История происхождения коэнзима Q10 Литературный обзор
1. Нормативные документы БАД
2. Физико-химические свойства коэнзима Q10
3. Биологическая роль в организме
3.1 переносчик электронов
3.2 антиоксидантная функция
4. методы определения (англ. Часть)
4.1 ВЭЖХ
4.2 Электрохимический
4.3 Спектрофотометрический
5. Способы пробоподготовки биологических объектов
5.1 Первичная
5.2 Осаждение белков
5.3 Экстракция
5.4 Восстановление экстрагированных форм Экспериментальная часть
1. Аппаратура, реактивы, электроды, ячейки, объекты исследования
2. Определение коэнзима Q10 вольтамперометрическим методом
1. Аналитический сигнал
1.1 влияние рН раствора на аналитический сигнал
1.2 влияние веществ на аналитический сигнал
3. Определение коэнзима Q10 спектрофотометрическим методом 1 влияние веществ на аналитический сигнал
Обсуждение результатов
Выводы
Список использованной литературы Приложение А
Коэнзим Q10 - это жирорастворимое вещество, которое может синтезироваться в организме человека и поступает в организм вместе с пищей. В малом количестве содержится в продуктах. Коэнзим Q10 нельзя отнести к классу витаминов, относится к группе "убихинонов", от английского слова "ubiquinone", которое переводится как "повсеместный" - означает, что вещества входят в состав любого живого организма. Коэнзим Q10 в основном содержится в энергопродуцирующих структурах клеток, которые называются "митохондрии". Именно поэтому, максимальные концентрации коэнзима Q10 наблюдаются в органах с высокой энергетической потребностью - в сердце, почках, печени.
После 30-35 лет и при нарушении здоровья собственный синтез снижается. И это приводит к приему биологически активных добавок (БАД), в которых содержится CoQ10. Множество научных журналов опубликовывают данные, которые подтверждают прекрасное действие ^Q10. Его применяют для лечения многих заболеваний сердечно-сосудистой системы, пиелонефрита, онкологических заболеваний, а также комплексная терапия часто болеющих детей и пр. Нельзя также забывать о коже, коэнзим Q10, в виде крема, делает ее эластичной.
К качеству биологически активных добавок в настоящее время увеличивается ряд требований к их качеству, которые должны соответствовать критериям, а именно безопасности, качества, эффективности. Критерии строго регламентируются нормативными документами:
Цель работы. Определить содержания коэнзима Q10 в биологически активных добавках методами спектрофотометрии и вольтамперометрии и сопоставить его с нормативными документами.
Исходя из цели, сформировали задачи:
1. Исследовать влияние рН фонового электролита на электрохимический сигнал коэнзима Q10;
2. Установить некоторые метрологические характеристики вольтамперометрической и спектрофотометрической методик определения коэнзима Q10;
3. Исследовать влияние сопутствующих веществ БАД на аналитический сигнал коэнзима Q10 методом «введено-найдено»;
4. Определить содержание коэнзима Q10 в БАДах спектрофотометрическим и вольтамперометрическим методами.
1. Показано влияние рН фонового электролита на электрохимический сигнал коэнзима Q10. Установлено, что с увеличением кислотности среды ток окисления увеличивается, а восстановления уменьшается. Также с изменением рН среды происходит сдвиг потенциалов пиков окисления и восстановления коэнзима Q10 в соответствии с уравнением Нернста.
2. Найдены диапазоны линейной зависимости аналитического сигнала коэнзима Q10 от концентрации для спектрофотометрической (от 1 •lO-6 до 5-10-5 М) и вольтамперометрической (от 5-10-5 до 1 •l 0-4 М) методик.
3. Показано, что в присутствии аскорбиновой кислоты и витамина В6 происходит увеличение аналитического сигнала коэнзима Q10 при его определении вольтамперометрическим методом. Предложена схема пробоподготовки реальных объектов для устранения мешающего влияния данных веществ.
4. Определено содержание коэнзима Q10 в БАД-ах методами спектрофотометрии и вольтамперометрии, показана хорошая сходимость результатов друг с другом. Установлено, что содержание коэнзима Q10 во всех исследуемых БАД-ах соответствует техническим условиям.
1. Нормативные документы по БАД [Электронный ресурс].- Режимдоступа: Шр://врш1:’шк11:о/Нормативные_докумешы_по_биологически- активным_добавкам, - Загл. с экрана.
