yadav B.C., Kumar R. Structure, properties and applications of fullerenes // International journal of nanotechnology, 2008, V. 1, ser. 2, P. 15-24.
59. Zhou P, Huo X, Zhang J, Liu Y, Cheng F, Cheng X, Wang Y, Zhang Y. Visible light induced acceleration of Fe(III)/Fe(II) cycles for enhancing phthalate degradation in C60 fullerenol modified Fe(III)/peroxymonosulfate process // Chemical Engineering Journal, 2020, V. 387, P. 124-126.
60. Zolotarev AA, Lushin AI, Charykov NA, Semenov KN, Namazbaev VI, Keskinov VA, et al. Impact resistance of cement and gypsum plaster nanomodified by watersoluble fullerenols // Industrial & engineering Chemistry research, 2013, V.52; P. 14583-145891.