СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ 7
ВВЕДЕНИЕ 8
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ 9
1. Обзор литературы 9
1.1 Растения ультраосновных почв 9
1.2 Влияние избытка ионов Ni, Cu и Zn на рост и развитие растений 10
1.3 Загрязнение почв тяжелыми металлами на Урале 15
1.4 Клеточная селекция 18
1.5 Фиторемедиация 19
2. Материалы и методы 25
2.1 Объект исследования 25
2.2 Стерилизация растительного материала 26
2.3 Пересадка и размножение 26
2.4 Посадка растений на среду, содержащую тяжелые металлы 26
2.5 Фотометрическое определение подвижного Ni2+в среде культивировании и
растительном материале с реактивом Чугаева 26
3. Результаты и обсуждение 28
3.1 Влияние тяжелых металлов на морфологию растений 28
3.2 Содержание Ni2+в побегах растений 37
3.3 Сравнение аккумулятивных способностей A. tortuosum, A. obovatumи А. litvinovii ....40
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 45
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ И ЛИТЕРАТУРЫ 46
ПРИЛОЖЕНИЯ 53
С каждым годом возрастает количество потребляемых природных ресурсов, вместе с тем растет объем выбросов тяжелых металлов на промышленных предприятиях. Токсичные элементы загрязняют близлежащую промышленную территорию, больше всего деградации подвергается почва, следом за ней грунтовые воды и приземный воздух. Данные по мониторингу почв городов, которые расположены вблизи промышленных районов, показывают активное загрязнение верхнего слоя грунта тяжелыми металлами [1]. Перспективным путем решения этой проблемы могут быть технологии фиторемедиации. Этот метод простой и дешевый благодаря тому, что для его реализации используют обычные агротехнические приемы, но для того чтобы окончательно очистить почву требуется несколько лет [2].
Главную роль в успехе проведения мероприятий по очистке почвы от поллютантов в фиторемедиации играет правильный выбор растений, культурных или диких видов, для культивирования их на данной территории, с её почвенно-климатическими особенностями и типом загрязнения. Известно около 400 видов растений - гипераккумуляторов разных тяжелых металлов из 22 семейств. Большую часть, около 300 видов, представляют семейства Brassicaceae, Euphorbiaceae, Flacourtiaceae, Violaceaeаккумулирующие в себе Ni2+, и не менее 30 видов - Cu2+и Zn2+. К растениям - гипераккумуляторам относят те виды, которые могут накапливать в своей биомассе более 1000 мг/кг (Ni2+и Cu2+), 10000 мг/кг (Zn2+) сухой массы [3, 4]. Известны случаи гипераккумуляции никеля дикорастущими растениями, которые растут на почвах, содержащий серпентинит. Эти почвы содержат высокие дозы таких элементов как: кобальт, хром, железо, магний и никель, и низкие - кальция, молибдена, азота, фосфора и калия.
Цель работы - отобрать генотипы растений рода Alissumустойчивые к повышенным концентрациям ионов никеля, меди и цинка в среде.
Для её достижения были поставлены задачи:
1. Изучить литературу о методах клеточной селекции, механизмах устойчивости растений к стрессовым факторам, а так же о загрязнениях почвы тяжелыми металлами;
2. Ввести в культуру in vitroрастения из рода Alissum. Отобрать устойчивые к ионам никеля, меди и цинка генотипы;
3. Изучить способность к накоплению никеля у отобранных генотипов.
В ходе выполненной работы были получены следующие результаты:
1. Была подобрана схема эксперимента для поиска и отбора генотипов A. tortuosum, A. obovatum и А. litvinovii устойчивых к ионам Ni, Cu, Zn ( концентрация ТМ 50-100-200 µМ, в 3-х повторностях);
2. Найдены генотипы устойчивые к Ni2+: A. obovatum 5, 7, 9; A. tortuosum 5, 7, 8, 9; А. litvinovii 1, 7;
3. Найдены генотипы устойчивые к Cu2+: A. obovatum 9; A. tortuosum 1, 5, 8, 9;
4. Найдены генотипы устойчивые к Zn 2+: A. obovatum 2, 5, 7, 9; A. tortuosum 5, 6, 8, 9; А. litvinovii 1, 7;
5. Отобраны генотипы, сочетающие в себе способность быстрого роста, накопление
биомассы и аккумуляцию Ni2+: A. obovatum 1, 5, 9; A. tortuosum 5, 7, 8 и 9;
6. Для фиторемедиации земель с полиметаллическим загрязнением подойдут
генотипы A. obovatum и A. tortuosum, так как они проявили высокую устойчивость
к ТМ, способны к быстрому росту и аккумуляции Ni2+. А именно: A. obovatum № 2,
5, 7, 9; A. tortuosum № 5, 8, 9;
7. Высокую устойчивость к стрессовым условиям проявили генотипы A. tortuosum №
1, 5, 8. При высоких дозах (100-200 µМ) ионов Ni, Cu и Zn, вид сохранял
тенденцию к быстрому росту и высокому проценту ризогенеза.