2. Коэнзим q10 (Убихинон) [Электронный ресурс].- Режимдоступа: http://chimiya-krasoty.livejournal.com/, - Загл. с экрана.
3. КОЭНЗИМ Q10: ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ Макарова Т.П., Батыршина С.В., Данилова Н.И. Журнал: Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. Выпуск № 206 / 2011
4. Mellors A. The inhibition of mitochondrial peroxidation by ubiquinone and ubiquinol / A. Mellors, A.L. Tappel // J Biol Chem. - 1966. - V. 241 (19). - P. 4353-4356.
5. Mellors A. Quinones and quinols as inhibitors of lipid peroxidation / A. Mellors,
A. L. Tappel // Lipids. - 1966. - V. 1 (4). - P. 282-284.
6. Turrens JF. Mitochondrial formation of reactive oxygen species. J Physiol. 2003;552:335-344.
7. Chen Q., Vazquez E.J., Moghaddas S., Hoppel C.L., Lesnefsky E.J. Production of reactive oxygen species by mitochondria: central role of complex Ш. J Biol Chem. 2003;278:36027-36031.
8. Madamanchi N.R. and Runge M.S. Mitochondrial Dysfunction in Atherosclerosis Circ. Res. 2007;100:460-473.
9. Littarru G.P. Energy and defense. Facts and perspectives on coenzyme Q10 in biology and medicine. // Casa Editrice Scientifica Internazionale. - 1994. - pp. 191.
10. Belliere J. Prerequisites for ubiquinone analogs to prevent mitochondrial permeability transition-induced cell death / J. Belliere, F. Devun, C. Cottet- Rousselle, C. Batandier, X. Leverve, E. Fontaine // J Bioenerg Biomembr. - 2012. - V. 44 (1). - P. 207-212.
11. Finckh B. Monitoring of ubiquinol-10, ubiquinone-10, carotenoids, and tocopherols in neonatal plasma microsamples using high-performance liquid chromatography with coulometric electrochemical detection / B. Finckh, A. Kontush, J. Commentz, C. Hubner, M. Burdelski, A. Kohlschutter // Anal Biochem. - 1995. - V. 232 (2). - P. 210-216.
12. Bhagavan H. N. Assessment of coenzyme Q10 absorbtion using an in vitro digestion-Caco-2 cell model. / Chopra R. K. Craft N. E. Chitchumroonchokchai C. Failla M. L. // Int. J. Pharm. - 2007. - Vol. 333. - pp. 112-117.
13. Dhandayuthapani S. Quinones in Penetrocephalus ganapatii (Cestoda: Pseudophyllidea) / Nellaiappan K., Ramalingam K. // J. Parasitol. - 1983. - Vol.
68. - pp. 996-998.
14. Weber C. Coenzyme Q10 in diet daily intake and relative bioavailability. / Bysted A., Holmer G. // Mol. Aspects Med. - 1997. - Vol. 18. - pp. 251-254.
15. Breithaupt D. E., Kraute S. Simultaneous determination of the vitamins A, E, their esters and coenzyme Q10 administered in a multivitamin dietary supplements using an RP-C30 phase. // Eur. Food Res. Technol. - 2006. - Vol. 222. - pp. 643649.
16. Kubo H. Food content of ubiquinol-10 and ubiquinon-10 in the Japanese diet / Fujii K., Kawabe T., Matsumoto S. // Food Comp. Anal. - 2008. - Vol. 21. - pp. 199 - 210.
17. Mosca F. Assay of coenzyme Q10 in plasma by a single dilution step. / Fattorini D., Bomparde S., Littarru G. P. // Anal. Biochem. - 2002. - Vol. 305. - pp. 49-54.
18. Bule M. Singhal R. S. Development of a protocol for supercritical carbon dioxide extraction of ubiquinone-10 from dried biomass of Pseudomonas diminuta. // Bioprpcess. Biosyst. Eng. - 2012. - Vol. 35. - pp. 809-816.
19. Дерябина В.И. «Вольтамперометрический контроль кормов и кормовых добавок на показатели токсичности и биологической ценности», Томск -2013
20. Yuangang Zu, Chunjian Zhao, Chunying Li, Lin Zhang. A rapid and sensitive LC-MS/MS method for determination of coenzyme Q10 in tobacco (Nicotiana tabacum L.) leaves. Pages 1607-1612. 2006